여기서 우리는 측면 관점에서 초파리 성인 및 애벌레 돌연변이 표현형의 고품질 디지털 영상을 획득하는 간단하고 널리 접근 현미경 기술을 설명합니다.
Abstract
초파리 melanogaster은 신경계의 기능을 연구하기위한 강력한 실험 모델 시스템이다. 신경계의 기능 장애의 원인이 유전자 변이는 종종 가능한 유충 적절하게 텍스트로 설명하거나 완전히 하나의 사진 이미지로 표현하기 어려운 운동 결함이 표현형이 성인을 생산하고 있습니다. 과학 출판사의 전류 모드는, 그러나, 원고 동행 보조 재료로서 디지털 영상 매체의 제출을 지원한다. 여기에서 우리는 측면 관점에서 모두 초파리 애벌레와 성인 표현형의 고품질 디지털 영상을 획득하는 간단하고 널리 접근 현미경 기술을 설명합니다. 이 탈선 기관차 행동의 관찰과 미묘한 차이와 변화의 분석을 할 수 있기 때문에 사이드 뷰에서 애벌레와 성인 운동의 비디오는 유리하다. 우리는 성공적으로 시각화하고 aberran 정량화하는 기술을 사용했다t는 정리를 포함하여 성인 돌연변이 표현형과 행동뿐만 아니라, 셋째 령 유충의 행동을 크롤링.
Introduction
일반적인 과일 초파리 플라이는1-3 신경계의 기능을 연구하는 실험 모델 강력한 시스템이다. 구조 진화 및 인간과 신경계의 기능의 보전,뿐만 아니라 유전자 조작의 용이성 및 유전 도구의 광대 한 배열은 초파리보기 인간 신경 퇴행성 질환 (4)를 모델링하는 초연 유기체를 만든다. 신경계의 기능 장애의 원인이 유전자 변이는 종종 장애인 운동으로 가능한 돌연변이 애벌레와 성인 초파리 초래한다. 신경계 결함이있는 돌연변이 체에서 관찰 된 표현형은 운동, 비정상적인 조정하고, 성인의 경련 운동의 속도뿐만 아니라 신체 벽 근육의 연동 수축 적자, 유충의 부분 마비를 감소 등이 있습니다. 이 표현형은 높은 처리량 유전 화면과 돌연변이 유충 5의 운동 분석의 개발에 이용 된, 운동 손상을 정량화하고 신경계의 기능에 필요한 유전자를 식별하기위한 6 성인 7 ~ 10초파리. 이러한 접근은 유충 및 성인 기관차 동작을 정량화하는 데 매우 유용하지만, 이들은 각각 특정 비정상적인 동작에 대한 정성적인 정보를 전달하지 못한다. 돌연변이 제 령 유충 행동 분석에서 변경된 운동력 파라미터를 나타낼 수있는 반면이 크롤링주기 동안 리듬 연동 수축의 변화, 조정의 일반적인 결여 또는 후방 신체 부분 마비의 결과 인 경우, 예를 들어, 불분명 할 수있다 벽의 근육. 여기서 우리는 측면 관점에서 초파리 성인 및 애벌레 기관차 표현형의 고품질 디지털 영상을 획득하는 간단하고 널리 접근 현미경 기술을 설명합니다. 측면 관점에서 인수 한 디지털 비디오 locomotiv의 미묘한 차이의 직접 관찰 및 분석을 할 수 있습니다더 많은 정보를 사이드 뷰 방향에서 전자의 행동.
Protocol
1 스테레오 현미경 시스템 주 :이 프로토콜은 쉽게 영상을 취득하는 기능과, 디지털 카메라에 결합 된 거의 모든 스테레오 현미경 시스템에 적용 할 수 있지만, 정보는 (재료 / 장비의 도표) 연구실에서 사용되는 시스템에 제공된다. 상업적 디지털 카메라에 결합 안 현미경 스테레오 현미경을 이용하여 디지털 영상을 획득. 커플 스테레오 현미경 안 현미경 포?…
Representative Results
우리는 성공적으로 획득하고 stathmin 유전자의 기능의 상실 (그림 2) (14)와 관련된 애벌레 행동 표현형을 정량화하기 위해이 기술을 사용하고 있습니다. stathmin 유전자는 수용성 튜 불린의 풀에서 튜 불린 이량 체를 분할 미세 소관 규제 단백질을 암호화하고, 미세 소관 결합과 해체 (15, 16)을 촉진한다. Stathmin 기능은 말초 신경 축색 돌기 (14)의 미세…
Discussion
신경계의 기능을 연구하기위한 모델 시스템으로 초파리 melanogaster의 강도는 크게 유전 가능한 강력한 도구 수렴 및 개발 강력한 행동 분석의 광범위한 유래한다. 여기서 우리는 측면 관점에서 초파리 성인 및 애벌레 기관차 표현형의 고품질 디지털 영상을 획득하는 간단하고 널리 접근 현미경 기술을 제시한다. 우리는 성공적으로 특성화하고 후방 마비의 정도를 정량화하기 위해이 …
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
저자는 영상 내레이션을 제공하는 기술 지원 및 지원, 제임스 바튼에 대한 알렉산드라 오피을 인정하고자하고, 첨부 된 영상에 나타나는에 대한 라모나 Flatz 및 Joellen 스위니. 이 작품은 MJ 머독 자선 신탁 (JED에 부여 번호 2012205)에 의해 지원되었다.
Materials
Trinocular Stereozoom Microscope
Olympus Corporation
SZ6145TR
½ C-mount was removed and replaced with 1x C-mount
Zenger, B., Wetzel, S., Duncan, J. Acquisition of High-Quality Digital Video of Drosophila Larval and Adult Behaviors from a Lateral Perspective. J. Vis. Exp. (92), e51981, doi:10.3791/51981 (2014).