Summary

धनुस्तंभीय उत्तेजना से स्थानीय सीए 1 γ दोलन की पीढ़ी

Published: August 14, 2015
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Summary

दोलन मौलिक नेटवर्क के गुण होते हैं और रोग और दवाओं द्वारा संग्राहक कर रहे हैं। मस्तिष्क-टुकड़ा दोलनों का अध्ययन नियंत्रित परिस्थितियों में अलग-थलग पड़ नेटवर्क के लक्षण वर्णन अनुमति देता है। प्रोटोकॉल सीए 1 γ दोलनों evoking के लिए तीव्र मस्तिष्क के स्लाइस की तैयारी के लिए प्रदान की जाती हैं।

Abstract

Neuronal नेटवर्क दोलनों स्वास्थ्य और रोग में मस्तिष्क की गतिविधियों की महत्वपूर्ण विशेषताएं हैं और चिकित्सकीय इस्तेमाल दवाओं की एक श्रृंखला के द्वारा संग्राहक जा सकता है। (- 80 हर्ट्ज 20) एक प्रोटोकॉल सीए 1 γ दोलनों के अध्ययन के लिए एक मॉडल उत्पन्न करने के लिए प्रदान की जाती है। ये γ दोलनों कम से कम 30 मिनट के लिए स्थिर रहे हैं और पेसमेकर धाराओं के सक्रियण के अलावा उत्तेजक और निरोधात्मक synaptic गतिविधि पर निर्भर करते हैं। Tetanically प्रेरित दोलनों नेटवर्क स्थिति पर रिपोर्ट है कि कील गिनती, दोलन की अवधि, विलंबता और आवृत्ति सहित प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य है और आसानी से मात्रात्मक विशेषताओं में से एक नंबर है। विद्युत प्रेरित दोलनों के फायदे नेटवर्क समारोह का मजबूत लक्षण वर्णन सक्षम करने के लिए स्थिरता, reproducibility और प्रासंगिक अधिग्रहण शामिल है। सीए 1 γ दोलनों का यह मॉडल सेलुलर तंत्र का अध्ययन करने के लिए और व्यवस्थित रोग में और दवाओं से बदल रहा है कैसे neuronal नेटवर्क गतिविधि की जांच करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है।रोग राज्य औषध विज्ञान आसानी से विशेष रूप से रोग तंत्र लक्ष्य है कि दवाओं का चयन सक्षम करने के लिए आनुवंशिक रूप से संशोधित या हस्तक्षेप पशु मॉडल से मस्तिष्क के स्लाइस के प्रयोग से शामिल किया जा सकता है।

Introduction

ब्रेन नेटवर्क दोलनों व्यवहार राज्यों को परस्पर संबंधित अलग आवृत्ति बैंड के भीतर होते हैं। कृन्तकों में, हिप्पोकैम्पस θ दोलनों (5 – 10 हर्ट्ज), खोजपूर्ण व्यवहार 1,2 के दौरान मनाया जाता है γ दोलनों जबकि – धारणा और ध्यान 3,4 सहित विभिन्न संज्ञानात्मक प्रक्रियाओं, के साथ (20 से 80 हर्ट्ज) सहयोगी। तुल्यकालिक γ नेटवर्क गतिविधि भी ऐसे मिर्गी और मानसिक असंतुलन 5,6 के रूप में विकार की विकृति में फंसा है। उदाहरण के लिए, γ दोलनों कॉर्टिकल मिरगी foci 5,7,8 के क्षेत्रों के अनुरूप करने के लिए लगा रहे हैं और pharmacosensitivity या प्रतिरोध, मिर्गी अनुसंधान 9 में जांच के दो महत्वपूर्ण क्षेत्रों में से मार्कर के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है।

हिप्पोकैम्पस मस्तिष्क टुकड़ा व्यापक रूप से नेटवर्क गतिविधि 10-12 जांच करने के लिए इस्तेमाल किया गया है कि एक मॉडल है। विभिन्न प्रोटोकॉल है कि आम तौर पर मस्तिष्क के स्लाइस में γ दोलनों उत्पन्न करने के लिए विकसित किया गया है मैंइस तरह के कम 2 मिलीग्राम +, 4-aminopyridine (4AP), bicuculline, और kainic एसिड 12-17 के रूप में nvolve औषधीय मॉडुलन। औषधीय ट्रिगर दोलनों की कमियों वे नशीली दवाओं के आवेदन के बाद बेतरतीब ढंग से उत्पन्न होती है और मज़बूती से उत्पन्न या समय के साथ स्थिर नहीं कर रहे हैं। विद्युत γ दोलनों इन समस्याओं के कई पर काबू पाने के लिए और भी अस्थायी प्रासंगिक रिकॉर्डिंग और विश्लेषण के लिए अनुमति उत्तेजक घटना के लिए बंद होने का फायदा है शुरू हो गया। यहाँ एक प्रोटोकॉल hippocampal टुकड़ा में परत oriens करने के लिए एक धनुस्तंभीय उत्तेजना देने से सीए 1 γ दोलनों पैदा करने के लिए वर्णित है।

Protocol

चूहों पर सभी प्रयोगों फ्लोरे संस्थान पशु आचार समिति द्वारा अनुमोदित किया गया। मस्तिष्क के स्लाइस काट के लिए 1. सेटअप (मिमी) 125 Choline-CL, 2.5 KCl, 0.4 2 CaCl, 6 2 MgCl, 1.25 नाह 2 पीओ 4, 26 3 NaHCO के शामिल…

Representative Results

परत oriens की धनुस्तंभीय उत्तेजना मजबूत और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य γ दोलनों (35.4 ± 2.2 हर्ट्ज) उत्पन्न, 3B चित्रा देखें। दोलनों सीए 3 से जानकारी एक तुला 32 जी सुई का उपयोग सीए 2 क्षेत्र में टुकड़ा काटने ?…

Discussion

तीव्र मस्तिष्क के स्लाइस में सीए 1 γ दोलनों उत्पन्न करने के लिए एक मजबूत विधि वर्णित है। उत्पन्न दोलनों को नियंत्रित करने और नेटवर्क दोलनों 12 के neurophysiological आधार को समझने के लिए एक बेहतर अवसर को सक्षम कर?…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Supported by APA to RJH, NHMRC program grant 400121 to SP, and NMHRC fellowship 1005050 to SP. CAR acknowledges the support of the ARC (FT0990628) and the DOWD fellowship scheme. The Florey Institute of Neuroscience and Mental Health is supported by Victorian State Government infrastructure funds.

Materials

4-(N-Ethyl-N-phenylamino)-1,2- dimethyl-6-(methylamino) pyrimidinium chloride (ZD7288) Sigma-Aldrich Z3777
Biuculline Sigma-Aldrich 14340
6-cyano-7-nitroquinoxa- line-2,3-dione (CNQX) Sigma-Aldrich C127
Nickel Sigma-Aldrich 266965
Carbamazepine Sigma-Aldrich C4024
(2R)-amino-5-phosphonopentano-ate (APV) Tocris Bioscience 0105
Retigabine ChemPacific 150812-12-7
Choline-Cl Sigma Aldrich C1879-5KG
KCl Sigma Aldrich P9333-500G
NaH2PO4 Sigma Aldrich S9638-250G
NaHCO3 Sigma Aldrich S6297-250G
NaCl Sigma Aldrich S7653-5KG
Glucose Sigma Aldrich G8270-1KG
CaCl2.2H2O Sigma Aldrich 223506-500G
MgCl2.6H2O Sigma Aldrich M2670-500G
Electrode glass Harvard Apparatus  GC150F-10
Concentric bipolar stimulating metal electrode  FHC CBBPF75
Digital Isolator Getting Instruments Model BJN8-9V1 
Model 1800 amplifier A-M systems Model 1800 amplifier
Digitizer National Intruments NI USB-6211
Vibrotome Leica VT1200s

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Citar este artigo
Hatch, R. J., Reid, C. A., Petrou, S. Generation of Local CA1 γ Oscillations by Tetanic Stimulation. J. Vis. Exp. (102), e52877, doi:10.3791/52877 (2015).

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