O uso do Puzzle Box como uma forma de avaliar a eficácia de Enriquecimento Ambiental

Resumo

O enriquecimento ambiental fornece um potencial efeito protetor contra distúrbios neurodegenerativos. Atualmente, no entanto, não há uma maneira fácil de determinar a eficácia dos procedimentos de enriquecimento. Este protocolo descreve um método simples de "Puzzle Box" para avaliar a função cognitiva de um animal, a fim de revelar a eficácia do enriquecimento ambiental.

Resumo

O enriquecimento ambiental pode influenciar drasticamente o desenvolvimento e a função dos circuitos neurais. Além disso, o enriquecimento demonstrou retardar com sucesso o início dos sintomas em modelos da doença de Huntington ^1-4, sugerindo que fatores ambientais podem evocar um efeito neuroprotetor contra o dano progressivo em nível celular observado em distúrbios neurodegenerativos. As maneiras pelas quais um animal pode ser enriquecido ambientalmente, no entanto, podem variar consideravelmente. Além disso, não há uma maneira direta de avaliar os efeitos do enriquecimento ambiental: a maioria dos métodos requer paradigmas comportamentais bastante complicados e / ou análises anatômicas / fisiológicas post-mortem. Este protocolo descreve o uso de um ensaio comportamental simples e barato, o Puzzle Box ^5-7, como um meio robusto de determinar a eficácia do aumento da estimulação social, sensorial e motora em camundongos em comparação com coortes criadas em condições laboratoriais padrão. Essa tarefa simples de resolução de problemas aproveita o desejo inato de um roedor de evitar recintos abertos procurando abrigo. A capacidade cognitiva é avaliada adicionando impedimentos cada vez mais complexos à entrada do abrigo. O tempo que um determinado sujeito leva para remover com sucesso as obstruções e entrar no abrigo serve como a principal métrica para o desempenho da tarefa. Este método pode fornecer um meio confiável de avaliar rapidamente a eficácia de diferentes protocolos de enriquecimento na função cognitiva, abrindo caminho para determinar sistematicamente o papel que fatores ambientais específicos desempenham no retardo do aparecimento de doenças do neurodesenvolvimento e neurodegenerativas.

Introdução

O enriquecimento ambiental (EE) pode ser definida como um ambiente que fornecem animais com maior oportunidade para a interação social, a atividade motora e maior estimulação sensorial do que geralmente experimentado em um environment.EE padrão de laboratório foi mostrado para afetar de forma consistente o comportamento dos animais, provocando mudanças, como a redução de estresse e atividade relacionada com ansiedade ^10/08, o desempenho melhorou em tarefas de aprendizagem e memória ^8,11, início precoce da coordenação motora e atividade exploratória ^11, mudanças na assistência materno ^8, bem como resistência a substâncias qu....

Protocolo

Declaração de Ética: Todos os procedimentos foram aprovados pelo Comitê de Ética Animal da Universidade de Sydney e conformado com Nacional de Saúde e do Conselho, de orientações Austrália Investigação Médica. Os procedimentos foram realizados em ratinhos C57 / BL6J que foram criadas na Bosch Roedor Facility da Universidade de Sydney. Todos os ratos foram alojados em um único quarto adequadamente ventilado no 21 ° C de temperatura ambiente em um ciclo claro-escuro de 12 horas, com luzes acesas em 0600 hr em gaiolas ventiladas individualmente com acesso ad libitum a comida seca e água. Fêmeas final da gravidez foram aleatoriamente designados para as condições....

Resultados

Os resultados descritos aqui são uma amostra representativa, com os dados obtidos de várias coortes com várias ninhadas. Todos os testes comportamentais foi realizada entre 0700 e 1100 horas, com a ordem de teste randomizado de animais dentro de uma coorte. Animais criados em um ambiente enriquecido (n = 14, 7 do sexo feminino e 7 do sexo masculino) levou muito menos tempo para resolver as tarefas de obstrução dentro da caixa do enigma do que aqueles criados em um ambiente padrão (n = 15, 7 do sexo feminino e 8 do sexo .......

Discussão

Os dados apresentados demonstram que o quebra-Box pode ser utilizado eficazmente para avaliar o impacto de EE. Ratos criados em ambientes enriquecidos consistentemente levou muito menos tempo para resolver enigmas obstrução dentro deste ensaio comportamental do que os animais criados dentro de condições padrão de laboratório. Além disso, esta diferença foi mais proeminente no primeiro julgamento por três das quatro condições testadas, sugerindo EE tem uma maior influência sobre nativa habilidade de resolver problemas de.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
		de acrílico preto	280 x 250 mm com uma "porta" de 40 x 40 mm cortada em um lado
Placa			280 x 250 mm
Placa			280 x 250 mm
Placa			750 x 250 mm
Placa			750 x 250 mm
Placa			Passagem
	3 peças de plexiglass ou acrílico	Nota: Se não for possível acessar a placa de acrílico, plexiglass ou material não poroso semelhante será suficiente.
Webcam	Logitech	C210	Fixe no telhado com fita isolante. Como alternativa, use um tripé.
VirtualDub v1.10.4	VirtualDub	N/A	Software para gravação de vídeos de comportamento. Entrada da webcam.
TopScan v 3.0	CleverSys Inc.	N/A	Software para rastreamento automatizado de visão superior e análise do comportamento do mouse. Os vídeos capturados são analisados post-hoc.

Placa de acrílico branco de acrílico branco de acrílico branco de acrílico branco de acrílico branco inferior de placa de acrílico branco de 150 x 280 mm de 40 x 120 mm