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Artigo de método

Whole humor vítreo Dissecção de Análise Vitreodynamic

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DOI:

10.3791/52759

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24 de maio de 2015

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Neste artigo

Resumo

O objetivo deste protocolo é mostrar uma técnica eficaz para isolar o núcleo vítreo e o córtex vítreos inteiros e intactos de olhos suínos enucleados post mortem.

Resumo

Os autores propõem uma técnica eficaz para isolar o núcleo vítreo inteiro e intacto e o córtex de olhos suínos enucleados post mortem. Embora estudos anteriores tenham mostrado os resultados de tais dissecações, as etapas detalhadas não foram descritas, impedindo que pesquisadores de fora da área repliquem seus métodos. Outros estudos colhem o vítreo por aspiração, que não mantém a anatomia da estrutura vítrea, ou por dissecção parcial, que apenas isola o núcleo vítreo. O método proposto isola todo o corpo vítreo, com o núcleo vítreo e o córtex intactos, mantendo a anatomia vítrea e a integridade estrutural. Neste método, um retalho escleral de espessura total em um olho suíno enucleado é criado primeiro e, por meio dele, o tecido coróide pode ser separado da esclera. O retalho escleral é então expandido e a coroide é completamente separada da esclera. Finalmente, o tecido coróide-retina é retirado do vítreo para deixar um corpo vítreo intacto isolado. A técnica de dissecção vítrea proposta pode ser usada para estudar as propriedades físicas do humor vítreo. Em particular, este método tem importância para estudos experimentais envolvendo administração de medicamentos, transporte de oxigênio vítreo-retiniano e convecção intraocular.

Introdução

O objectivo deste método é a de detalhe uma técnica para isolar todo um corpo vítreo, intacta, com o núcleo vítreo e córtex intacto, a partir de um olho de cadáver, para efeitos de análise vitreodynamic. Como o campo da fisiologia vítreo tem crescido, pesquisadores multidisciplinares, tais como mecânica dos fluidos pesquisadores, estão a investigar as propriedades físicas e biomecânicas do vítreo 1. Para este fim, é essencial detalhe uma técnica para isolar todo o, corpo vítreo intacta para ajudar os investigadores multidisciplinares.

Sebag et al. 2 e 3 outros realizados inteiras elegantes disseca....

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Protocolo

Todos os olhos enucleados foram obtidos a partir de um matadouro e todos os experimentos foram realizados de acordo com as leis de biossegurança institucionais.

  1. Fixe olho enucleado para baixo em uma superfície. Fazer isso colocando os pinos do tecido através do excesso de tecido em torno do olho e prendendo-o para baixo em uma placa de isopor.
  2. Dissecar e retire conjuntiva perilimbal de olho.
    1. Use uma pinça fina (0,3 fórceps) e microtesoura (tesoura Westcott) para inciso conjuntiva no limbo e sem rodeios dissecá-lo fora da esclera. Cortar a conjuntiva ao longo do limbo como a dissecção romba prossegue para permitir posterior dissecação. ....

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Resultados

Seguindo o protocolo irá levar a uma dissecção do vítreo bem sucedida com o núcleo e o córtex (Figura 3) intactos. Isto é evidente a partir dos pedaços residuais de retina aderiram ao córtex vítreo. Todo intacta humor vítreo pode ser usado de várias maneiras para experiências vitreodynamic específicos. No nosso caso, a taxa de difusão do oxigénio no humor vítreo intacto e é constante de tempo correspondente foi estudada (Figura 2). Vítreo que foi dissecado (núcleo e córtex), usando o no.......

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Discussão

Existem dois passos críticos que devem ser cuidadosamente realizados durante a dissecção vítreo. Passo 3, a criação de uma aba escleral de espessura total, é crucial para toda a dissecção. Cuidados devem ser tomados para não cortar na coróide ao criar a espessura total retalho escleral. O outro passo crítico é dissecar afastado da esclera da coróide. Esta etapa deve ser feito com cuidado para evitar a criação de vários buracos na coróide de que o vítreo pode derramar. Existe uma maneira de modificar o protocolo e ainda .......

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Divulgações

Os autores não têm nada a divulgar.

Agradecimentos

Os autores reconhecem as seguintes fontes de financiamento: Whittier Foundation, Harrington Foundation, National Institutes of Health e Research to Prevent Blindness.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
0.3 pinçasStorz OpthalmicsE1793
Westcott Tenotomia Tesoura CurvadaDireita Storz OpthalmicsE3320 R
Cabo de bisturi nº 3VWR25607-947
Lâmina de bisturi, #11, para cabo #3 VWR470174-844

Referências

  1. Siggers, J. H., Ethier, C. R. Fluid Mechanics of the Eye. Annual Review of Fluid Mechanics. 44 (1), 347-372 (2012).
  2. Sebag, J. Age-related changes in human vitreous structure. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 225 (2), 89-93 (1987).
  3. Grignolo, A.

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Reimpressões e permissões

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