세 디스펜서 데카르트 프린터 사용 Bioprinted 세포를 구축의 생존
Summary
A Cartesian bioprinter was designed and fabricated to allow multi-material deposition in precise, reproducible geometries, while also allowing control of environmental factors. Utilizing the three-dimensional bioprinter, complex and viable constructs may be printed and easily reproduced.
Abstract
Tissue engineering has centralized its focus on the construction of replacements for non-functional or damaged tissue. The utilization of three-dimensional bioprinting in tissue engineering has generated new methods for the printing of cells and matrix to fabricate biomimetic tissue constructs. The solid freeform fabrication (SFF) method developed for three-dimensional bioprinting uses an additive manufacturing approach by depositing droplets of cells and hydrogels in a layer-by-layer fashion. Bioprinting fabrication is dependent on the specific placement of biological materials into three-dimensional architectures, and the printed constructs should closely mimic the complex organization of cells and extracellular matrices in native tissue. This paper highlights the use of the Palmetto Printer, a Cartesian bioprinter, as well as the process of producing spatially organized, viable constructs while simultaneously allowing control of environmental factors. This methodology utilizes computer-aided design and computer-aided manufacturing to produce these specific and complex geometries. Finally, this approach allows for the reproducible production of fabricated constructs optimized by controllable printing parameters.
Introduction
조직 공학은, 유지, 복원 또는 기본 조직을 강화하고 기능 대체의 개발에 생물학 및 공학의 원리를 사용합니다. 조직 공학뿐만 아니라 세포 기반 센서, 약물 / 독성 검사, 조직 또는 종양 모델 및 기타 과학 및 기술의 발전을 촉진 할 필요에 입체 생체 모방 형 구조를 생성하는 능력. 면밀히 세포 및 조직에서의 원시 세포 외 기질의 고도로 조직화 된 상호 작용을 모방해야하므로 조직 공학 구조물의 3 차원 조직의 제조 방법의 기본적인 구성 요소이다.
생분해 성 및 성형 가공 삼차원 지지체는 세포가 세포의 이차원 층을 형성하기 때문에 신규 이주 조직 구조를 생성하는 중요한 요인이 있지만 선호 입체에서 성장하는 능력이 부족하다. 지지체는 세포의 임시 토대가됩니다부착 및 증식, 그래서 제어 다공성 생분해 성, 그리고 충분한 기계적 integrit와 물질로 구성되어야한다. 지지체 물질은 세포 독성이거나 호스트로부터 부정적인 반응을 만들면 안됩니다. 하이드로 겔은 일반적으로 조직 공학 기술에 사용되어 왔으며, 그들의 친수성 하이드로 겔은 structur 걸쳐 유체 및 가스 교환을 허용한다. 다른 하이드로 겔을 조합하여, 합성 하이드로 겔의 특성은 별개의 애플리케이션 요건을 충족시키는 수정 가능하다.
기존의 조직 공학 방법은 세포 후 FABRICATIO 파종되는 무 세포 다공성 희생 비계의 생성을 포함한다. 많은 기술들은 섬유 접합체, 주조 용매로서 사용하고, 용융 성형하지만, 조직 공학 응용을위한 최소한의 성공적인 것으로 입증되어왔다. 섬유 접합 방법은 섬유가 특정 형상으로 배열 될 수 있도록하지만, 이들은 프로 만 할 수있다매우 얇은 비계으로 줄. 용매 주조 방법은 다공성 구조를 생성하지만 큰 제조 막은 thic 만 3 mm였다. 따라서, 입체적인 구조물을 만드는 것은 이러한 기술을 이용하여 가능하지 않다. 용융 성형 기술은 삼차원 지지체의 제조에 성공 입증 있지만, 이러한 고온은 생물학적 물질 생산 사전 처리 중에 혼입 될 수없는 것이 요구된다. 지지체는 미리 정의 된 또는 가변 마이크로 및 3 차원 지지체를 제조하는 조직 공학의 요구 사항을 충족 할 수있는 능력에 제한이 후 제조 시드. 고체 지지체에 파종 기술과의 또 다른 주요 문제는 혈관과 가난한 기계의 부족이다.
Bioprinting 이후 종래의 단점을 극복하는 비 독성, 생분해 성, 열 가역성 겔의 사용을 통해 입체적으로 확장되었다. 고체 프리폼 제조 t의 몇현재 사용중인 echniques 레이저를 이용한 bioprinting 및 잉크젯 인쇄입니다. 레이저를 이용한 bioprinting 기법 펄스 레이저 소스, 타겟 판과 입체감을 생성하는 수용 기판을 사용한다. 그러나,이 기술로 인해 낮은 스루풋, 낮은 세포 생존에 한정되고, 단지 광경 화성 프리폴리머는 가교 하이드로 겔을 형성하는데 사용될 수 있기 때문에, 제조 된 구조에만 한정 배열을 생성 할 수있다. 잉크젯 인쇄는 피코 리터의 잉크를 증착함으로써 기판 상에 디지털 화상 데이터를 재생 비접촉 방법으로 개발되었다. 그러나, 고해상도의 구조를 생성하지 않는 잉크젯 인쇄는, 경험 빠른 단백질 변성을 구성하고, 세포의 대부분은 증착 동안 용균.
현재, 새로운 첨가제 bioprinting 제조 방법이 개발되었다. 이러한 시스템에서 세포, 단백질, 성장 인자, 및 생체 모방 하이드로 겔은 일반적으로 매트릭스 메이터에 통합IALS 제조 공정 중에 동시에 밀접 고유의 미세 구조를 모방 한 입체 지지체 계 세포 함유 구조물을 생성하기 위해 컴퓨터 제어 액추에이터를 이용하여 증착. 세포 함유 하이드로 겔은 여러 세포 유형, 또는 균질 이루어진 이질적 일 수 bioink를 구성한다. 첨가제 제조 시스템 금고 bioink 드롭하여 놓기 X, Y, Z 방향으로 이동 가능한 컴퓨터 제어 또는 스테이지로 층별 일회용 주사기 팁 비아. 컴퓨터 소프트웨어를 통해, 인쇄 된 스캐 폴드의 구조가 용이하게 어플리케이션의 요구 사항에 따라 조작 될 수있다. 종래 기술과는 달리 입체 의료 기술 (자기 공명 영상, 컴퓨터 단층 촬영) 환자 별 구조를 생성, 디자인에 혼입 될 수있다. 작 제물은 더 높은 L로 제조되기 때문에 이러한 방법들은 또한 혈관 교체 제조 가능성을 허용OCAL 세포 밀도, 세포 – 세포 상호 작용을 허용하고 사후 주입 surviva의 가능성을 향상시킨다.
팔메 프린터 입체 이종 조직 구조 (도 1)를 생성하기 위해 프로그램 가능한 로봇 제조 방법을 사용하여 지정 구축 입체 멀티 디스펜서 시스템이다. 이 고유 조합의 복수의 재료의 사용은 이종 구조를 제조 할 수있다. bioprinter의 초기화는 당신이 bioprinted 구조의 인쇄 성을 최적화하기 위해 다양한 매개 변수를 설정할 수 있기 때문에 bioprinting에서 가장 중요한 단계 중 하나입니다.
bioprinter은 사용자가 대화 형 터치 스크린 제어 패널을 통해 동작하는 프로그래머블 로직 컨트롤러 (PLC) (도 1)에 의해 제어되는 기동, 동작 및 종료 순서와 배치 식 공정을 포함한다. 생체의 오염을 방지하기 위해서논리 재료 bioprinter가 양으로 압력을 폴리 (메틸 메타 크릴 레이트)로 묶인 고효율 미립자 arrestance (HEPA)와 (PMMA) 챔버 공기 순환 시스템을 -filtered (도 1, B, C). 프린터 내부에는 내장 자외선 광원 (도 1, D)를 사용하여 멸균 할 수있다. bioprinter의 핵심 구성 요소는 재현성 10 마이크로 미터 (그림 1, E)의 정확도로 디스펜서 팁을 배치 할 수 있습니다 완전히 프로그램 위치 로봇입니다. 로터리 스크류를 사용하여 230 NL (그림 1, F)로 작은 볼륨을 입금 할 수있는 세 가지 디스펜서가 있습니다. 그들은 각각의 디스펜서에 대한 (그림 1, G)를 인쇄 매개 변수를 관리하는 별도의 컴퓨터를 사용하여 독립적으로 프로그래밍 할 수 있습니다. 회전 축 디스펜스 주사기 아래 팁 주사기 밖으로 이동 bioink 전동 스크류의 회전을 이용한다. 이 디스펜서는 pneumatical에 장착된다LY 제어 도구 네스트 (도 2A는, B), 로봇 제어 프로그램 (도 1, H) 하에서 Z 축 로보트 팔에 장착 된 디스펜서를 전환 할 수 있도록.
XYZ 로봇 (그림 1, I)를 실행하는 컴퓨터 디자인 소프트웨어에서 인쇄 명령을받습니다. 각 프로그램은 분배 위치, 교정 루틴 및 디스펜서 변화하는 프로토콜이 포함되어 있습니다. 각 디스펜서 물질을 증착 곳에 주로 XYZ로 구성되어 생성 된 구조의 디자인은 조정합니다. bioprinter는 XYZ이 시린지 선단의 좌표를 결정하는 두 개의 광학 광 센서 (도 2C)을 포함한다. 이 센서는 디스펜서 선단의 위치를 계산하기 위해 다음을 사용하여 로봇에 좌표 정보를 보냅니다. ACCURA와의 거리를 측정하기 위해 30 × 100 마이크로 미터의 스폿 크기 633 nm의 적색 레이저 다이오드 빔을 투영 추가적인 변위 레이저 (도 2D)가 존재0.1 마이크로 미터의 CY. 빔이 고도로 집중되는 경우 로봇이 인쇄면의 Z 거리를 결정한다. 이 측정 및 Z의 선단의 광학 광 센서 측정은, 정확한 Z의 산출이 인쇄면에 대하여 팁 디스펜서를 배치하는 데 사용되는 좌표를 허용한다. 디스펜서 팁 Y 및 Z 센터를 찾는 X 축 배향 된 광학 광 센서를 통해 측 방향 및 수직으로 이동하고, 측 방향으로 Y 축 센서를 통해 X 축의 중심을 찾는. 표면이 분배 선단의 위치에 상대적인 위치를 결정할 CZ + = d만큼 도끼 + : 인쇄면은 XYZ 공간에서 평탄면에 대한 식을 사용하여 매핑된다. 프린터 단계 (그림 1, j)는 직경 80mm에 샘플 페트리 접시를 보유하고 설정 온도 (그림 1, K)를 유지하기 위해 재순환 수조를 사용합니다. 스테이지 온도는 -20의 범위로 설정하고 내에 안정적으로 유지 될 수있다. USB 카메라가 1 마운트Z 로봇 아암 상에 프린팅 공정 (도 1, L) 중에 분배 팁의 확대도를 제공한다. 프린팅 공정 (도 1, L) 중에 bioprinter의 완전한 뷰를 제공하는 챔버 내부의 상단을 향해 장착 번째 카메라가있다.
컴퓨터 지원 설계 드로잉 소프트웨어는 증착 패턴을 결정하고, 사용자가 점진적으로 이격 방울과 복잡한 구조 (도 3)를 생성하도록 허용한다. 세 가지 차원 경로를 수동으로 프린터와 호환되는 디자인 소프트웨어에 코딩 또는 별도의 컴퓨터 지원 설계 도면 소프트웨어 (그림 4, 표 1)에서 가져올 수 있습니다. 프린터 호환 소프트웨어 허용 같은 시린지 선단과 SUBST 사이 증착법 (단일 액적 증착 또는 연속적인 통로 증착) 경로의 입체 기하학, 증착 속도, 거리로 인쇄 파라미터 변동레이트 인쇄 표면, 개별 방울 및 높이를 증착하고 주사기를 가속화하는 시간은 방울의 증착 사이에 상승된다. 각 프로그램은 인쇄 중, 운영자의 개입없이, 무균 환경을 제공하기 위해 XYZ 분배 위치, 팁 교정 루틴 및 디스펜서 변화하는 프로토콜이 포함되어 있습니다. 로봇의 프로그램 가능한 논리 제어기 (PLC)를 설계 소프트웨어를 실행하는 컴퓨터 명령어를 수신하고, 외부 컨트롤러의 이벤트의 타이밍 (예를 들면, 디스펜서)를 제어한다.이를 위해, PLC는 디스펜서를 제어하는 반복 기법을 사용 로봇 위치 결정 장치, 및 환경 요인.
회전 축, 액체 분배 시스템을 이용하여 입체적인 직접 기록 bioprinting보다 효율적 정확하고, 이전의 방법보다 쉬울에 셀을 증착하는 프로세스를 허용한다. 이 연구는 사용자 정의 내장 bioprinter는 CE를 생성 할 수 표시높은 세포 생존과 LL 함유 하이드로 겔 구축합니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
조직 공학의 주요 초점은 복원 유지, 또는 기본 조직 능을 향상시킬 수있는 생물학적 대체품을 개발하여 장기 이식 부족과 요구 사이의 갭을 연결한다. 이것은 내부 geometr을 통해 복잡한 해부학 적으로 정확한 외부 형상, 정밀 제어와 비계의 직접 제작하게되었다. 입체 bioprinting은 층별 approac를 이용한 디지털 모델의 다양한 크기와 형태의 입체 구조를 생성하기 위해 사용되는 방법이다. 입체 …
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 작품은 그랜트 번호 EPS-0903795 국립 과학 재단 (National Science Foundation), NIH NIDCR R01 – DE019355 (MJY PI), 그랜트 8P20 GM103444 (YM PI)에 의해 수여 아래 정부 지원에 의해 지원되었다.
Materials
| Positioning Robot (JR2000 XYZ) | Janome | ||
| Dispensers: SDAV Linear Drive SmartDispensers | Fishman Corporation | ||
| Optical Light Sensors: | Keyensce | ||
| Displacement Laser: OD Mini | SICK | ||
| Recirculating Water Bath: Polystat | Cole-Parmer | EW-12122-02 | |
| USB Cameras: Dino-Lite Premier 5MP | AnMo Electrionics/YSC Technologies | AD7013MT | |
| Printer-Compatible Computer Design Software: JR-C Points | Janome | Comes with purchase of Janome Robot | |
| Computer-Aided Design Drawing Software: Visual PathBuilder | RatioServ | Can be downloaded at: www.ratioserv.com/index.php/downloads | |
| Printer 3 cc Syringes: | Fishman Corporation | 122051 | |
| 22 G Dispenser Tips | Fishman Corporation | Z520122 | |
| Calcium Chloride Dihydrate | Sigma-Aldrich | 10035-04-8 | |
| Sodium Chloride | Sigma-Aldrich | 7647-14-5 | |
| Porcine Gelatin | Sigma-Aldrich | 9000-70-8 | |
| Titanium Dioxide | Sigma-Aldrich | 13462-67-7 | |
| Protanal LF 20/40 Alginate (Sodium Alginate) | FMC BioPolymer | 9005-38-3 | |
| Hydrochloric Acid | Sigma-Aldrich | 7647-01-0 | |
| Ethylene Glycol | Mallinckrodt Baker, Inc | 9300-01 | |
| Sodium Periodate | Sigma-Aldrich | 7790-28-5 | |
| hADSC | Lonza | PT-5006 | Store in vials in liquid nitrogen until use. |
| Dulbecco's Modified Eagle's Medium | Gibco Life Technologies | 11965-092 | Warm in 37°C water before use. |
| Trypsin/EDTA | Lonza | CC-5012 | Warm in 37°C water before use. |
| Calcein AM | Gibco Life Technologies | C3100MP | Store in the dark at -80°C until use. |
| Live/Dead Mammalian Viability Assay Kit | Invitrogen Life Technologies | L-3224 | Store in the dark at -80°C until use. |
| MES Hydrate | Sigma-Aldrich | M2933 | |
| N-Hydroxysuccinimide | Sigma-Aldrich | 130672 | |
| 1-ethyl-(dimethylaminopropyl) carbodiimide (EDC) | Sigma-Aldrich | E1769 | 10 G |
| Dulbecco's Phosphate-Buffered Saline, +Calcium, +Magnesium | Life Technologies | 14040133 | Warm in 37°C water before use. |
| Dulbecco's Phosphate-Buffered Saline, -Calcium, -Magnesium | Life Technologies | 14190144 | Warm in 37°C water before use. |
| RGD Peptides | International Peptides | ||
| Alexa Fluor 546 Phalloidin Stain | Invitrogen Life Technologies | A22283 | Store at -20°C until use |
| (4’, 6-Diamidino-2-Phenylindole, Dihydrochloride) (DAPI) Stain | Life Technologies | R37606 | Store at -20°C until use |
Referências
- Langer, R., Vacanti, J. P. . Tissue Engineering. Science. 260 (5110), 920-926 (1993).
- Derby, B. Review: Printing and Prototyping of Tissues and Scaffolds. Science. 338 (6109), 921-926 (2012).
- Kachurin, A. M., et al. Direct-Write Construction of Tissue-Engineered Scaffolds. Mat. Res. Soc. Symp. Proc. 698, 10-1557 (2002).
- Sachlos, E., Czernuszka, J. T. Making Tissue Engineering Scaffolds Work. Review on the Application of Solid Freeform Fabrication Technology to the Production of Tissue Engineering Scaffolds. European Cells and Materials. 5, 29-40 (2003).
- Yeong, W. Y., Chua, C. K., Leong, K. F. Rapid Prototyping in Tissue Engineering. Challenges and Potential. Trends Biotechnol. 22 (12), 643-652 (2004).
- Landers, R., Pfister, A., Hubner, U., John, H., Schmelzeisen, R., Mulhaupt, R. Fabrication of Soft Tissue Engineering Scaffolds by means of Rapid Prototyping Techniques. Journal of Materials Science. 37 (15), 3107-3116 (2002).
- Murphy, S. V., Skardal, A., Atala, A. Evaluation of Hydrogels for Bio–Printing Applications. Journal of Biomedical Materials Research Part A. 101A (1), 272-284 (2013).
- Burg, K. J. L., Boland, T. Minimally Invasive Tissue Engineering Composites and Cell Printing. IEEE Eng Med Biol Mag. 22 (5), 84-91 (2003).
- Billiet, T., Vandenhaute, M., Schelfhout, J., Van Vlierberghe, S., Dubruel, P. A Review of Trends and Limitations in Hydrogel-Rapid Prototyping for Tissue Engineering. Biomaterials. 33 (26), 6020-6041 (2012).
- Khalil, S., Nam, J., Sun, W. Multi–Nozzle Deposition for Construction of 3D. Biopolymer Tissue Scaffolds. Rapid Prototyping Journal. 11 (1), 9-17 (2005).
- Pataky, K., Braschler, T., Negro, A., Renaud, P., Lutolf, M. P., Brugger, J. Microdrop Printing of Hydrogel Bioinks into Three–Dimensional Tissue–Like Geometries. Adv Mater. 24 (3), 391-396 (2011).
- Pati, F., Shim, J. H., Lee, J. S., Cho, D. W. Three-Dimensional Printing of Cell–Laden Constructs for Heterogeneous Tissue Regeneration. Manufacturing Letters. 1 (1), 49-53 (2013).
- Gruene, M., et al. Laser Printing of Three–Dimensional Multicellular Arrays for Studies of Cell–Cell and Cell–Environment Interactions. Tissue Eng. 17 (10), 973-982 (2011).
- Khalil, S., Sun, W. Bioprinting Endothelial Cells With Alginate for 3D Tissue Constructs. J Biomed Eng. 131 (11), 1-8 (2009).
- Xu, T., et al. Hybrid Printing of Mechanically and Biologically Improved Constructs for Cartilage Tissue Engineering Applications. Biofabrication. 5 (1), 1-10 (2012).
- Zhang, T., Yan, K. C., Ouyang, L., Sun, W. Mechanical Characterization of Bioprinted in vitro Soft Tissue Models. Biofabrication. 5 (4), 1-10 (2013).
- Chung, J. H. Y., et al. Bio–ink Properties and Printability for Extrusion Printing Living Cells. J. Biomater. Sci., Polym. Ed. 1 (7), 763-773 (2013).
- Yang, S., Leong, K. F., Du, Z., Chua, C. K. The Design of Scaffolds for Use in Tissue Engineering. Part II. Rapid Prototyping Techniques. Tissue Engineering. 8 (1), 1-11 (2002).
- Ferris, C. J., Gilmore, K. G., Wallace, G. G., Panhuis, M. Biofabrication: An Overview of the Approaches Used for Printing of Living Cells. Appl. Microbiol. Biotechnol. 97 (10), 4243-4258 (2013).
- Lu, L., Mikos, A. G. The Importance of New Processing Techniques in Tissue Engineering. MRS Bull. 21 (11), 28-32 (1996).
- Wake, M. C., Gupta, P. K., Mikos, A. G. Fabrication of pliable biodegradable polymer foams to engineer soft tissues. Cell Transplant. 5, 465-473 (1996).
- Mironov, V., Visconti, R. P., Kasyanov, V., Forgacs, G., Drake, C. J. Organ Printing: Tissue Spheroids as Building Blocks. Biomaterials. 30 (12), 2164-2174 (2009).
- Norotte, C., Marga, F. S., Niklason, L. E. Scaffold–free Vascular Tissue Engineering Using Bioprinting. Biomaterials. 30 (30), 5910-5917 (2009).
- Devillard, R., et al. Cell Patterning by Laser–Assisted Bioprinting. Methods Cell Biol. 119, 159-174 (2014).
- Binder, K. W., Allen, A. J., Yoo, J. J. Drop–on–Demand Inkjet Bioprinting: a Primer. Gene Ther Reg. 6 (1), 33 (2011).
- Xu, T., et al. Viability and Electrophysiology of Neural Cell Structures Generated by the Inkjet Printing Method. Biomaterials. 27 (19), 3580-3588 (2006).
- Calvert, P. Inkjet Printing for Materials and Devices. Chem Mater. 13 (10), 3299-3305 (2001).
- Chang, C. C., Boland, E. D., Williams, S. K. Direct–Write Bioprinting Three–Dimensional Biohybrid Systems for Future Regenerative Therapies. J Biomed Mater Res B Appl Biomater. 98 (1), 160-170 (2011).
- Li, M. G., Tian, X. Y. A Brief Review of Dispensing–Based Rapid Prototyping Techniques in Tissue Scaffold Fabrication: Role of Modeling on Scaffold Properties Prediction. Biofabrication. 1 (3), 1-10 (2009).
- Bouhadir, K. H., Lee, K. Y., Alsberg, E., Damm, K. L., Anderson, K. W., Mooney, D. J. Degradation of Partially Oxidized Alginate and its Potential Application for Tissue Engineering. Biotechnol Prog. 17 (5), 945-950 (2001).
- Rowley, J. A., Madlambaya, G. Alginate Hydrogels as Synthetic Extracellular Matrix Materials. Biomaterials. 20 (1), 45-53 (1999).
- Smith, C. M., Christian, J. J., Warren, W. L. Characterizing Environmental Factors that Impact Viability of Tissue–Engineered Constructs Fabricated by a Direct–Write Bioassembly Tool. Tissue Engineering. 13 (2), 373-383 (2007).
- Ozbolat, I., Yu, Y. Bioprinting Towards Organ Fabrication: Challenges and Future Trends. IEEE Trans Biomed Eng. 60 (3), 691-699 (2012).
- Peltola, S. M., Melchels, F. P., Grijpma, D. W., Kellomaki, M. A. A Review of Rapid Prototyping Techniques for Tissue Engineering Purposes. Annals of Medicine. 40 (4), 268-280 (2008).
- Malda, J., et al. 25th Anniversary Article: Engineering Hydrogels for Biofabrication. Adv Mat. 25 (36), 5011-5028 (2013).
- Murphy, S. V., Atala, A. 3D Bioprinting of Tissues and Organs. Nat Biotech. 32 (8), 773-785 (2014).
- Jia, J., et al. Engineering Alginate as Bioink for Bioprinting. Acta Biomaterialia. 10 (10), 4323-4331 (2014).
- Forty, R. A., Steinberg, M. S. The Differential Adhesion Hypothesis: a Direct Evaluation. Biologia do Desenvolvimento. 278 (1), 255-263 (2005).
- Wang, L., Shansky, J., Borselli, C., Mooney, D., Vandenburgh, H. Design and Fabrication of a Biodegradable, Covalently Crosslinked Shape–Memory Alginate Scaffold for Cell and Growth Factor Delivery. Tis Eng Part A. 18 (19-20), 2000-2007 (2012).
- El–Sherbiny, I. M., Yacoub, M. H. Hydrogel Scaffolds for Tissue Engineering: Progress and Challenges. Global Cardiology Science, & Practice. 3 (38), 316-342 (2013).
- Smith, C. M., et al. Three–Dimensional BioAssembly Tool for Generating Viable Tissue-Engineered Constructs. Tissue Engineering. 10 (9–10), 1566-1576 (2004).
- Ozbolat, I. T., Chen, H. Development of a ‘Multi-arm Bioprinter’ for Hybrid Fabrication of Tissue Engineering Constructs. Robotics and Computer–Integrated Manufacturing. 30 (3), 295-304 (2014).
- Kolesky, D. B., Truby, R. L., Gladman, A. S., Busbee, T. A., Homan, K. A. Three-Dimensional Bioprinting of Vascularized, Heterogeneous Cell–Laden Tissue Constructs. Adv Mater. X. Adv Mater. X, x-y (2014).
