O efeito dos genes e do ambiente no espaço social de Drosophila melanogaster pode ser quantificado por meio de um paradigma analítico poderoso, mas direto. Mostramos aqui diferentes fatores que podem afetar esse espaço social e, portanto, precisam ser levados em consideração ao projetar experimentos nesse paradigma.
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Artigo de método
Condições que afetam Espaço Social em
Neste artigo
Resumo
Resumo
O ensaio aqui descrito espaço social pode ser utilizado para quantificar interacções sociais de Drosophila melanogaste R - ou outros insectos pequenas - de uma maneira simples. Como já foi previamente demonstrada 1, numa câmara de bi-dimensional, que primeiro forçar as moscas para formar um grupo compacto, subsequentemente, o que lhes permite levar a sua distância preferida entre si. Depois de ter resolvido as moscas, medimos a distância para o vizinho mais próximo (ou espaço social), o processamento de uma imagem estática com o software on-line gratuito (ImageJ). A análise da distância para o vizinho mais próximo permite aos pesquisadores determinar os efeitos de fatores genéticos e ambientais sobre a interação social, enquanto controlando para possíveis fatores de confusão. Diversos fatores, como capacidade de subida, hora do dia, sexo e número de moscas, pode modificar o espaçamento social das moscas. Nós, assim, propor uma série de controlos experimentais para mitigar esses efeitos de confusão. Este ensaio podeser utilizado para, pelo menos, duas finalidades. Primeiro, os pesquisadores podem determinar a forma como a sua mudança ambiental favorito (como o isolamento, temperatura, estresse ou toxinas) terá impacto social, espaçamento 1,2. Em segundo lugar, os pesquisadores podem dissecar as bases genéticas e neurais desta forma básica de comportamento social 1,3. Especificamente, ele foi usado como uma ferramenta de diagnóstico para estudar o papel de genes ortólogos que estariam envolvidas no comportamento social em outros organismos, tais como genes candidatos para o autismo em humanos 4.
Introdução
As interações sociais são cruciais para o bom desenvolvimento e saúde dos indivíduos dentro de um grupo como um todo, e pode ser observado através de numerosas espécies, a partir de seres humanos (Homo sapiens) para os organismos mais simples, como as moscas da fruta (Drosophila melanogaster) 5,6. Uma mosca da fruta indivíduo ou meios comuns de compartilhamento humano para processar a informação sensorial durante essas interações, quer seja: auditiva, visual, olfativa, tátil, ou gustação. Nós e outros a hipótese de que há uma neurocircuitry potencialmente compartilhada subjacente respostas comportamentais a interações sociais e que as cél....
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Protocolo
1. Equipamentos e Reagentes Criado In-house (Veja a lista de materiais para outros)
- Prepare um aparelho de anestesia frio Drosophila como descrito anteriormente 8.
- Preparar um aspirador de mosca como previamente descrito 13.
- Prepare câmaras espaço social e titulares.
- Ordenar ou fazer painéis de vidro e espaçadores de acrílico para criar as câmaras espaço social. Cada câmara de espaço social consiste em dois painéis de vidro quadrados (17,6 cm por 17,6 cm, com uma espessura de 0,3 cm), dois espaçadores de acrílico triângulo direita (com uma altura de 16,5 cm, uma base de 8,9 cm, com uma espessura d....
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Resultados
A câmara de espaço social pode ser usado como uma ferramenta para quantificar o comportamento social de Drosophila melanogaster. Espaçadores acrílico e chapas de vidro são cortadas em conjunto para formar uma arena triangular interna que proporciona uma área bidimensional em que voa podem formar grupos estáveis sem a presença de diversos estímulos potencialmente de confusão. Quando as moscas são transferidos para a arena vertical, eles são surpreendidos por ser batido para baixo, e eles respondem por um compo.......
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Discussão
Neste protocolo, um procedimento detalhado para a quantificação do espaço social foi descrita. Alguns passos cruciais para garantir o experimento for bem-sucedida são: 1) usar sempre luvas durante a limpeza e configuração do aparelho, para manter seus próprios óleos e aromas fora da câmara interna do aparelho, 2) garantir moscas são coletadas, pelo menos, um dia antes o experimento para reduzir os efeitos potenciais da anestesia frio, 3) 2 horas antes do experimento fornecer novos frascos contendo alimentos frescos para.......
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Divulgações
Os autores declaram que não têm interesses financeiros concorrentes.
Agradecimentos
Os autores querem agradecer ao Dr. Tadmiri Venkatesh por seu incentivo para preparar este manuscrito, Dova Brenman e Selwyn Chui por seus comentários construtivos, Elyssa Burg e Wayne Rasband por projetar a macro em ImageJ para todas as distâncias de intervoo e para distâncias vizinhas mais próximas. Os autores também querem agradecer aos revisores por seus comentários construtivos.
A.A.A, M.C.C. e A.F.S foram responsáveis pelo desenho da pesquisa; S.N.J., A.A.A, M.N., Z.R. e A.J.M. realizaram os experimentos. A.A.A, M.N., A.J.M. e M.C.C. e A.F.S. analisaram os dados; A.R.M. e A.F.S. escreveram o manuscrito.
Este....
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Microscópio Zoom Estéreo | Nikon | SMZ-645 | Qualquer outro escopo padrão para manuseio de moscas funcionaria |
| Pincéis pequenos | para empurrar moscas | ||
| Jazz-mix | Fisher | 33545 | qualquer outro alimento padrão de drosófila funcionaria |
| Mini-Alarme Temporizador/Cronômetro | |||
| Canetas | |||
| Fita Adesiva | |||
| Clipes de fichário de tamanho médio | Grampos | para manter as câmaras juntas: clipes médios de 1-1/4" (32mm) com capacidade de 5/8" | |
| pequenos suportes | Carolina | 707161 | para segurar as câmaras em uma orientação vertical |
| Bureta aperta | Carolina | 707362 | |
| Câmera Digital | Nikon | Coolpix S8000 | para tirar as fotos estáticas |
| Régua | para poder dimensionar a placa de três | ||
| dobras da imagem e a tampa | para fornecer um fundo branco e uma luz homogênea. | ||
| batendo pad | qualquer mouse pad funciona. | ||
| Prisma 6 | GraphPad Software Inc. | Prism 6 para Mac OS X | Qualquer software de análise estatística com teste t, unidirecional e dois ANOVA funcionaria |
Referências
- Simon, A. F., et al. A simple assay to study social behavior in Drosophila.: measurement of social space within a group. Genes Brain Behav. 11, 243-252 (2012).
- Kaur, K., Simon, A. F., Chauhan, V., Chauhan, A.
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Reimpressões e permissões
