Burada tarlada bu tekniğin standardizasyonu teşvik etmek mortalite olmadan tekrarlanabilir yaralanma ile sonuçlanan farelerde bağırsak iskemi-reperfüzyon ayrıntılı prosedürü açıklar. Bağırsak iskemi-reperfüzyon hasarının Bu model yaralanma ve yenilenme hücresel ve moleküler mekanizmaları incelemek için kullanılabilir.
İntestinal iskemi ateroskleroz, tromboz, hipotansiyon, nekrotizan enterokolit, bağırsak transplantasyonu, travma ve kronik inflamasyon gibi klinik durumların geniş bir yelpazesi ile ilişkili yaşamı tehdit eden bir durumdur. Bağırsak iskemi-reperfüzyon (İR) hasarı bağırsak hasarı ile sonuçlanan mezenterik damarları aracılığıyla yetersiz kan akışının neden olduğu akut mezenterik iskemi sonucu, olduğunu. Reperfüzyon aşağıdaki iskemi daha bağırsağın zarar arttırabilir. IR yaralanma mekanizmaları karmaşık ve tam olarak anlaşılamamıştır vardır. Bu nedenle, deneysel küçük hayvan modelleri IR yaralanma patofizyolojisi ve yeni tedavilerin geliştirilmesi anlamak için kritik öneme sahiptir.
Burada ölüm olmadan ince bağırsağın tekrarlanabilir yaralanma sağlayan akut bağırsak IR yaralanma fare modeli açıklanmaktadır. Bu geçici occludin distal ileum bölgesinde uyarılması iskemi ile elde edilirg mikrovasküler klipleri kullanarak 60 dakika superior mezenterik arterin periferik ve terminal teminat dalları. 1 saat ya da histolojik analizi ile incelenmiştir bağırsağın tekrarlanabilir yaralanma yaralanma sonuçları açıklandıktan sonra 2 saat reperfüzyon. mikrovasküler klip uygun pozisyon prosedürü için kritik öneme sahiptir. Bu nedenle video klibi bu tekniğin ayrıntılı bir görsel adım adım açıklamasını sağlar. Bağırsak İR yaralanma Bu model yaralanma ve yenilenme hücresel ve moleküler mekanizmaları incelemek için kullanılabilir.
bağırsak iskemisi ve epitel zarar kan akışının kesilmesi için çok hassastır. iskemi sonrası reperfüzyon doku yeniden oksijenlenmesini sağlar ve ayrıca patolojiyi teşvik edebilir. Bu nedenle, intestinal iskemi ve reperfüzyon yaralanması nekrotizan enterokolit, ince bağırsak nakli allograft reddi, abdominal aort anevrizması, kalp akciğer baypas ve iltihaplı bağırsak hastalığı 1,2 komplikasyonları içeren patolojilerin geniş bir yelpazesi ile ilişkilidir. Bağırsak IR hasarı, özellikle akut mezenterik iskemi, morbidite ve mortalite 3 sonuçlanan hayatı tehdit eden bir durumdur.
Az anlaşılmış olmasına rağmen, intestinal iskemi-reperfüzyon (İR) hasarı bağırsak Mikrobiyota değişiklikler gibi reaktif oksijen türleri ve enflamatuar sitokinlerin ve kemokinlerin 1,4-6 üretimi ile ilişkili olduğu düşünülmektedir. Bu, her iki aktivasyonuna yol açarNate ve inflamasyon ve doku hasarı 1,7,8 teşvik adaptif immün mekanizmalar.
Onlar kolay gain- ve zarar fonksiyon-genetik deneyler izin verdiği Hayvan modelleri, IR yaralanma mekanizmaları anlamak için kritik öneme sahiptir. IR çeşitli hayvan modelleri tam damar tıkanıklığına, düşük akımlı iskemi geliştirildi, ve (son kapsamlı inceleme 9 özetlenmiştir) damar tıkanıklığına segmentli edilmiştir. Superior mezenterik arter (SMA) tam damar tıkanıklığı neden olduğu bağırsak iskemi büyük hayvanların ve kemirgenler 9-11 IR kolay ve yaygın olarak kullanılan bir modeldir. Bununla birlikte, bağırsak farklı alanlarda hasar karşı farklı duyarlılığa sahiptir. Buna ek olarak, yaralanma değişken derecelerde iskemik hasar ve kurtarma sonucu süresi farklı anestezik, analjezik, arter tıkanıklığı teknikleri aralığı yanı sıra tutarsızlık birden STUDIE karşısında IR biyoloji anlayışımızı karıştırıcıs. Tablo 1 fare IR çalışmalarda bu tutarsızlıkları ortaya koymaktadır. kısa iskemik kez (30-45 dakika) kullanarak büyük dezavantajı vakalar ve kontroller arasındaki fark farklar görülebilir bunun üzerine kurtarma penceresi hedefliyor. epitele Hafif yaralanma, bu nedenle, reperfüzyon sonrası bir saat çözülmesi patolojik ölçümlerini epitel iadesinde farklılıkları bulmak gerekebilir uzman olabilir. Bunun tersine, aşırı hasar, iskemik yaralanma, 100 dakika tarafından görülen ölüm oranını ve geri kazanım süresi arttıkça, iade artık mümkün değildir epitel, tam soyulma- neden olabilir. Bu nedenle, burada bizim tarlada bu tekniğin standardizasyonu teşvik etmek mortalite olmadan tekrarlanabilir yaralanma ile sonuçlanan farelerde bağırsak IR ayrıntılı prosedürü açıklar. Bağırsak İR yaralanma Bu model yaralanma ve yenilenme hücresel ve moleküler mekanizmaları incelemek için kullanılabilir.
Bağırsak IR yaralanma fare modellerinin geliştirilmesi büyük ölçüde doku hasarının mekanizmaları iyi anlaşılmasını sağlamıştır ve doku hasarı 7,9,11,34 en aza indirmek için potansiyel terapötik stratejilerin geliştirilmesine yardımcı oldu. Bu protokolün kritik adımlar mikrovasküler klip doğru konumlandırma, IR yaralanma iskemi ve uygun histolojik değerlendirme doğru zamanlama vardır.
iskemi süresi daha sonraki epitel hasar için kritik öneme sahi…
The authors have nothing to disclose.
Rus Bilim Vakfı tarafından desteklenen bu çalışma, hayır verin. 14-50-00060 ve LLC RUSCHEMBIO. Bu çalışma aynı zamanda (CJ için) 294.083 (AVT için), ve NIH hibe RO1 DK47700 tarafından hibe Amerika Crohn`s ve Kolit Vakfı tarafından desteklenmiştir.
Heated Pad | Sunbeam | E12107-819 | Alternative: Braintree Scientific heated pad |
Table top research anesthesia Machine | Vasco | UCAP 0001-0000171 | Alternative: Parkland Scientific, V3000PS |
Nose Cone | Parkland Scientific | ARES500 | |
Scavenger canister and replacement cartridge | Parkland Scientific | 80000, 80120 | |
Induction Chamber | Surgivet | V711802 | |
Isoflurane | Piramal Healthcare | NDC 66794-013-10 | Controlled substance, contact IACUC |
Animal clipper | Oster | Oster Golden A5 078005-050-003 | |
Ophthalmic ointment | Webster | 8804604 | |
Buprenorphine | McKesson | 562766 | Controlled substance,contact IACUC |
Ketaset (Ketamine HCl) | Pfizer | NADA 45-290 | Controlled substance, contact IACUC |
Cotton tips | Puritan medical products | 806-WC | Autoclave before use |
Betadine | Purdue Products | 67618-150-17 | 10% Povidone-Iodine |
Sterile saline solution | Aspen | 46066-807-60 | Adjust to room temperature before use |
Sterile cotton gauze pad | Fisher Healthcare | 22-415-468 | |
Non-adherent pad prepack | Telfa | 1238 | |
IR rodent thermometer | BIOSEB | BIO-IRB153 | |
Micro vascular clips, 70g | Roboz Surgical | RS5424, RS5435 | Alternative: WPI 14121, for SMA occlusion |
Micro vascular clips, 40g | Roboz Surgical | RS6472 | Alternative:WPI 14120, for collateral vessels occlusion |
Clip applying forceps | World Precision Instruments | 14189 | Alternative: Roboz #RS-5410 or #RS-5440 |
Gill's 3 hematoxylin | Thermo Scientific | 14-390-17 | |
Surgical staples, Reflex 9 mm | Cell Point Scientific | 201-1000 | |
Autoclip applier | Beckton Dickinson | 427630 | |
Byopsy foam pad | Simport | M476-1 | |
Tissue cassette | Fisher Healthcare | 15182701A | Histosette II combination lid and base |
10% buffered formalin | Fisher Scientific | 245-684 | |
Surgical iris scissors | World Precision Instruments | 501263-G SC | Alternative: Roboz RS6816 |
Operating scissors | World Precision Instruments | 501219-G | Alternative: Roboz RS6814 |
Dressing forceps | Roboz Surgical | RS-5228, RS-8122 | Alternative: World Precision Instruments 1519-G |
Heparin, endotoxin free, 300 USP units/vial, 50mg | Sigma | 2106 | |
Reflex wound clip removing forceps | Roboz Surgical | RS-9263 | Alternative: World Precision Instruments: 500347 |
Mice C57BL/6J mice | Jackson Laboratory | Stock No 0664 | |
Telfa non-adherent dressings, 3×4, sterile | Coviden | 1050 |