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Artigo de método

Dispositivo micro centrífuga baseada capilar para a Formação tamanho controlável de Monodisperse microgotas

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DOI:

10.3791/53860

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22 de fevereiro de 2016

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Neste artigo

Resumo

Aqui, demonstramos um método de produção simples para microgotículas de água em óleo (A/S) monodispersas e controláveis por tamanho usando um dispositivo microfluídico centrífugo baseado em capilares. Este método requer apenas um pequeno volume de amostra e permite uma produção de alto rendimento. Esperamos que este método seja útil para análises bioquímicas e celulares rápidas.

Resumo

Aqui, demonstramos um método simples para a produção rápida de, monodispersas, microgotículas de E / S de tamanho controlável W usando um dispositivo de microfluidos centrífuga à base de capilar. microgotículas W / S foram recentemente utilizados em métodos eficientes que permitem miniaturizados experiências químicas. Por conseguinte, o desenvolvimento de um método versátil para produzir monodispersa W / O microgotículas é necessária. Desenvolvemos um método para gerar monodispersa microgotículas W / O com base em um dispositivo axissimétrico centrífuga à base de capilar co-corrente de microfluidos. Tivemos sucesso no controlo do tamanho das microgotículas ajustando o orifício capilar. O nosso método requer equipamento que é mais fácil de usar do que com outras técnicas de microfluidos, requer apenas um pequeno volume (0,1-1 pi) da solução de amostra para o encapsulamento, e permite a produção de centenas de milhares número de microgotículas W / O por segundo . Esperamos que este método ajudará estudos biológicos que requerem precioso s biológicaplos de conservação do volume de amostra, para uma rápida bioquímica análise quantitativa e estudos biológicos.

Introdução

W / O microgotículas 1-5 têm muitas aplicações importantes para o estudo da bioquímica e da tecnologia biológica, incluindo a síntese de proteínas 6, 7 cristalização de proteínas, emulsão de PCR 8,9, encapsulamento de células 10, e construção de sistemas semelhantes a células artificiais 5,6. Para produzir microgotículas W / O para estas aplicações, são importantes critérios de controlo de tamanho e monodispersibility das microgotículas W / O. Microcanais para fazer monodispersa, tamanho controlável W / O microgotículas 11 baseiam-se no método de co-corrente 12,13, método de focag....

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Protocolo

1. Fabrico de um dispositivo micro-capilar baseada

  1. Configurar dos titulares
    Nota: O desenho titular é apresentada na Figura 2A.
    1. Recorte cada um dos quatro discos de os suportes (figura 2A (i) - (iv)) a partir de chapa de plástico poliacetal 2 mm de espessura utilizando uma máquina de moagem. Use as seguintes dimensões para cada um dos quatro discos do titular: (i) o disco 1 de diâmetro 8,5 milímetros, furo capilar (CH) de diâmetro 1,3 mm parafuso furo (SH) de diâmetro 1,8 mm; (Ii) o disco 2 de diâmetro 8,7 mm, diâmetro CH 2,0 mm, diâmetro SH 1,8 mm; (Iii) do disco 3 de diâm....

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Resultados

Neste estudo, são apresentados um método simples para a geração de microgotículas W / O de tamanho de células usando um dispositivo de microfluidos centrífuga à base de capilar (Figura 1). O dispositivo de microfluidos foi composto por um suporte de capilar (Figura 2B), dois capilares de vidro (capilares de vidro interior e exterior na Figura 3C), e um microtubo contendo um óleo incluindo surfactante. Nós injectado 0,1 mL de solução de a.......

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Discussão

Usando este dispositivo, o monodispersa W / O foram gerados por microgotículas planalto-Rayleigh instabilidade de um jacto de fluxo 17. O exame microscópico não revelou a presença de gotículas de satélite. Na fabricação do dispositivo, três passos críticos são essenciais para gerar sucesso microgotículas / O w monodispersas. Em primeiro lugar, a fornecer um fluxo linear de tensioactivo contendo óleo e uma solução aquosa, os furos capilares de quatro discos devem ser dispostas num padrão concêntrico. Em segund.......

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Divulgações

Nenhum conflito de interesse é declarado.

Agradecimentos

Este trabalho foi apoiado pela área de pesquisa PRESTO "Design and Control of Cellular Functions" da Agência Japonesa de Ciência e Tecnologia (JST), uma Grant-in-Aid for Scientific Research of Innovative Areas "Molecular Robotics" (Projeto nº 24104002) do Ministério da Educação, Cultura, Esportes, Ciência e Tecnologia (MEXT), Japão, Grant-in-Aid for Young Scientists (A) (Projeto nº 24680033) e Pesquisa Científica (B) (Projeto nº 26280097) da Sociedade Japonesa de Robótica Molecular. o curso de Promoção da Ciência (JSPS) e o curso de Design Criativo para Biociência e Biotecnologia da Escola de Biociência e Biotecnologia da Tokyo Tech.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Placa de plástico de poliacetal de 2 mm de espessuraFerramentaNikkyo Technos, Co., Ltd. (Japão)244-6432-08
FresadoraRoland DG Co., Ltd. (Japão)MDX-40A
Fresa de topo RSE230-0.5 * 2.5FerramentaNS Tool Co., Ltd. (Japão)01-00644-00501
Parafusos M2 * 40FerramentaJujo Química Sintética Labo. (Japão)Nº 0001-024
Ferramenta extratora de capillry de vidroNarishige (Japão)Ferramenta PC-10
MicroforgeNarishige (Japão)Ferramenta
capilar de vidro internoNarishige (Japão)Ferramenta
capilar de vidro externoWorld Precision Instruments Inc. (EUA)1B200-6
Ferramenta de tubo de amostra de 1,5 mlINA OPTIKA CO.,LTD (Japão)ST-0150F
Reagente HexadecanoWako Pure Chemical Industries Ltd. (Japão)080-03685 
Monoleato de sorbitano (Span 80)ReagenteTokyo Chemical Industry Co., Ltd. (Japão)Reagente do sistema S0060
Milli QMerck Millipore Corporation (Alemanha)ZRQSVP030
Ferramenta de mini-centrífuga do tipo oscilanteHitech Co., Ltd. (Japão)Ferramenta de microscópio digital ATT101
KEYENCE Corporation (Japão)VHX-2001
MF-900 G-1

Referências

  1. Song, H., Chen, D. L., Ismagilov, R. F. Reactions in droplets in microfluidic channels. Angew. Chem., Int. Ed. 45 (44), 7336-7356 (2006).
  2. Huebner, A., et al. Microdroplets: a sea of applications? Lab Chip. 8, 1244-1254 (2008).
  3. Taly, V., Kelly, B. T., Griffiths, A. D.

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Reimpressões e permissões

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