JoVE Journal > Medicine
Summary
Abstract
Introduction
Protocol
Resultados
Discussion
Declarações
Acknowledgements
Materials
Referências
Tadução automática
Medicina

Kvantifisering av neurovascular Protection Etter Repetitive hypoksisk prekondisjonering og Transient Middle Cerebral arterieokklusjon i Mus

Published: May 04, 2015
doi:
10.3791/52675
, , , , , ,
1Department of Neurology and Neurotherapeutics,University of Texas Southwestern Medical Center, 2Department of Neurological Surgery,Washington University School of Medicine

Summary

This protocol describes repetitive hypoxic preconditioning, or brief exposures to systemic hypoxia that reduce infarct volumes and blood-brain barrier disruption following transient middle cerebral artery occlusion in mice. It also details dual quantification of infarct volume and blood-brain barrier disruption after stroke to assess the efficacy of neurovascular protection.

Abstract

Eksperimentelle dyremodeller av hjerneslag er uvurderlig verktøy for å forstå hjerneslag patologi og utvikle mer effektive behandlingsstrategier. En to ukers protokoll for repeterende hypoksisk prekondisjonering (RHP) induserer langsiktig beskyttelse mot sentralnervesystemet (CNS) skade i en musemodell for focal hjerneinfarkt. RHP består av 9 stokastiske eksponeringer til hypoksi som varierer både i varighet (2 eller 4 timer) og intensitet (8% og 11% O 2). RHP reduserer infarktvolum, blod-hjerne-barrieren (BBB) ​​forstyrrelsen og etter slag inflammatorisk respons i flere uker etter den siste eksponering for hypoksi, noe som tyder på en langsiktig induksjon av et endogent CNS-beskyttende fenotype. Metodikken for dual kvantifisering av infarktvolum og BBB avbrudd er effektiv i å vurdere neurovascular beskyttelse i mus med RHP eller andre antatte neuroprotectants. Voksne mannlige sveitsiske Webster mus ble preconditioned av RHP eller varighets-ekvivalent eksponeringer til 21% O <sub> 2 (dvs. romluft). En 60 min transient tilstopping av midtre cerebralarterie (tMCAo) ble fremkalt to uker etter den siste eksponering hypoksiske. Både okklusjon og reperfusjon ble bekreftet ved transcranial laser Doppler strømningsmåling. Tjueto timer etter reperfusjon, Evans Blå (EB) ble administrert intravenøst ​​gjennom en halevenen injeksjon. 2 timer senere, ble dyrene avlivet av isofluran overdose og hjerne seksjonene ble farget med 2,3,5- trifenyltetrazoliumklorid (TTC). Infarkter volumer ble deretter kvantifisert. Deretter EB ble ekstrahert fra vevet i løpet av 48 timer for å bestemme BBB etter avbrudd tMCAo. Oppsummert er RHP en enkel protokoll som kan replikeres, med minimale kostnader, for å indusere langsiktig endogen neurovascular beskyttelse mot slag skader hos mus, med translasjonsforskning potensial for andre CNS-baserte og systemiske proinflammatoriske sykdomstilstander.

Introduction

Som den ledende årsaken til uførhet og den fjerde største dødsårsaken, er hjerneslag en av de mest ødeleggende sykdomstilstander som vender den voksne befolkningen i USA. En dyremodeller av hjerneslag tillate for eksperimentell undersøkelse av nye metoder for å redusere iskemisk skade og forbedring av post-takts utvinning. En roman avenue for eksempel translasjonell forskning prekondisjonering. Prekondisjonering er tilsiktet bruk av en ikke-skadelig stimulus for å redusere skader ved en etterfølgende, og mer alvorlige personskader. 2 hypoksiske prekondisjonering har vist seg å produsere pleiotrope forandringer i hjernen som gir beskyttelse mot slag både i de vivo og in vitro studier . 3 Men en enkelt eksponering for hypoksi bare tilbyr kortsiktig neuroprotection, indusere mindre enn 72 timer av toleranse mot iskemi hos voksne mus. 4 Selv etter fire uker med 14 timers daglig eksponering til hypobar hypoksi, Lin et al. found at nevro ble bare opprettholdes i en uke. 5 Repetitive hypoksisk prekondisjonering (RHP) er preget av stokastiske variasjoner i hyppighet, varighet og intensitet av hypoksiske eksponeringer. I motsetning til en enkelt preconditioning utfordring, induserer RHP en cerebroprotective fenotype som varer opp til åtte uker i mus. 6 RHP redusert infarktvolum, blod-hjerne-barrieren (BBB) ​​avbrudd, vaskulær betennelse, og leukocytt-diapedese i flere uker etter den siste eksponering hypoksisk . RHP spesielt redusert inflammasjon i iskemisk hjerneskade ved å redusere T-celle, monocytter og makro populasjoner, samtidig som B-cellepopulasjoner i den ischemiske hjernehalvdelen. 7 faktisk RHP indusert et immunsuppressivt fenotype hos mus før enhver CNS-skade, inklusive slag. RHP-behandlede B-celler isolert fra RHP-behandlede friske mus utviste en unik anti-inflammatorisk fenotype, med en nedregulering av både antigen-presentasjon og antistoffproduksjon. Densamlet reduksjon i proinflammatoriske adaptive immunmekanismer gjør RHP en utmerket metode for å indusere endogen immunsuppresjon for ikke bare CNS-spesifikke inflammatoriske sykdommer, men også systemiske skade eller sykdom modeller som er pro-inflammatorisk patologi.

RHP reduserer både infarktvolum og BBB avbrudd etter en forbigående midten cerebral arterie okklusjon (tMCAo). Dyremodeller av hjerneslag, som vanligvis brukes tMCAo, dramatisk forbedre forståelsen av patofysiologien ved hjerneslag, samt utforming av mer effektive neurotherapeutics. Først utviklet av Koizumi et al., I 1986, er 8 den tMCAo prosedyren en mye brukt metode for å indusere slag hos gnagere og en av de foretrukne fremgangsmåter for å undersøke inflammasjon etter reperfusjon. Som metoder for tMCAo utvikle seg, jo mer nylig bruk av silikon-belagte filamenter ytterligere å redusere risikoen for subaraknoid blødning, sammenlignet med andre modeller 9,10 </ Sup> og bedre pålitelighet, men dessverre tMCAo gir ofte store variasjoner i infarktvolum. 11-13 De fleste av disse studiene avgrense infarkt regioner i koronale hjernen seksjoner ved farging med 2,3,5- trifenyltetrazoliumklorid (TTC), regnes som en gullstandarden for infarkt kvantifisering fordi det er en enkel og rimelig måte å produsere levende, kopier resultater. TTC tjener som et substrat av dehydrogenaser til stede i mitokondriene. Når hjerneskiver blir utsatt for den TTC oppløsningen blir TTC selektivt tas inn i levende celler, hvor dets ikke-oppløselige reduksjonsprodukt, formazan, utfelles til en dyp rød farge i levedyktige mitokondriene. På grunn av mitokondriell dysfunksjon i iskemisk vev, forblir dette vevet hvit, noe som åpner for differensiering av skadet og friskt vev. 14

RHP reduserer også BBB avbrudd i den ischemiske hjernehalvdelen. 6 Derfor, den doble kvantifisering av BBB integritet i samme bRegnet som TTC-basert infarktvolum bestemmelser 15 vil gi nyttig informasjon om den fulle effekten av endogen beskyttelse, og potensielle årsaksforhold mellom BBB avbrudd og infarkt i ubehandlede og behandlede dyr. Tilstrømningen av perifert blod gjennom en forstyrret BBB, sekundært til hjerneslag, øker leukocyttpopulasjoner, proinflammatoriske cytokiner, oksidativt stress, vasogenic ødem og hemoragisk transformasjon i iskemisk halvkule, slutt å øke satsene for infeksjon og dødelighet hos pasienter med iskemisk hjerneslag . 16,17 En vanlig metode for å måle BBB avbrudd i dyremodeller er gjennom kvantifisering av Evans blue (EB) fargestoff lekkasje inn i hjernen. 15,18-21 EB bindes selektivt til serumalbumin, et globulært protein (molekylvekt = 65 kDa) som ikke krysser BBB i uskadde dyr. 22 Etter iskemisk hjerneslag, infiltrerer EB hjernen, og fluoresces ved 620 nm, noe som åpner for måling av optisk tetthet within perfusert skadde parenchyma. 22 Den optiske tetthet er direkte proporsjonal med permeabiliteten av BBB når EB har blitt vasket ut av post-mortem cortical blodkar ved transcardiac perfusjon. Med umiddelbar behandling av TTC-farget hjernen hos dyr med EB administrasjon, kan både infarktvolum og BBB avbrudd effektivt kvantifiseres. Det bør imidlertid bemerkes, at neuronskade og BBB avbrudd ikke er samtidige prosesser i post-slag hjerne, 23,24 slik at utvalget av avlivningstiden er en viktig faktor.

Protokollen som følger beskriver RHP metoden, tMCAo metode for å indusere en midlertidig arteriell okklusjon som modeller midtre cerebralarterie okklusjoner i menneskelige pasienter, og de to histologiske metoder for å bestemme nevrale og vaskulære slag skader endepunkter. TTC måler celledød og kumulativ skade på vev, slik at for kvantifisering av en samlet infarkt volUme, mens EB gir for hemisfæriske kvantifisering av BBB skade.

Protocol

MERK: Denne protokollen ble godkjent av Institutional Animal Care og bruk Committee (IACUC) ved UT Southwestern Medical Center som retter seg etter National Institutes for Health (NIH) policy for eksperimentell bruk dyr. 1. Repetitive hypoksisk preconditioning Tilpasset design fire mengdemålere på bensin regulatorer og feste til standard 15 L induksjons kamre med PVC-rør for å tillate komprimert gass fra oksygen (O 2) tanker å strømme inn kamrene via en inngangspo…

Representative Results

Denne studien inkluderte 25 mannlige sveitsiske Webster mus som var 10 uker gamle ved starten av randomisering til RHP (n = 10) eller 21% O 2 (n = 15) grupper. To uker etter den siste RHP eksponering ble kirurgiske prosedyrer utført, med grupper blindet og motvekts mellom dager. Etter tMCAo, døde en mus ved postoperativ utvinning og en mus ble ekskludert fra studien fordi den ikke oppfyller reperfusjon CBF kriteriet. Mus begge utelukket var fra 21% O 2-gruppen. I samsvar med ANKOMME retningslinje…

Discussion

En enkelt eksponering for systemisk hypoksi (dvs. 2 timer på 11% O 2) i mus "forbigående" beskytter hjernen mot tMCAo, 29 betyr at epigenetisk respons på hypoksisk prekondisjonering utfordringen er kortvarige, og baseline fenotype er gjenopprettet innen dager. Gjentatte presentasjoner av hypoksisk prekondisjonering stimulus dramatisk forlenge varigheten av neurobeskyttende fenotype. 6 Mange studier har vist at hyppigheten, størrelsen og varigheten av den repeterend…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Special thanks to the Gidday lab for their work in developing the RHP protocol, as well as the Neuro-Models Facility (UTSW) for their assistance in the tMCAo surgeries. This work was supported by grants from the American Heart Association (AMS), The Haggerty Center for Brain Injury and Repair (UTSW; AMS), and The Spastic Paralysis Research Foundation of the Illinois-Eastern Iowa District of Kiwanis International (JMG).

Materials

Material/ Equipment Company Catalog Number Comments/Description
Flowmeters, regulators VetEquip, Inc Specialty order Four flowmeters are attached to 6.0 mm flexible PVC tubing which connects to the inlet port on each induction chamber with a plastic female connector. These flowmeters are bolted to a 6.5" x 1" x 1" metal bar. This metal bar is bolted to a MI-246-P pressure gauge with a DISS outlet. This pressure gauge and flowmeter equipment can be attached to each new gas cylinder with a wrench.
21% O2 tank AirGas OX USP200
11% O2 tank AirGas Specialty order
8% O2 tank  AirGas Specialty order
15L induction chambers VetEquip 941454
Moor Laber Dopper Flow  Moor Instruments  moorVMS-LDF1-HP 0.8mm diameter probe 
High Intensity Illuminator  Nikon NI-150
Zoom Stereo Microscope  NIkon SMZ800 Other surgical microscopes may be used. 
Kent Scientific Right Temperature CODA Kent Scientific Corporation Discontinued Recommended replacement is PhysioSuite with RightTemp Temperature Monitoring and Homeothermic Control (Kent Scientific, #PS-RT).
Hovabator Incubator Stromberg's 2362-E Our model is the 2362N. 2362E is a later model and includes an electronic thermostat. 
V010 Anesthesia system  VetEquip 901807 Includes: ten foot high-pressure oxygen hose, frame, flowmeter, oxygen flush assembly, vaporizer, breathing circuit, chamber, nosecones, waste gas evacuation tubing and two VapoGuard filters
250 mL isoflurane  Butler Schein NDC-11695
D-6 Vet Trim Animal Cordless Trimmer  Andis  #23905 Replacement blades are available from Andis (#23995)
Betadine  Fisher Scientific 19-898-867 
Q-tips Multiple sellers  Catalog number not available 
Gauze Pads Fisher Scientific 67622
Surgical drape Fisher Scientific GM300 
Silk Sutures  Look/Div Surgical Specialties SP115
Nylon Sutures Look/Div Surgical Specialties SP185
Durmont #5 forceps (2)  Fine Science Tools  11251-35 Angled 45°
Surgical Scissors Fine Science Tools  14028-10
3mm Vannas Kent Scientific Corporation INS600177 Straight blade
Hartman Hemostats  Fine Scientific Tools 13002-10
Occluding filaments Washington University Specialty order Filaments are silicone coated at Washington Univeristy and provided to UTSW facilities for a fee. 
Evans Blue Sigma Aldritch E2129-10G
Filter Paper  Sigma Aldritch WHA1001150 150 mm, circles, Grade 1 
Weigh Boats Fisher Scientific 02-202-101 2.5" diameter
0.9% Sodium Chloride Injection USP  Baxter Pharmaceutics  2B1321
0.3cc insulin syringe with 29 g needle Becton Dickinson Labware 309301
Flat bottom restrainer  Braintree Scientific  FB M 2.0" diameter
TTC Sigma T8877
10X PBS, pH 7.4 Fisher Scientific BP399-20
Water Bath Multiple sellers  Catalog number not available  Scintillation tubes with TTC may be manually held under running warm water as an alternative to the water bath.
Styrofoam board Multiple sellers  Catalog number not available 
Large Syringe Kit PumpSystems Inc P-SYRKIT-LG
Perfusion Pump PumpSystems Inc NE-300 
60 cc syringe Fisher Scientific NC9203256
27g winged infusion set Kawasumi Laboratories, Inc D3K1-25G 1
20 ml scintillation vial Fisher Scientific 50-367-126
Stainless steel spatula Fisher Scientific 14-373-25A
Alto acrylic 1.0 mm mouse brain, coronal CellPoint Scientific  Catalog number not available 
0.21 mm stainless steel blades, 25 pk CellPoint Scientific  Catalog number not available  Reusable cryostat blades are an inexpensive alternative.
4% paraformaldehyde Santa Cruz Biotechnology  SC-281692
Superfrost microscope slides  Fisher Scientific 12-550-15
HP Scanjet G4050 Multiple sellers  Catalog number not available  Other commercial scanners are suitable for this step in the protocol.
ImageJ  National Institute of Health Catalog number not available 
Analytical Balance Mettler Toledo  XSE 205U
Precision Compact Oven   Thermo Scientific  PR305225M
1.7 mL microcentrifuge tubes (Eppendorfs) Denville Scientific  C2170
Formamide Fisher Scientific BP228-100
96-well plates Fisher Scientific 07-200-9
Epoch Microplate Spectrophotometer  BioTek  Catalog number not available 
DOWNLOAD MATERIALS LIST

Referências

  1. Go, A. S., et al. Heart disease and stroke statistics–2014 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 129 (3), e28-e292 (2014).
  2. Gidday, J. M. Cerebral preconditioning and ischaemic tolerance. Nat Rev Neurosci. 7 (6), 437-448 (2006).
  3. Stetler, R. A., et al. Preconditioning provides neuroprotection in models of CNS disease: paradigms and clinical significance. Prog Neurobiol. 114, 58-83 (2014).
  4. Bernaudin, M., et al. Normobaric hypoxia induces tolerance to focal permanent cerebral ischemia in association with an increased expression of hypoxia-inducible factor-1 and its target genes, erythropoietin and VEGF, in the adult mouse brain. J Cereb Blood Flow Metab. 22 (4), 393-403 (2002).
  5. Lin, A. M., Dung, S. W., Chen, C. F., Chen, W. H., Ho, L. T. Hypoxic preconditioning prevents cortical infarction by transient focal ischemia-reperfusion. Ann N Y Acad Sci. 993, 168-178 (2003).
  6. Stowe, A. M., Altay, T., Freie, A. B., Gidday, J. M. Repetitive hypoxia extends endogenous neurovascular protection for stroke. Ann Neurol. 69 (6), 975-985 (2011).
  7. Monson, N. L., et al. Repetitive hypoxic preconditioning induces an immunosuppressed B cell phenotype during endogenous protection from stroke. J Neuroinflammation. 11, 22 (2014).
  8. Koizumi, J. Y. Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. Experimental studies of ischemic brain edema, I: a new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area. Jpn J Stroke. 8, 1-8 (1986).
  9. Liu, F., McCullough, L. D. The middle cerebral artery occlusion model of transient focal cerebral ischemia. Methods Mol Biol. 1135, 81-93 (2014).
  10. Rousselet, E., Kriz, J., Seidah, N. G. Mouse model of intraluminal MCAO: cerebral infarct evaluation by cresyl violet staining. J Vis Exp. (69), (2012).
  11. Lin, X., et al. Surgery-related thrombosis critically affects the brain infarct volume in mice following transient middle cerebral artery occlusion. PLoS One. 8 (9), e75561 (2013).
  12. Yuan, F., et al. Optimizing suture middle cerebral artery occlusion model in C57BL/6 mice circumvents posterior communicating artery dysplasia. J Neurotrauma. 29 (7), 1499-1505 (2012).
  13. Kuraoka, M., et al. Direct experimental occlusion of the distal middle cerebral artery induces high reproducibility of brain ischemia in mice. Exp Anim. 58 (1), 19-29 (2009).
  14. Feng Zhang, J. C., Chen, X. X. J., Xu, Z. C., JZ, W. a. n. g. Animal Models of Acute Neurolgoical Injuries II. Springer Protocol Handbooks. , 93-98 (2012).
  15. Ludewig, P., et al. Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 1 inhibits MMP-9-mediated blood-brain-barrier breakdown in a mouse model for ischemic stroke. Circ Res. 113 (8), 1013-1022 (2013).
  16. Sandoval, K. E., Witt, K. A. Blood-brain barrier tight junction permeability and ischemic stroke. Neurobiol Dis. 32 (2), 200-219 (2008).
  17. Ballabh, P., Braun, A., Nedergaard, M. The blood-brain barrier: an overview: structure, regulation, and clinical implications. Neurobiol Dis. 16 (1), 1-13 (2004).
  18. Benedek, A., et al. Use of TTC staining for the evaluation of tissue injury in the early phases of reperfusion after focal cerebral ischemia in rats. Brain Res. 1116 (1), 159-165 (2006).
  19. Yasmina Martin, C. A., Maria Jose Piedras, A. K. Evaluation of Evans Blue extravasation as a measure of peripheral inflammation. Protocol Exchange. , (2010).
  20. Belayev, L., Busto, R., Zhao, W., Ginsberg, M. D. Quantitative evaluation of blood-brain barrier permeability following middle cerebral artery occlusion in rats. Brain Res. 739 (1-2), 88-96 (1996).
  21. Martin, J. A., Maris, A. S., Ehtesham, M., Singer, R. J. Rat model of blood-brain barrier disruption to allow targeted neurovascular therapeutics. J Vis Exp. (69), e50019 (2012).
  22. Kaya, M., Ahishali, B. Assessment of permeability in barrier type of endothelium in brain using tracers: Evans blue, sodium fluorescein, and horseradish peroxidase. Methods Mol Biol. 763, 369-382 (2011).
  23. Chen, Z. L., et al. Neuronal death and blood-brain barrier breakdown after excitotoxic injury are independent processes. J Neurosci. 19 (22), 9813-9820 (1999).
  24. Abulrob, A., Brunette, E., Slinn, J., Baumann, E., Stanimirovic, D. In vivo optical imaging of ischemic blood-brain barrier disruption. Methods Mol Biol. 763, 423-439 (2011).
  25. Majid, A., et al. Differences in vulnerability to permanent focal cerebral ischemia among 3 common mouse strains. Stroke. 31 (11), 2707-2714 (2000).
  26. Xu, L., et al. Low dose intravenous minocycline is neuroprotective after middle cerebral artery occlusion-reperfusion in rats. BMC Neurol. 4, 7 (2004).
  27. Goldlust, E. J., Paczynski, R. P., He, Y. Y., Hsu, C. Y., Goldberg, M. P. Automated measurement of infarct size with scanned images of triphenyltetrazolium chloride-stained rat brains. Stroke. 27 (9), 1657-1662 (1996).
  28. Drummond, G. B., Paterson, D. J., McGrath, J. C. ARRIVE: new guidelines for reporting animal research. J Physiol. 588 (Pt 14), 2517 (2010).
  29. Miller, B. A., et al. Cerebral protection by hypoxic preconditioning in a murine model of focal ischemia-reperfusion). Neuroreport. 12 (8), 1663-1669 (2001).
  30. Zhu, Y., Zhang, Y., Ojwang, B. A., Brantley, M. A., Gidday, J. M. Long-term tolerance to retinal ischemia by repetitive hypoxic preconditioning role of HIF-1alpha and heme oxygenase-1. Invest Ophthalmol Vis Sci. 48 (4), 1735-1743 (2007).
  31. Cui, M., et al. Decreased extracellular adenosine levels lead to loss of hypoxia-induced neuroprotection after repeated episodes of exposure to hypoxia. PLoS One. 8 (2), e57065 (2013).
  32. Prass, K., et al. Hypoxia-induced stroke tolerance in the mouse is mediated by erythropoietin. Stroke. 34 (8), 1981-1986 (2003).
  33. Svorc, P., Benacka, R. The effect of hypoxic myocardial preconditioning is highly dependent on the light-dark cycle in Wistar rats. Exp Clin Cardiol. 13 (4), 204-208 (2008).
  34. Chen, S. T., Hsu, C. Y., Hogan, E. L., Maricq, H., Balentine, J. D. A model of focal ischemic stroke in the rat: reproducible extensive cortical infarction. Stroke. 17 (4), 738-743 (1986).
  35. Barone, F. C., Knudsen, D. J., Nelson, A. H., Feuerstein, G. Z., Willette, R. N. Mouse strain differences in susceptibility to cerebral ischemia are related to cerebral vascular anatomy. J Cereb Blood Flow Metab. 13 (4), 683-692 (1993).
  36. Carmichael, S. T. Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose. NeuroRx. 2 (3), 396-409 (2005).
  37. Lesak, M. D., Howieson, D. B., Loring, D. W. . Neuropsychological Assessement. , 195-197 (2004).
  38. Kapinya, K. J., Prass, K., Dirnagl, U. Isoflurane induced prolonged protection against cerebral ischemia in mice: a redox sensitive mechanism. Neuroreport. 13 (11), 1431-1435 (2002).
  39. Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. Modeling stroke in mice – middle cerebral artery occlusion with the filament model. J Vis Exp. (47), (2011).
  40. Liu, F., Schafer, D. P., McCullough, L. D. T. T. C. fluoro-Jade B and NeuN staining confirm evolving phases of infarction induced by middle cerebral artery occlusion. J Neurosci Methods. 179 (1), 1-8 (2009).
  41. Wang, Z., Leng, Y., Tsai, L. K., Leeds, P., Chuang, D. M. Valproic acid attenuates blood-brain barrier disruption in a rat model of transient focal cerebral ischemia: the roles of HDAC and MMP-9 inhibition. J Cereb Blood Flow Metab. 31 (1), 52-57 (2011).
  42. Rosenberg, G. A., Estrada, E. Y., Dencoff, J. E. Matrix metalloproteinases and TIMPs are associated with blood-brain barrier opening after reperfusion in rat brain. Stroke. 29 (10), 2189-2195 (1998).
  43. Goryacheva, A. V., et al. Adaptation to intermittent hypoxia restricts nitric oxide overproduction and prevents beta-amyloid toxicity in rat brain. Nitric Oxide. 23 (4), 289-299 (2010).
  44. Lin, A. M., Chen, C. F., Ho, L. T. Neuroprotective effect of intermittent hypoxia on iron-induced oxidative injury in rat brain. Exp Neurol. 176 (2), 328-335 (2002).
  45. Paul, J., Strickland, S., Melchor, J. P. Fibrin deposition accelerates neurovascular damage and neuroinflammation in mouse models of Alzheimer’s disease. J Exp Med. 204 (8), 1999-2008 (2007).
  46. Deumens, R., Blokland, A., Prickaerts, J. Modeling Parkinson’s disease in rats: an evaluation of 6-OHDA lesions of the nigrostriatal pathway. Exp Neurol. 175 (2), 303-317 (2002).
  47. Lee, H., Pienaar, I. S. Disruption of the blood-brain barrier in Parkinson’s disease: curse or route to a cure. Front Biosci (Landmark Ed. 19, 272-280 (2014).
  48. Jenkins, B. G., et al. Non-invasive neurochemical analysis of focal excitotoxic lesions in models of neurodegenerative illness using spectroscopic imaging). J Cereb Blood Flow Metab. 16 (3), 450-461 (1996).
  49. Chen, X., Lan, X., Roche, I., Liu, R., Geiger, J. D. Caffeine protects against MPTP-induced blood-brain barrier dysfunction in mouse striatum. J Neurochem. 107 (4), 1147-1157 (2008).

Tags

Neurovascular ProtectionRepetitive Hypoxic PreconditioningTransient Middle Cerebral Artery OcclusionInfarct VolumeBlood-brain Barrier DisruptionIschemic StrokeMouse ModelCentral Nervous SystemNeuroprotectionPro-inflammatory Disease

Play Video
PDF
DOI
DOWNLOAD MATERIALS LIST
Citar este artigo
Poinsatte, K., Selvaraj, U. M., Ortega, S. B., Plautz, E. J., Kong, X., Gidday, J. M., Stowe, A. M. Quantification of Neurovascular Protection Following Repetitive Hypoxic Preconditioning and Transient Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice. J. Vis. Exp. (99), e52675, doi:10.3791/52675 (2015).
Baixar citação
Reimpressões e Permissões

View Video

✖

To prove you're not a robot, please enter the text in the image below

CAPTCHA Image
Play CAPTCHA Audio
Refresh Image