Todo el humor vítreo Disección de Análisis Vitreodynamic
Summary
The goal of this protocol is to show an effective technique to isolate whole, intact vitreous core and cortex from post mortem enucleated porcine eyes.
Abstract
The authors propose an effective technique to isolate whole, intact vitreous core and cortex from post mortem enucleated porcine eyes. While previous studies have shown the results of such dissections, the detailed steps have not been described, precluding researchers outside the field from replicating their methods. Other studies harvest vitreous either through aspiration, which does not maintain the vitreous structure anatomy, or through partial dissection, which only isolates the vitreous core. The proposed method isolates the whole vitreous body, with the vitreous core and cortex intact, while maintaining vitreous anatomy and structural integrity. In this method, a full thickness scleral flap in an enucleated porcine eye is first created and through this, the choroid tissue can be separated from the sclera. The scleral flap is then expanded and the choroid is completely separated from the sclera. Finally the choroid-retina tissue is peeled off the vitreous to leave an isolated intact vitreous body. The proposed vitreous dissection technique can be used to study physical properties of the vitreous humor. In particular, this method has significance for experimental studies involving drug delivery, vitreo-retinal oxygen transport, and intraocular convection.
Introduction
El objetivo de este método es al detalle una técnica para aislar todo un cuerpo vítreo, intacta, con el núcleo vítreo y la corteza intacta, a partir de un ojo de cadáver, para los fines de análisis vitreodynamic. A medida que el campo de la fisiología del vítreo ha crecido, investigadores multidisciplinarios, como la mecánica de fluidos investigadores, están investigando las propiedades físicas y biomecánicas del vítreo 1. Para ello, es esencial al detalle una técnica para aislar todo el cuerpo vítreo intacta para ayudar a los investigadores multidisciplinarios.
Sebag et al. 2 y otros 3 elegantes realizaron disecciones vítreas enteros en los ojos de cadáveres humanos y mostraban ilustraciones de los resultados. Sin embargo, la técnica utilizada no se describió en detalle los no expertos y no sería capaz de replicarse independientemente del método. Otros estudios han cosechado vítreo de los ojos de cadáver utilizando métodos más simples como la aspiración o la disección parcial,ambos de los cuales no dan lugar a todo un cuerpo vítreo, intacto. Gisladottis et al. 4 y Xu et al. 5 investigar la permeabilidad en el humor vítreo cosechado de ojos de cadáver. Sin embargo, desde que se describe ningún método de extracción del vítreo, se asumió que aspiran el humor vítreo con una jeringa. Watts et al. 6 fue un paso más allá mediante la descripción de un método de aislamiento de conejo humor vítreo con una técnica quirúrgica. Sin embargo, este método da lugar a un aislamiento de sólo el núcleo vítreo y no la corteza vítreo. Skeie et al. 7 más tarde organizó el vítreo en 4 regiones únicas y elegantes describe un método para diseccionar cada parte para su análisis. Esta técnica sin embargo, no resulta en una vítreo intacta como un todo.
La técnica actual fue desarrollado para facilitar experimentos biofísicos que se realizan en la actualidad sólo a los ojos de cadáver. Los métodos anteriores, como se ha descrito unBove, están limitados porque 1) no aislar por completo a todo el cuerpo vítreo, núcleo vítreo 2) cosechada y la corteza se homogeneizan, 3) estructura anatómica vítreo no se mantiene, o 4) técnicas de disección no se detallan de manera adecuada para la replicación por investigadores de otros campos . Además, debido a la opacidad de la esclerótica y la coroides, la visualización del cuerpo vítreo está limitado en el globo ocular intacta. Esto limita la precisión y la viabilidad de las mediciones que se pueden hacer dentro de todo el ojo. Adicionalmente, los estructuras anatómicas que rodean a la del vítreo puede confundir del estudio de propiedades bioquímicas y físicas del humor vítreo.
En los últimos años, el cuerpo de la ciencia vítreo ha crecido enormemente y no hay razón para creer que todo el cuerpo vítreo tiene diferentes propiedades que sus partes individuales. Existe un creciente interés en la investigación de las propiedades físicas, biomecánicos, y químicas del vítreo para vitreodynamics research, que tiene aplicaciones en la medicina clínica, tales como la administración de fármacos, la oxigenación intravítrea 8 y vitrectomía. Vitreodynamics farmacológicos, que utiliza agentes farmacológicos para manipular el vítreo, se pueden utilizar para mejorar los resultados de vitrectomía 9. Propiedades biomecánicas se utilizan para modelar el flujo de fluido vítreo, que se puede utilizar para mejorar las tecnologías de administración de fármacos intravítrea 10-12. Propiedades físicas de los diversos segmentos del vítreo son cruciales para entender el transporte de oxígeno vítreo-retiniana 13. La técnica de disección vítreo propuesto puede ser utilizado para estudiar diversas propiedades del humor vítreo intacto. Permite sobremesa experimentos por hacer en los cuerpos vítreos enteros, intactos, con mejor visualización.
En resumen, los métodos actuales para el estudio del vítreo o bien no describen adecuadamente, o dan lugar a un aislamiento incompleta el núcleo vítreo y la corteza. Por lo tanto, hay una necesidad de realizar experimentos en un modelo de ojo transparente al tiempo que conserva la anatomía del vítreo que existe en el ojo de cadáver.
Protocol
Representative Results
Discussion
Existen dos pasos críticos que se deben realizar con cuidado durante la disección vítreo. Paso 3, la creación de un colgajo escleral de grosor completo, es crucial para toda la disección. Se debe tener cuidado para no cortar en la coroides cuando se crea el colgajo escleral de grosor completo. El otro paso fundamental está diseccionando de distancia de la esclerótica de la coroides. Este paso debe hacerse con cuidado para evitar la creación de múltiples orificios de la coroides de la que el humor vítreo puede …
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The authors acknowledge the following funding sources, Whittier Foundation, Harrington Foundation, National Institutes of Health and Research to Prevent Blindness.
Materials
| 0.3 forceps | Storz Opthalmics | E1793 | |
| Westcott Tenotomy Scissors Curved Right | Storz Opthalmics | E3320 R | |
| Scalpel Handle No. 3 | VWR | 25607-947 | |
| Scalpel Blade, #11, for #3 Handle | VWR | 470174-844 |
Referências
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