वाम पूर्वकाल अवरोही धमनी की ligation के माध्यम से myocardial ischemia-reperfusion चोट के एक murine मॉडल
Summary
हम reproducibility बढ़ाने के लिए छोड़ दिया पूर्वकाल अवरोही धमनी (लाड) पर बंधाव की स्थिति में अधिक स्पष्टता के लिए अनुमति देता है कि माउस मॉडल में रोधगलन (एमआई) अनुकरण करने के लिए प्रयोगात्मक ischemia / reperfusion (आई / आर) चोट प्रेरित करने के लिए एक शल्य चिकित्सा पद्धति का परिचय चूहों में एमआई प्रयोगों की.
Abstract
तीव्र या पुराना रोधगलन (एमआई) उच्च रुग्णता और मृत्यु दर में जिसके परिणामस्वरूप हृदय की घटनाओं रहे हैं. एमआई के दौरान काम पर रोग तंत्र की स्थापना और प्रभावी चिकित्सकीय दृष्टिकोण विकसित करने reproducibly नैदानिक घटना अनुकरण और एमआई के साथ जुड़े pathophysiological परिवर्तन को प्रतिबिंबित करने के कार्यप्रणाली की आवश्यकता है. यहाँ, हम अल्पकालिक ischemia-reperfusion (आई / आर) चोट के साथ ही स्थायी बंधाव के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है कि माउस मॉडल में एमआई प्रेरित करने के लिए एक शल्य चिकित्सा पद्धति का वर्णन. इस विधि का बड़ा लाभ यह माउस दिल के बाएं वेंट्रिकल में ischemia प्रेरित करने के लिए इस धमनी की सटीक बंधाव के लिए अनुमति देने के लिए बाईं पूर्वकाल अवरोही धमनी (लाड) के स्थान की सुविधा के लिए है. लाड पर संयुक्ताक्षर की सही स्थिति रोधगलितांश आकार के reproducibility बढ़ जाती है और इस प्रकार अधिक विश्वसनीय परिणाम लाता है. संयुक्ताक्षर की नियुक्ति में अधिक से अधिक सटीक टी, चूहों में एमआई अनुकरण करने के लिए मानक शल्य दृष्टिकोण में सुधार होगापति सांख्यिकीय प्रासंगिक अध्ययन के लिए आवश्यक प्रायोगिक पशुओं की संख्या कम करने और एमआई निम्नलिखित हृदय रोग उत्पादन तंत्र की हमारी समझ में सुधार. एमआई के इस माउस मॉडल भी एमआई निम्न दौरे क्षति को लक्षित उपचार के preclinical परीक्षण के लिए उपयोगी है.
Introduction
रोधगलन (एमआई) के पशु मॉडल इस्कीमिक हृदय रोग 1 की जटिल pathophysiology के अनुसंधान में महत्वपूर्ण हैं. Ischemia-reperfusion (आई / आर) चोट एमआई दौरान उत्पन्न दौरे क्षति एक प्रमुख योगदान है. कोरोनरी परिसंचरण का रोड़ा द्वारा उत्पादित प्रारंभिक ischemia चोट एक समय पर फैशन में छिड़काव बहाल करने के लिए एंजियोप्लास्टी के उपयोग से एमआई रोगियों में कम से कम किया जा सकता है. इस हस्तक्षेप के बहुत कारण तीव्र एमआई, cardiomyocytes की मौत हो जाती है कि मैं / आर चोट में इस्कीमिक क्षेत्र परिणामों में रक्त के प्रवाह की बहाली के लिए होने वाली मौतों की संख्या में कमी आई है जबकि. दौरे जन का यह नुकसान कार्डियक आउटपुट और दिल की विफलता की ओर प्रगति की कमी हुई योगदान देता है. इस प्रकार, मैं / आर चोट से cardiomyocyte मौत में परिणाम है कि तंत्र के अध्ययन हृदय अनुसंधान में जांच का एक महत्वपूर्ण लाइन है. सर्जिकल कोरोनरी बंधाव विभिन्न जानवर प्रकार में एमआई के मॉडल के लिए प्रेरित करने के लिए एक उपयोगी प्रयोगात्मक तकनीक, includi हैचूहे, कुत्ते और सुअर एनजी. विभिन्न प्रयोगशालाओं में प्रकाशन मैं / आर चोट 2,3 के चूहों दिल मॉडल की स्थापना पर विभिन्न तरीकों को पेश किया है. इन तंत्रों में जानकारी हासिल करने के लिए हमें एमआई विकृति विज्ञान के कई पहलुओं को पुन: पेश कर सकते हैं कि विश्वसनीय पशु मॉडल के लिए उपयोग होगा. इस तरह के मॉडल का विकास भी एमआई के उपचार और संबद्ध मैं / आर चोट के लिए चिकित्सकीय दृष्टिकोण के परीक्षण के लिए आवश्यक है.
प्रायोगिक पशुओं में एमआई अनुकरण करने के लिए वर्तमान में उपलब्ध तकनीक शल्य चिकित्सा के अधिकांश तो इस्कीमिक घटना का निर्माण करने के समय में निर्धारित अवधि के लिए एक संयुक्ताक्षर द्वारा occluded है कि धमनी (लाड) उतरते बाएँ पूर्वकाल बेनकाब करने के लिए छाती गुहा में शल्य विच्छेदन शामिल है. तब उस संयुक्ताक्षर मैं / आर चोट के इस्कीमिक क्षेत्र और पीढ़ी के reperfusion के लिए अनुमति देने के लिए हटाया जा सकता है. लाड पर साहित्य की स्थिति हमेशा सही reproduced नहीं है कि, जिसमें इन तरीकों में से एक प्रमुख सीमाइस दृष्टिकोण से प्रेरित एमआई की गंभीरता में भिन्नता हो सकती है. अधिकांश उपलब्ध तकनीकों केवल आम तौर पर दिल के पूर्वकाल दीवार में बालक की अनुमानित स्थान का वर्णन किया. बालक की शाखाओं में बंटी और दिशा स्थान हमेशा ठीक नहीं हुई है और शल्य चिकित्सा के दौरान 6 संभावित जटिलताओं के लिए अग्रणी, 4,5 आसानी से भ्रमित हो सकता है व्यक्ति पशुओं में भिन्न हो सकते हैं. संयुक्ताक्षर के अनुचित स्थान के परिणामों को पूरी तरह से मॉडल की विशिष्टता कोई समझौता करने के लिए बाएं वेंट्रिकल में प्रेरित रोधगलितांश के आकार में परिवर्तनशीलता से चला सकते हैं. यहाँ हम दौरे मैं / आर और बालक पर संयुक्ताक्षर की नियुक्ति के बेहतर सटीकता के लिए अनुमति देता है कि चूहों में स्थायी बंधाव के लिए एक संशोधित विधि प्रस्तुत करते हैं. प्रारंभिक चीरा और आंतरिक विच्छेदन, साथ ही यह महाधमनी से उभर जहां लाड और साइट की बेहतर सराहना की अनुमति देने के अटरिया उठाने के लिए जोड़तोड़ का उपयोग के लिए विशिष्ट दृष्टिकोण को लागू करके. की स्थापनालाड और इसकी उत्पत्ति पर स्थिति एक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य फैशन में लाड ligate करने का अवसर प्रदान करता है. दौरे मैं / आर और स्थायी बंधाव का यह मॉडल सर्जरी के बाद रोधगलितांश आकार में भिन्नता कम हो जाती है, न केवल यह भी ऑपरेशन के दौरान अत्यधिक रक्तस्राव की घटनाओं में कमी कर सकते हैं.
Protocol
Representative Results
Discussion
माउस दौरे ischemia-reperfusion मॉडल नैदानिक तीव्र या जीर्ण हृदय रोग 13,14 अनुकरण करने के लिए हृदय अनुसंधान के लिए एक प्रभावी तरीका है. महत्वपूर्ण प्रयास इस्कीमिक घटनाओं और कई अलग जानवर प्रकार के दिलों में reperfusion क…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस प्रकाशन में रिपोर्ट अनुसंधान गठिया और Musculoskeletal के राष्ट्रीय संस्थान और त्वचा रोग, पुरस्कार संख्या R01-AR063084 के तहत राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान का हिस्सा है, द्वारा समर्थित किया गया. सामग्री केवल लेखकों की ज़िम्मेदारी है और जरूरी नहीं कि राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान के आधिकारिक विचारों का प्रतिनिधित्व नहीं करता है.
Materials
| PhysioSuite with RightTemp Homeothermic Warming | Kent Scientific Corp | PS-RT | |
| Light source | Zeiss | KL 1500 LCD | |
| Mouse Heart Slicer Matrix | Zivic Miller | HSMS001-1 | |
| Micro Tray – Base, Lid, & Mat (6.0 x 10 x 0.75) | Fine Science Tools | 6100A | |
| 2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride | Sigma Aldrich | T8877 | |
| Buprenorphine (Buprenex Injectable) | Reckitt Benkiser Healthcare | NDC 12496-0757-1 | |
| bupivacaine | Hospira | NDC 0409-1163-01 | |
| Isoflurane | Abbott | NDC 5260-04-05 | |
| Betadine Soultion | Purdue Pharma | 25655-41-8 | |
| Mouse Cardiac Troponin T(cTnT) ELISA | Kamiya Biomedical Company | KT-58997 | |
| Fine Scissors | Fine Science Tools | 14040-10 | |
| Dumont #5 Forceps | Fine Science Tools | 11251-30 | |
| Dumont #3 Forceps | Fine Science Tools | 11231-30 | |
| Castroviejo Micro Needle Holders | Fine Science Tools | 12060-01 | |
| Slim Elongated Needle Holder | Fine Science Tools | 12005-15 | |
| Round Handled Needle Holders | Fine Science Tools | 12075-12 | |
| Omano Trinocular Stereoscope | Microscope.com | OM99-V6 | |
| SB2 Boom Stand with Universal Arm | Microscope.com | V6 | |
| Tracheal Tube, 0.5mm, 1/16in Y | Kent Scientific Corp | RSP05T16 | |
| Anesthesia Systems for Rodents and Small Animals | VetEquip, Inc | 901807 | |
| 4-0 silk taper suture | Sharpoint™ Products | DC-2515N | |
| 6-0 silk taper suture | Sharpoint™ Products | DC-2150N |
Referências
- Abarbanell, A. M., et al. Animal models of myocardial and vascular injury. J Surg Res. 162, 239-249 (2010).
- Gao, E., et al. A novel and efficient model of coronary artery ligation and myocardial infarction in the mouse. Circ Res. 107, 1445-1453 (2010).
- Virag, J. A., Lust, R. M. Coronary artery ligation and intramyocardial injection in a murine model of infarction. J Vis Exp. , (2011).
- Salto-Tellez, M., et al. Myocardial infarction in the C57BL/6J mouse: a quantifiable and highly reproducible experimental model. Cardiovasc Pathol. 13, 91-97 (2004).
- Kumar, D., et al. Distinct mouse coronary anatomy and myocardial infarction consequent to ligation. Coron Artery Dis. 16, 41-44 (2005).
- Degabriele, N. M., et al. Critical appraisal of the mouse model of myocardial infarction. Exp Physiol. 89, 497-505 (2004).
- Shao, Y., Redfors, B., Omerovic, E. Modified technique for coronary artery ligation in mice. J Vis Exp. , (2013).
- Klocke, R., Tian, W., Kuhlmann, M. T., Nikol, S. Surgical animal models of heart failure related to coronary heart disease. Cardiovasc Res. 74, 29-38 (2007).
- Nossuli, T. O., et al. A chronic mouse model of myocardial ischemia-reperfusion: essential in cytokine studies. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 278, 1049-1055 (2000).
- Cozzi, E., et al. Ultrafine particulate matter exposure augments ischemia-reperfusion injury in mice. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 291, 894-903 (2006).
- Kim, S. C., et al. A murine closed-chest model of myocardial ischemia and reperfusion. J Vis Exp. , 3896 (2012).
- Nagarajan, V., Hernandez, A. V., Tang, W. H. Prognostic value of cardiac troponin in chronic stable heart failure: a systematic review. Heart. 98, 1778-1786 (2012).
- Borst, O., et al. Methods employed for induction and analysis of experimental myocardial infarction in mice. Cell Physiol Biochem. 28, 1-12 (2011).
- Diepenhorst, G. M., van Gulik, T. M., Hack, C. E. Complement-mediated ischemia-reperfusion injury: lessons learned from animal and clinical studies. Ann Surg. 249, 889-899 (2009).
- Benavides-Vallve, C., et al. New strategies for echocardiographic evaluation of left ventricular function in a mouse model of long-term myocardial infarction. PLoS One. 7, 41691 (2012).
- Bamberg, F., et al. Accuracy of dynamic computed tomography adenosine stress myocardial perfusion imaging in estimating myocardial blood flow at various degrees of coronary artery stenosis using a porcine animal model. Invest Radiol. 47, 71-77 (2012).
