Мышиные трансплантации почек Техника
Summary
The goal of this manuscript is to describe the steps required to perform a kidney transplant in a mouse, paying particular attention to the details of the arterial anastomosis.
Abstract
The first mouse kidney transplant technique was published in 19731 by the Russell laboratory. Although it took some years for other labs to become proficient in and utilize this technique, it is now widely used by many laboratories around the world. A significant refinement to the original technique using the donor aorta to form the arterial anastomosis instead of the renal artery was developed and reported in 1993 by Kalina and Mottram 2 with a further advancement coming from the same laboratory in 1999 3. While one can become proficient in this model, a search of the literature reveals that many labs still experience a high proportion of graft loss due to arterial thrombosis. We describe here a technique that was devised in our laboratory that vastly reduces the arterial thrombus reported by others 4,5. This is achieved by forming a heel-and-toe cuff of the donor infra-renal aorta that facilitates a larger anastomosis and straighter blood flow into the kidney.
Introduction
С 1973 года модель трансплантации почек у мышей является ценным инструментом исследования, но технические вопросы препятствуют его широкому использованию. На протяжении многих лет несколько статей были опубликованы подробно улучшения / уточнения к этой процедуре. В качестве модели трансплантации в первую очередь васкуляризированной солидных органов эта процедура, вероятно, уступает только гетеротопической модели трансплантации сердца, который также был разработанного в лаборатории Рассел в 1973 году 6. Обе модели поддаются исследования в аллогенных ответов отторжения, развития замедленной функции трансплантата и ишемия реперфузии.
Один из самых распространенных вопросов, сообщается с трансплантации почки является сравнительно высокий уровень артериального тромбоза 4,5,7, которые мы также испытали в нашей лаборатории. Поэтому мы намерены выполнить обзор литературы по образованию тромба и, возможно, найти причину этой технической проблеме и также разработатьвозможное решение. Наиболее вероятной причиной тромбоза является несколько извилистый путь кровь занимает от аорты реципиента, в донорской почки аорты затем на доноров почечной артерии. Этот путь приводит к турбулентности в почечной артерии, которые могут привести к активации тромбоцитов и образование тромба. Основываясь на последних наблюдений и поиска соответствующей литературы 8-14 мы пришли с новой техникой, что уменьшило тромбоз до 0%.
Описанная методика здесь варьируется от сообщалось ранее методов в формировании артериальной пятки на носок манжеты, какие объекты улучшенной кровоток и значительно снижает образование тромбов. Манжета формируется путем деления инфра-почечные аорты по лицу почечной артериальной устья под углом менее 45 вывода к продольной оси аорты (фиг.1А и 1В). Это приводит к манжете приблизительно 2 мм в длину. Венозный Каррель патч формируется пересекающих Rеналя вены в НПВ тем самым увеличивая диаметр манжеты. Инфра-почечных доноров брюшной аорты пятки на носок манжеты конец-в-бок анастомозировали получателю брюшной аорты и доноров почечной вены / IVC патч конца в сторону анастомозировали получателю брюшной нижней полой вены (НПВ) , Мочеточник затем вводят в якорь и в мочевой пузырь, как описано Хан и др 3.
Для этого исследования необработанные трансплантатов только с времен теплой ишемии (то есть., Не холодно ишемия) не сравниваются. В этом случае тепловой ишемии относится ко времени от прекращения кровотока через донорской почки (шаг 1.11 ниже) и реперфузии трансплантата у реципиента (шаг 2,11 ниже). Холодовой ишемии относится ко времени, что почки не перфузии и не хранится в холодильниках до начала процедуры имплантации.
Protocol
Representative Results
Discussion
Освоение этой техники трансплантации трудно, но как только достигается это очень мощный инструмент исследования. Пациент хирург / исследователь будут вознаграждены вниманием к деталям и консистенции техники, которая является ключом к овладению любой хирургической процедуры, тем бол?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Эта работа была частично поддержана 1R03DK096151.
Materials
| Instrument | Roboz # | Fine Science Tools # | Arosurgical # |
| Straight micro-dissecting forcep #5 | RS-5015 | 11295-51 | |
| Curved micro-dissecting forcep #7 | RS-5047 | 11297-00 | |
| Curved serrated forcep | RS-5137 | 11052-10 | |
| Vannas micro-dissecting scissors, short | RS-5610 | 09.140.08 | |
| Micro-dissecting scissors, straight, sharp, long | 11.602.11 | ||
| Micro spring handle needle holder | 11.549.15 | ||
| Straight mosquito forcep | 91308-12 | ||
| Micro-dissecting scissors, straight, blunt | RS-5962 | 14078-10 | |
| Micro-dissecting scissors, curved, blunt | RS-5981 | 14079-10 | |
| Micro retractor | RS-6540 | ||
| Instrument tray, 10” x 6 ½” x ¾” | RT-1350S | ||
| Silk suture, 5/0, 22.5m spool | 18020-50 | ||
| Suture | |||
| 10/0 nylon | T4A10Q07 | ||
| 5/0 silk | E19A05N | ||
| Gloves | Drapes | ||
| Biogel from Medex Supply | Precept, #64-9012-9 | ||
| Syringes | Cotton applicators | ||
| B-D 1cc insulin, #329424 | Fisher-brand, #23-400-100 | ||
| Povidone-Iodine swabs | |||
| PDI, #B40600 | |||
| 4/0 Cotton ties | |||
| Domestic cotton autoclaved with instruments | |||
Referências
- Skoskiewicz, M., Chase, C., Winn, H. J., Russell, P. S. Kidney transplants between mice of graded immunogenetic diversity. Transplant Proc. 5 (1), 721-725 (1973).
- Kalina, S. L., Mottram, P. L. A microsurgical technique for renal transplantation in mice. Aust N Z J Surg. 63 (3), 213-216 (1993).
- Han, W. R., Murray-Segal, L. J., Mottram, P. L. Modified technique for kidney transplantation in mice. Microsurgery. 19 (6), 272-274 (1999).
- Ge, F., Gong, W. Strategies for successfully establishing a kidney transplant in a mouse model. Exp Clin Transplant. 9 (5), 287-294 (2011).
- Martins, P. N. Learning curve, surgical results and operative complications for kidney transplantation in mice. Microsurgery. 26 (8), 590-593 (2006).
- Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. Primarily vascularized allografts of hearts in mice. The role of H-2D, H-2K, and non-H-2 antigens in rejection. Transplantation. 16 (4), 343-350 (1973).
- Zhang, Z., Chen, H., Qian, S. Kidney Transplantation in Mice. Experimental Organ Transplantation. , 45-64 (2013).
- Zhang, L., Moskovitz, M., Piscatelli, S., Longaker, M. T., Siebert, J. W. Hemodynamic study of different angled end-to-side anastomoses. Microsurgery. 16 (2), 114-117 (1995).
- Liu, Q., Mirc, D., Fu, B. M. Mechanical mechanisms of thrombosis in intact bent microvessels of rat mesentery. J Biomech. 41 (12), 2726-2734 (2008).
- Chesnutt, J. K., Han, H. C. Tortuosity triggers platelet activation and thrombus formation in microvessels. J Biomech Eng. 133 (12), 121004 (2011).
- Han, H. C. Blood vessel buckling within soft surrounding tissue generates tortuosity. J Biomech. 42 (16), 2797-2801 (2009).
- Gutierrez-Diaz, J. A., et al. Intraluminal thrombus and neointimal hyperplasia after microvascular surgery. Surg Neurol. 24 (2), 153-159 (1985).
- Khouri, R. K., Cooley, B. C., Kenna, D. M., Edstrom, L. E. Thrombosis of microvascular anastomoses in traumatized vessels: fibrin versus platelets. Plast Reconstr Surg. 86 (1), 110-117 (1990).
- Johnson, P. C., et al. Initial platelet deposition at the human microvascular anastomosis: effect on downstream platelet deposition to intact and injured vessels. Plast Reconstr Surg. 90 (4), 650-658 (1992).
