생물 검정으로 소 장간막 동맥과 정맥의 섹션을 분리하고 사용하면 소장에서 Vasoactivity을 테스트
Summary
소장은 자주 혈액 흐름에 부정적인 영향을주고 영양분 흡수에 영향을 미칠 수있는 독소에 노출된다. , 화합물 또는 관심의 독소를 multimyograph 및 장간막 동맥을 사용하고 정맥 분리하는 vasoactivity에 대한 검사를 할 수 있습니다.
Abstract
포유류의 위장 시스템은 지속적으로 해당 시스템으로부터 혈류에 영향을 미칠 수있는 화합물 (바람직한 및 바람직하지 않은)에 노출된다. 소장에 혈액 흐름의 변화는 기관의 흡수 기능에 대한 효과가 발생할 수 있습니다. 발효와 소화 과정을 통해 사료에서 해방 독소에 특히 관심이 생산 효율성을 개선 할 수있는 영역으로 반추 동물에서 개발했습니다. 이 문서와 관련된 비디오는 소 장간막 동맥의 고립 된 단면에서 vasoactivity과 multimyograph를 사용하여 정맥 화면 화합물을 개발 한 체외 생물 검정을 설명합니다. 혈관이 마운트 myograph으로 평형화되면, 생물 분석 자체가 사용될 수있다 : 수축성 응답 또는 관심있는 화합물을 평가하기 vasoactivity 스크리닝 도구로; 약리학 적으로 특정 수용체 작용제에 의해 수용체를 표적 종류의 존재를 결정의; 하나 이상의 길항제의 존재와 수용체의 역할을 결정하고; 또는 길항제를 사용하여 원하는 화합물의 잠재적 인 상호 작용을 결정합니다. 이 모든 것을 통해, 데이터는 실시간으로 수집되고, 하나의 동물로부터 수집 된 조직은 다른 실험 치료의 다수 (체외 이점)에 노출하고, 정확을 제공하는 모세관 침대의 양쪽에 혈관 구조를 의미 할 수있다 소장을 지원하는 구 심성 및 원심성 혈액 공급에 일이 될 수 있는지의 그림.
Introduction
티슈 침대 혈류량의 변화는 장기의 기능에 큰 영향을 미칠 수있다. 소장의 주요 기능은 영양소 흡수이다. 영양소 흡수 및 혈류 증가 표면 일 소화물 이동함에 따라 영양소 흡수에 도움을 위해 장내의 흡수성 표면 동맥 혈류가 필요하다. 혈류의 감소로 인해 transepithelial 그라데이션이 감소로 영양소 흡수의 감소를 일으킬 수있다. 영양소 이외에, 또한 소장의 장간막 국소 혈류에 효과를 발휘하는 2 차 대사, 약물, 독소에 노출 될 수있다. 반추 동물의 경우, 화합물은 사료에서 해방 될 수있다 (예를 들면, 아미노산, 또는 맥각 알칼로이드와 같은 독소와 같은 영양소) foregut의 발효 과정을 통해. 이 화합물은 반추위 발효 미생물의 신진 대사를 살아남을 경우, 지금은 흡수 가능또는 상호 작용 그들은 동물의 위장관을 통과있다.
생체 내 혈류를 측정하는 다른 방법을 사용할 수가있다 (예를 들어, 도플러 초음파, 혈액 유량계, 방사성 표지 된 미소 구, 및 표시 희석 기법 내주) 다양한 실험 시나리오 또는 치료의 평가를 허용한다. Mulvany 및 Halpern 3 전선을 사용하는 기술을 설명하는 문서 myograph 혈관 링 제제를 장착 발행까지 그러나, 혈관 평활근의 기계적 또는 약리학 적 특성에 관한 정보를 얻기 위해, 방법은 대형 선박을 제한된 남았다. 이 기술의 개발 이후 변형 관형 구조체의 평가 다른 다양한 애플리케이션을 허용 연관된 myograph 시스템으로 이루어질 것을 계속한다. 시스템은 또한 여기서 큰 혈관 관류 4를 장착하기위한 고정 봉을 이용하도록 한 내용기술이 요구되지 않습니다.
용기 및 동물 종류와 다른 동물 종의 데이터로부터 동일한 용기에 다른 해부학 적 기원과 구별에서 혈관의 dissimilarities 때문에 쉽게 다른 선박 또는 다른 동물 5 종류에서 동일한 용기에 걸쳐 추정 될 수 없다. 따라서, 별도의 생물 검정을 개발하고 이러한 측면이 변경 언제든지 확인해야합니다. 최근 여러 생물 검정은 복재 정맥과 오른쪽 반추위 동맥과 정맥 6,7는 가축에 사용하기 위해 이러한 기술과 수사관 개발되었다.
이러한 생물학적 검정은 맥각 알칼로이드는 소장지지 혈관에 미치는 효과를 구체적으로 조사하기 위하여 개발되었다. 그것은 공급 알칼로이드 50 ~ 60 %로 4 위 내용에 나타나는 것으로보고되었다, 그러나 5 %는 대변 팔에 복구됩니다. 스트릭 랜드 등. 9, 맥각 알칼로이드의 리뷰가 가능한 데이터 sugg를 언급EST는 소장 흡수가 ergopeptine 가장 중요한 사이트가 될 수 있음. 커트 등. 맥각 알칼로이드의 열을 검토 바이오 측면 그들이 상피 장벽을 통과하면, 맥각 알칼로이드가 쇄골 하 정맥 또는 장간막 정맥 및 포털 혈액으로 림프 시스템에 의해 하나를 운송 말했다. 로즈 등. 11은 높은 내생 감염 (높음 맥각 알칼로이드) 다이어트 소모 처리구에서 십이지장 혈류의 감소 및 결장을보고 하였다. 오른쪽 반추위 동맥과 정맥 생물 검정을 사용하여, 푸트 등. (12) 맥각 알칼로이드가 반추위 혈관에서 혈관 작용 것을 보여 주었다. 푸트 외. 13이어서 생체 내에서 증명이 감소 반추위 상피 혈류 맥각 알칼로이드 결과로 반추위 노출. 반추위의 흡수성 표면에 혈류 감소는 부수적 영양소 (휘발성 지방산) 플럭스의 감소를 일으켰다. 한때 감안할 때foregut에서 소장에게 전달 맥각 알칼로이드의 antity; 이 소장 혈관 및 영양 흡수에 비슷한 효과가 발생할 것이라고 가정했다. 이는 소 근위 회장 장간막 동맥 및 정맥 생물 검정의 개발을 필요로.
Protocol
Representative Results
Discussion
이러한 생물학적 검정의 개발 초기 도전 장간막 혈관 용 반복 수집 사이트 구축했다. 회장 결과적 장간막 통해 소장에서 진행 중에 소장 변화의 기능의 일부와 유사한 패턴으로 변화 샘플 사이트 일관성은 중요하다. 장간막 동맥과 정맥의 회장 지점은 가장 쉽게 식별 해부학 적 랜드 마크를 통해이었다. 맹장의 위치 및 장간막의 왼쪽에 그 말단에 회맹 배 다음으로이 두개골 장간막 동맥 (15)의…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
저자는이 문서에 사용 실험 조직을 수집 할 수있는 기회를 제공하기 위해 라이언 채플린 켄터키 고기 연구소와 동물 식품 과학과의 대학의 박사 그레그 Rentfrow을 인정합니다.
Materials
| Name of the Material/Equipment | Company | Catalog Number | Comment/Description (optional) |
| Multi Myograph | Danish Myo Technologies | 610M | A myograph is critical to this bioassay, but there are other platforms available for use that will suffice. |
| Powerlab 8/sp | ADIntruments | ML785 | |
| LabChart 7 | ADInstruments | Version 7 | |
| Force Calibration Kit | Danish Myo Technologies | 100055 | Specific to DMT myographs |
| Bottle-top Filter | Nalgene | 595-4520 | 0.22 um pore size; 45 mm neck size |
| #5 Jewler’s Forceps | Miltex | 555008FT | Any brand of forceps can be used |
| Noyes Iris Scissors | Miltex | 18-1510 | Any brand of scissors can be used |
| Dissecting Scope | Zeiss | Stemi 2000-C | Any brand of dissecting light microscope will suffice |
| Adjustable Tissue Matrice | Braintree Scientific | TM C12 | This is not critical to the assay, but greatly reduces section to section variation in length and speeds up the slicing process greatly |
| Krebs-Hensleit Buffer | Sigma-Aldrich | K3753-10x1L | It is not necessary to buy Krebs, this can be made in house |
| Calcium chloride dehydrate | Sigma-Aldrich | C7902-500G | |
| Sodium bicarbonate | Sigma-Aldrich | S5761-500G | |
| Desipramine-HCl | Sigma-Aldrich | D3900-5G | |
| Propranolol-HCl | Sigma-Aldrich | P0884-1G | |
| KCl | Sigma-Aldrich | P9333-500G | |
| 95% O2/5% CO2 | Scott Gross | UN3156 |
Referências
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