O objetivo geral deste procedimento é ressecar com sucesso uma porção de osso da costela de um camundongo. O procedimento foi desenvolvido como um modelo para estudar o reparo de ossos longos em larga escala.
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Artigo de método
Um procedimento cirúrgico para ressecção do mouse Rib: Um Modelo de Grande Escala Repair longo osso
* These authors contributed equally
Neste artigo
Resumo
Resumo
Este protocolo introduz investigadores para um novo modelo de grande escala reparação óssea utilizando a costela mouse. O procedimento detalha o seguinte: preparação do animal para a cirurgia, a abertura da parede torácica corpo, expondo a costela desejado a partir dos músculos intercostais circundantes, extirpando a seção desejada da costela sem induzir um pneumotórax, e fechar as incisões. Em comparação com os ossos do esqueleto apendicular, as nervuras são altamente acessível. Além disso, não fixador interno ou externo é necessário uma vez que as nervuras adjacentes proporcionam uma fixação natural. A cirurgia utiliza comercialmente fornecimentos disponíveis, é fácil de aprender, e bem tolerado pelo animal. O procedimento pode ser realizado com ou sem a remoção do periósteo circundante, e, por conseguinte, a contribuição do periósteo ao reparo pode ser avaliada. Os resultados indicam que, se o periósteo é retida, reparação robusta ocorre em 1-2 meses. Esperamos que o uso deste protocoloestimular a pesquisa em reparação de costela e que os resultados irão facilitar o desenvolvimento de novas formas de estimular a reparação óssea em outras localidades ao redor do corpo.
Introdução
Debilitante lesão esquelética, artrose crônica, e os graves problemas associados com a cirurgia reconstrutiva impactar a produtividade econômica, o bem-estar da família e qualidade de vida. Enquanto pequenas pausas e lesões podem curar razoavelmente bem, os seres humanos não são capazes de reparar defeitos grandes e, portanto, deve contar com procedimentos reconstrutivos para restaurar a estrutura e função. Reconstrução pode envolver transplante alogênico ou heterogeneic, osso morcellized, andaimes implantados, ou distração osteogênica. Infelizmente, não só existem fatores de morbidade persistentes associados a esses tratamentos, mas a força original do osso reparado....
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Protocolo
NOTA: Todos os procedimentos estão em conformidade com um protocolo de animais aprovado pelo cuidado e uso Comitê de animal Institucional (IACUC) da Universidade do Sul da Califórnia.
1. Preparação para a cirurgia
- Separe as ferramentas e suprimentos cirúrgicos necessários (esterilizado, itens 1-18 na lista de materiais) e organizar um microscópio de dissecação e uma fibra óptica trans-iluminador em uma capa ou em uma mesa de corrente descendente.
- Coloque um rato sexualmente maduros (20-30 g, 1-3 meses de idade) em uma câmara de indução com 4% de isoflurano para induzir a anestesia.
- Confirme ....
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Resultados
Animais tipicamente recuperar rapidamente a partir deste procedimento, a incisão cura bem, e os animais exibem comportamento normal. O procedimento utiliza fontes comercialmente disponíveis e após a prática, pode ser concluído em menos de 1 hora. Antes de usar este procedimento para gerar os dados experimentais, é importante analisar a ressecção no dia 0 ponto de tempo para determinar se os fragmentos de ossos grandes pode permanecer na zona de ressecção. Uma forma de avaliar o procedimento adequado é avaliar os animais.......
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Discussão
Quando aprendendo este protocolo, determinando onde localizar a incisão inicial pode ser um desafio. No entanto, a prática em ratos sacrificados ajuda o cirurgião saber onde colocar a incisão inicial e expor a costela desejado a ser ressecado. Trabalhando em cadáveres também melhora as habilidades motoras fine-necessárias para remover a porção de costela com ou sem o periósteo. Além disso, alguém novo para este procedimento pode encontrar manipular as ferramentas finas e suturas finas para ser difícil. Enquanto amarraçã.......
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Divulgações
Os autores não têm nada a revelar
Agradecimentos
Agradecemos aos membros do laboratório Mariani pela leitura crítica do manuscrito. Nossas fontes de financiamento foram: a Baxter Medical Scholar Research Fellowship (para MKS), bolsas de graduação da USC e o Reitor, Dean Joan M. Schaeffer e Rose Hills Fellowships, (para MKS). Também reconhecemos uma bolsa CIRM BRIDGES através do Pasadena City College (para TTT). e o Fundo de Pesquisa e Inovação James H. Zumberge, a Iniciativa de Medicina Regenerativa da USC e o NIAMS NIH sob o Prêmio Número R21AR064462 (para FVM).
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Tesoura de micro-dissecação de tamanho médio (Vannas-Tü bingen Spring Scissors 5 mm) | Fine Science Tools | 15003-08 | |
| Tesoura de micro-dissecação fina (Vannas Spring Scissors - 2mm Cutting Edge) | Fine Science Tools | 15000-04 | ponta curva é benéfica |
| Micro-bisturi 5,0 mm | Fine Science Tools | 10315-12 | outros bisturis finos podem ser substituídos |
| Dumont 55 fórceps | Fine Science Tools | 11295-51 | |
| Retrator | Fine Science Tools | 17004-05 | é conveniente |
| Suportes de micro-agulha | Fine Science Tools | 12060-01 | |
| 9.0 suturas de nylon (Ethilon), ponto de conicidade melhor | Ethicon | 2819G ou | ponto de conicidade semelhante melhor, mas o corte reverso também é bom |
| 7.0 suturas de prolene (Prolene) | Ethicon | 8700H ou similar | 6-0 também pode ser usado, a ponta da agulha pode variar |
| Fórceps grandes (Adson Forceps) | Fine Science Tools | 11006-12 | outras marcas são finas |
| Lubrificante Pomada para os Olhos (Akwa Tears) | Akorn | 17478-062-35 | |
| Cola de sutura (GLUture Adesivo de tecido tópico) | Abbot | 32046-01 | tem excelente tempo |
| de trabalho Barbeador | Wahl | 9918-6171 ou similar | |
| Lâmpada de grampo | Zoo Med | LF-5 | |
| Lâmpada Infravermelha, 75W | Zoo Med | RS-75 | |
| RC2 Sistema de Anestesia para Roedores | VetEquip | 922100 | |
| IsoFlo (Isoflurano) | Abbot | 05260-05 | |
| Buprenorfina (Buprenex) | Reckitt Benckiser | 12496-0757-1 | |
| Betadine | Purdue Frederick | 67618015017 | |
| Gelatina Aromatizada, gelatina de framboesa | B000E1FYL0 | firme, até a consistência de 'jigglers' |
Referências
- Philip, S. J., Kumar, R. J., Menon, K. V. Morphological study of rib regeneration following costectomy in adolescent idiopathic scoliosis. Eur Spine J. 14 (8), 772-776 (2005).
- Munro, I. R., Guyuron, B. Split-rib cranioplasty. Ann Plast Surg. 7 (5), 341-346 (1981). ....
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Reimpressões e permissões
