प्राथमिक ट्यूमर और / या पूर्व नैदानिक के लिए एसोसिएटेड Metastases और चिकित्सा के नैदानिक विकास के पूर्व vivo उपचार की प्रतिक्रिया
Summary
स्थापित कैंसर कोशिका लाइनों और xenografts पिछले कई दशकों के लिए कैंसर अनुसंधान का मुख्य आधार रहा है. हालांकि, हाल ही में सबूत चिकित्सीय प्रतिक्रिया बहुत ट्यूमर सेल microenvironment से प्रभावित होता है कि पता चलता है. इसलिए, हम दवा के विकास उद्देश्यों के लिए प्राथमिक ट्यूमर नमूनों की एक पूर्व vivo विश्लेषण विकसित किया है.
Abstract
The molecular analysis of established cancer cell lines has been the mainstay of cancer research for the past several decades. Cell culture provides both direct and rapid analysis of therapeutic sensitivity and resistance. However, recent evidence suggests that therapeutic response is not exclusive to the inherent molecular composition of cancer cells but rather is greatly influenced by the tumor cell microenvironment, a feature that cannot be recapitulated by traditional culturing methods. Even implementation of tumor xenografts, though providing a wealth of information on drug delivery/efficacy, cannot capture the tumor cell/microenvironment crosstalk (i.e., soluble factors) that occurs within human tumors and greatly impacts tumor response. To this extent, we have developed an ex vivo (fresh tissue sectioning) technique which allows for the direct assessment of treatment response for preclinical and clinical therapeutics development. This technique maintains tissue integrity and cellular architecture within the tumor cell/microenvironment context throughout treatment response providing a more precise means to assess drug efficacy.
Introduction
प्रभावोत्पादक कैंसर चिकित्सा विज्ञान का विकास बेहद चुनौतीपूर्ण साबित हो गया है. कैंसर कोशिका लाइनों और ट्यूमर explants – और साथ ही xenografts आधे से अधिक एक सदी 1,2,3 के लिए कैंसर अनुसंधान में इस्तेमाल किया गया है. तिथि करने के लिए, दवा संवेदनशीलता और प्रतिरोध दोनों स्थापित कैंसर कोशिका लाइनों में और रोगी व्युत्पन्न xenografts की आणविक विश्लेषण (PDX) अपरिहार्य है. हालांकि, स्थापित कैंसर कोशिका लाइनों में यौगिकों का परीक्षण अक्सर इन विवो प्रभावकारिता के भविष्य कहनेवाला नहीं है, और विशेष रूप से PDX मॉडल में, पशुओं में vivo अध्ययन में इसी बहुत महंगा है और समय लेने वाली है. इन मॉडल प्रणाली, ट्यूमर प्रगति और चिकित्सीय रणनीतियों के जवाब में देशी microenvironment के प्रभाव पर सूचित करने के लिए अर्थात् अक्षमता की सीमाओं, इन विश्लेषण तारीफ करने के लिए अतिरिक्त तरीकों को विकसित करने के लिए अनुसंधान क्षेत्र का नेतृत्व किया है. हाल ही की, बढ़ ध्यान रोगी Tum के पूर्व vivo विश्लेषण की दिशा में भुगतान किया जा रहा हैकैंसर चिकित्सीय प्रतिक्रिया कैंसर कोशिकाओं के अंतर्निहित आणविक संरचना को विशेष नहीं है बल्कि बहुत पारंपरिक संवर्धन तरीकों और द्वारा recapitulated नहीं किया जा सकता है कि ट्यूमर सेल microenvironment 6, 7 एक फीचर से प्रभावित है कि कारण अधिक से अधिक समझने के लिए या explants 4, 5 / या PDX. उपरोक्त संदर्भ में पूर्व vivo विश्लेषण (यानी., आसन्न आसपास के ट्यूमर सेल microenvironment के प्रभाव) बल्कि सेलुलर वियोजन 8, 9 की पूर्व vivo विश्लेषण से, व्यवहार्य प्राथमिक ट्यूमर / मेटास्टेसिस वर्गों के आकलन निकलता है.
हम दोनों रोगी प्राथमिक ट्यूमर के (, सटीक कटा हुआ ताजा ऊतक वर्गों यानी.) और जुड़े मेटास्टेसिस (यानी, लिम्फ नोड्स) ईमानदारी से प्रतिक्रिया पर बताते हैं कि (IC50), बंद लक्ष्य प्रभाव एक पूर्व vivo तकनीक पर यहाँ रिपोर्ट और आणविक के लिए अनुमति देता है प्रतिरोध और प्रतिक्रिया तंत्र का विश्लेषण. Therape के साथ ही, एक correlative विश्लेषणbiomarker और जीन अभिव्यक्ति प्रोफाइल बनाम utic संवेदनशीलता / प्रतिरोध (यानी., उच्च दवा प्रतिक्रिया विशेष जैविक प्रोफाइल के साथ रोगी से मेल खाता है) ब्याज की प्रयोगात्मक दवा के लिए प्रतिक्रिया करने के लिए और अधिक होने की संभावना रोगियों की पहचान करने के प्रयास में किया जा सकता है. एक मल्टी पैरामीटर फैशन में पूर्व vivo तकनीक और मूल्यांकन के आवेदन रोगी चयन और नैदानिक परिणामों के समग्र सुधार की दिशा में आंदोलन है.
पूर्व vivo उपचार प्रतिक्रिया विश्लेषण कैंसर चिकित्सा विज्ञान की preclinical और नैदानिक विकास में एक मानक उपकरण बन सकता है और चिकित्सीय विकास रणनीतियों में एक व्यक्तिगत चिकित्सा दृष्टिकोण की दिशा में एक कदम के रूप में कल्पना की है.
Protocol
Representative Results
Discussion
प्रभावोत्पादक चिकित्सकीय रणनीति विकसित करने का प्रयास करते कैंसर जीव महत्वपूर्ण चुनौतियों का सामना. स्थापित कैंसर सेल तर्ज पर विकास में दवाओं का परीक्षण सही ढंग से विवो प्रतिक्रिया में और PDX म…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The authors would like to thank the MSKCC Tissue Procurement Service Team (TPS), specifically, Maria Corazon Mariano, Priscilla McNeil, Anas Idelbi, Daniel Navarrete and Katrina Allen, in all of their efforts in the successful pursuit of this project and funding from the following sources: 5 R21 CA158609-02 and the Conquer Cancer Foundation and the Breast Cancer Research Foundation. In addition, the authors would like to thank Eric Cottington PhD, Vice President of the Office of Research and Project Administration, the Office of Technology Development, Research Outreach and Compliance and RTM Information Systems Support, in the support of the submission of this manuscript.
Materials
| Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| Vibratome Leica VT1000s | Leica | 14047235613 | |
| UltraPure agarose | Invitrogen | 16500500 | Prepare 4% and 6% before use |
| Injector blade | Ted Pella | 121-4 | |
| MEM with Penicillin + Streptomycin | Media Core Facilities (MSKCC) | The media is prepared at Memorial Sloan Kettering Cancer Center | |
| Scalpel no. 10 | Thermo Scientific | 31-200-32 | |
| Disposable forceps | Cole-Parmer | 84011182 | |
| Embedding mold | Electron Microscopy Science | 70181 | |
| FBS (heat inactivated) | Gemini | 100106 | |
| 24 well plates | Corning | 3524 | |
| Formalin (10%) | Sigma Diagnostics | SDHT501128 | |
| 16% Formaldehyde solution | Thermo Scientific | 28908 | |
| Embedding microsettes | Simport | M503-2 | |
| Ethanol (70%) | Fisher Scientific | A405P-4 | |
| Waterbath | Fisher Scientific | 15-462-2SQ | |
| Microwave | General Electric | ModelJES2051DNBB | |
| Adhesive (Ethyl Cyanoacrylate) | Sigma-Aldrich | E1505-5G | |
| 10mm dishes | BD Falcon | 353003 | |
| 15ml tubes | BD Falcon | 352096 |
Referências
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