É necessária uma assinatura do JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou inicie seu teste gratuito.

Artigo de método

O cateterismo cardíaco em camundongos para medir o volume Pressão do relacionamento: Investigando o efeito Bowditch

18K visualizações

⸱

DOI:

10.3791/52618

⸱

14 de junho de 2015

 ,  , 

Neste artigo

Resumo

Este artigo descreve a medição da função ventricular esquerda murina por meio da análise de pressão/volume em diferentes frequências cardíacas.

Resumo

Os modelos animais que imitam desordens cardíacas humanas foram criadas para testar potenciais estratégias terapêuticas. Um componente-chave para avaliar estas estratégias é examinar os seus efeitos sobre a função cardíaca. Existem várias técnicas para medir em mecânica vivo cardíacos (por exemplo, ecocardiografia, relações pressão / volume, etc.). Em comparação com a ecocardiografia, ventricular em tempo real à esquerda (LV) Pressão / análise de volume através de cateterismo é mais precisa e perspicaz na avaliação da função do VE. Além disso, a análise do VE pressão / volume fornece a capacidade de gravar instantaneamente alterações durante as manipulações de contractilidade (por exemplo, estimulação β-adrenérgico) e insultos patológicos (por exemplo, isquemia / reperfusão). Para além da máxima (+ dP / dt) e mínimo (-dP / dt) taxa de variação de pressão no VE, uma avaliação precisa da função ventricular esquerda através de vários índices independentes de carga (por exemplo, a pressão sistólica finalrelação volume e pré-carga de trabalho do curso recrutável) pode ser alcançado. A frequência cardíaca tem um efeito significativo na contractilidade do VE de tal modo que um aumento no ritmo cardíaco é o principal mecanismo para aumentar o débito cardíaco (isto é, efeito Bowditch). Assim, quando se comparam hemodinâmica entre os grupos experimentais, é necessário dispor de frequências cardíacas semelhantes. Além disso, uma característica de muitos modelos de cardiomiopatia é uma diminuição da reserva contrátil (isto é, uma diminuição do efeito Bowditch). Consequentemente, a informação vital pode ser obtida através da determinação dos efeitos de aumento da frequência cardíaca na contractilidade. Os nossos dados e outros tem demonstrado que o óxido nítrico sintase neuronal (NOS1) rato de abate diminuiu contractilidade. Aqui nós descrevemos o procedimento de medição de pressão LV / volume com o aumento da freqüência cardíaca, utilizando o modelo knockout rato NOS1.

Introdução

A finalidade do coração de bombear o sangue é todo o corpo para satisfazer as necessidades metabólicas do organismo. Uma vez que estas exigências são constantemente flutuante (por exemplo, durante o exercício), o coração tem de se adaptar (ou seja, aumentar o débito cardíaco). O coração criou numerosas vias para realizar esta façanha. A maneira privilegiada no coração consegue isso é através de um aumento da freqüência cardíaca (isto é, efeito Bowditch) 1. Isto é, como um aumento da frequência cardíaca, isso resulta em um aumento da contractilidade e um aumento do débito cardíaco. Assim, a função do coração é extremamente depende....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Protocolo

NOTA: Este protocolo animal foi aprovado pelo Comitê de Cuidado e Uso do animal Institucional (IACUC) no The Ohio State University. Este procedimento pode ser usado em qualquer rato em que o diâmetro interno da artéria carótida é grande o suficiente para inserir o cateter. Use ratos que estão acima de 16 g (com mais de ~ 2 meses).

1. Preparação do rato por cateterismo

  1. Vede todas instrumentos cirúrgicos e materiais em uma bolsa de esterilização. Esterilizar a bolsa em uma máquina autoclave. Manter um campo estéril durante todo o procedimento e usar luvas estéreis.
  2. Anestesiar ratos com cetamina (55 mg / kg), além de xil....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Resultados

A inserção correcta do cateter no interior do ventrículo esquerdo é um passo importante para atingir os valores de pressão e de volume apropriados. Mostrado na Figura 1, usando LabChart Pro 7, representa a mudança da forma de onda de pressão (forma e valores) como o cateter da artéria vai para o ventrículo.

Após a inserção correcta do cateter no ventrículo esquerdo, a pressão (P) e o volume (V) Os valores obtidos, em seguida, ser utilizada para gerar os loops PV (mostrado na.......

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Discussão

Um passo crítico para esta técnica para obter uma medida confiável da contratilidade é a colocação do cateter adequado para a LV. Se o cateter não é colocado corretamente, quando o LV contrai as paredes podem entrar em contato com o cateter, resultando em valores muito elevados, e não fisiológico, causando pressão laços PV de forma irregular. Se necessário, o cateter pode ser girada para realizar o posicionamento correcto. Outro passo chave para esta técnica é certificar-se o mouse receberam anestesia adequada. Se o mou.......

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Divulgações

Não há interesses financeiros concorrentes.

Agradecimentos

Este estudo foi apoiado por bolsas do NIH HL091986 (JPD) e HL094692 (MTZ).

....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Xlyzine 100  mg/mlAna Sed4821
Katamin 50  mg/mlKetalar310006
HeparinaAPP Pharmaceuticals6003922
4-0 fio de sedaEspecialidades cirúrgicasSP102
6-0 fio de sedaEspecialidades cirúrgicasMBKF270
FórcepsFerramentas de Ciências Finas11251-10
Pinça de CurvaFerramentas de Ciências Finas11274-20
TesourasFine Science Tools14090-09
Braçadeira vascularFine Science Tools18555-03
MicroscópioInstrumentos de precisão mundialPZM-3
Cateter de pressãoInstrumentos MillarSPR-839
Sistema de pressão e volumeInstrumentos MillarMPVS-300
PowerLab4/35Instrumentos ADN12128
LabchartPro 7instrumentos
Controlador de temperaturaCWETC-1000
EstimuladorGramaSD-5
Luva estérilMicro-Touch1305018821
Loção removedora de pêlosNair
Betadine esfoliação cirúrgicaVeterinárioNDC 6761815401
ÁlcoolDecon Laboratories2801
Bovie cauteryBovieAA29
1  ml Seringa (26  Agulha G)BD8017299
AD

Referências

  1. Janssen, P. M. Myocardial contraction-relaxation coupling. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 299, H1741-H1749 (2010).
  2. Roman, M. J., Devereux, R. B. Comparison of noninvasive measures of contractility in dilated cardiomyopathy. Echocardiography. 8....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Reimpressões e permissões

Explorar mais artigos

Análise de Pressão-VolumeVentrículo EsquerdoCamundongo Knockout para NOS1Estimulação da Frequência CardíacaMedição de Alças PVColeta de Sangue HeparinizadoOclusão da Veia CavaAvaliação da Contratilidade