左前下の動脈の結紮を通して心筋虚血再灌流傷害のマウスモデル
Summary
我々は、再現性を高めるために左前下行枝（LAD）に結紮の位置決めにおいてより明確にするために可能にするマウスモデルにおける心筋梗塞（MI）をシミュレートするための実験的虚血/再灌流（I / R）傷害を誘導するための外科的方法を紹介マウスでのMIの実験の。
Abstract
急性または慢性の心筋梗塞（MI）は、高い罹患率および死亡率をもたらす心血管イベントである。ミシガン中に職場での病理学的メカニズムを確立し、効果的な治療アプローチを開発することは、再現性の臨床発生率をシミュレートし、心筋梗塞に関連する病態生理学的変化を反映するための方法論が必要である。ここで、我々は短期の虚血 – 再灌流（I / R）傷害ならびに永久結紮に使用することができるマウスモデルにおいてMIを誘導するための外科的方法を記載する。この方法の主な利点は、マウス心臓の左心室に虚血を誘発するために、この動脈の正確なライゲーションを可能にするために、左前下行枝（LAD）の場所を容易にすることである。 LAD結紮上の正確な位置決めは、梗塞サイズの再現性を増加させ、したがって、より信頼性の高い結果を生じる。合字の配置の高い精度は、T、マウスでは、MIをシミュレートするために、標準的な外科的アプローチを改善しますHUS統計学関連研究に必要な実験動物の数を減らし、MI後の心機能障害を生じるメカニズムの理解を向上させること。 MIのこのマウスモデルは、MI後の心筋損傷を対象とした治療法の前臨床試験のために有用である。
Introduction
心筋梗塞（MI）の動物モデルは、虚血性心疾患1の複雑な病態生理の研究に重要である。虚血再灌流（I / R）傷害ミシガン中に生成された心筋障害の主要な原因である。冠循環の閉塞により製造初期虚血傷害は、適時に灌流を回復させる血管形成術を用いて、MI患者において最小化することができる。この介入が大幅に急性心筋梗塞、心筋細胞の死につながるI / R障害における虚血領域の結果への血流の回復に死亡者数が減少しているが。心筋質量のこの損失は、心不全に向かって心拍出量および進行の低下に寄与する。このように、I / R傷害から心筋細胞死に至るメカニズムの研究は、心臓血管研究の調査の重要なラインです。外科的冠動脈結紮は、様々な動物種におけるMIのモデルを誘導する有用な実験手法、includiですラット、イヌおよびブタngの。異なる実験室での出版物は、I / R損傷2,3のマウスの心臓モデルの確立に様々な方法を導入しています。これらのメカニズムへの洞察を得るために、我々は、MIの病理学のいくつかの側面を再現できる信頼性の高い動物モデルへのアクセス権を持っている必要があります。このようなモデルの開発も、MIの治療および関連するI / R損傷のための治療的アプローチをテストするために不可欠である。
実験動物において、MIをシミュレートするために現在利用可能な外科技術のほとんどは、その後の虚血性イベントを生成するための時間で定義された期間の合字に吸蔵されている動脈（LAD）を左前を露出させ、胸腔に外科的切開を伴う。その合字は、I / R損傷の虚血領域と世代の再灌流を可能にするために取り外すことができます。 LADに関する文献の位置が常に正確に再現されないことを、これらのアプローチの一つの主要な制限このアプローチにより誘発される心筋梗塞の重症度の変化につながることができます。最も利用可能な技術は、一般的に、心臓の前壁にLADのおおよその位置を説明した。 LADの分岐と方向は個々の動物に変化することができるように場所が常に固定されておらず、手術の6時の潜在的な合併症につながる、4,5簡単に混乱することができます。合字の不適切な配置の結果は完全にモデルの特異性を損なうため、左心室に誘導される梗塞の大きさのばらつきから実行することができます。ここでは、LAD上の合字の配置の精度向上を可能にしたマウスの心筋のI / Rと永久連結に変更された手法を提案する。最初の切開および内部解剖だけでなく、それが大動脈から出LAD、サイトのよりよい理解を可能にするために、心房を持ち上げる操作の使用のための具体的なアプローチを適用することにより。確立LADとその起源上の位置は、再現可能な方法でLADを結紮する機会を提供する。心筋I / Rと永久結紮のこのモデルは、手術後の梗塞サイズのばらつきを減少させるだけでなく、それはまた、動作中に過剰な出血の発生率を減少させることができる。
Protocol
Representative Results
Discussion
マウスの心筋虚血再灌流モデルは、臨床的急性または慢性心疾患13,14をシミュレートする心臓血管研究のための有効な方法である。かなりの努力が虚血事象、いくつかの異なる動物種の心臓における再灌流損傷を生じる外科的アプローチを開発し、登録するために適用されている。異なる動物システムの使用に特定の利点がありますが、マウスがマウスの心臓に心筋のI / Rを生産する?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この刊行物で報告された研究は、関節炎や筋骨格系の独立行政法人と皮膚疾患、受賞番号R01-AR063084下国立衛生研究所の一部でサポートされていました。内容はもっぱら著者の責任であり、必ずしも国立衛生研究所の公式見解を示すものではありません。
Materials
| PhysioSuite with RightTemp Homeothermic Warming | Kent Scientific Corp | PS-RT | |
| Light source | Zeiss | KL 1500 LCD | |
| Mouse Heart Slicer Matrix | Zivic Miller | HSMS001-1 | |
| Micro Tray – Base, Lid, & Mat (6.0 x 10 x 0.75) | Fine Science Tools | 6100A | |
| 2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride | Sigma Aldrich | T8877 | |
| Buprenorphine (Buprenex Injectable) | Reckitt Benkiser Healthcare | NDC 12496-0757-1 | |
| bupivacaine | Hospira | NDC 0409-1163-01 | |
| Isoflurane | Abbott | NDC 5260-04-05 | |
| Betadine Soultion | Purdue Pharma | 25655-41-8 | |
| Mouse Cardiac Troponin T(cTnT) ELISA | Kamiya Biomedical Company | KT-58997 | |
| Fine Scissors | Fine Science Tools | 14040-10 | |
| Dumont #5 Forceps | Fine Science Tools | 11251-30 | |
| Dumont #3 Forceps | Fine Science Tools | 11231-30 | |
| Castroviejo Micro Needle Holders | Fine Science Tools | 12060-01 | |
| Slim Elongated Needle Holder | Fine Science Tools | 12005-15 | |
| Round Handled Needle Holders | Fine Science Tools | 12075-12 | |
| Omano Trinocular Stereoscope | Microscope.com | OM99-V6 | |
| SB2 Boom Stand with Universal Arm | Microscope.com | V6 | |
| Tracheal Tube, 0.5mm, 1/16in Y | Kent Scientific Corp | RSP05T16 | |
| Anesthesia Systems for Rodents and Small Animals | VetEquip, Inc | 901807 | |
| 4-0 silk taper suture | Sharpoint™ Products | DC-2515N | |
| 6-0 silk taper suture | Sharpoint™ Products | DC-2150N |
Referências
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