マウスの動静脈瘻内皮への管腔内薬物送達
Summary
After puncturing the aorta through the inferior vena cava (IVC) to create an aorto-caval fistula in the mouse, solution containing a drug is infused into the IVC via the same needle, followed by incubation. This method enables more robust drug delivery to the venous endothelium compared to the external route.
Abstract
動静脈瘻を強化する治療薬の送達（AVF）成熟のいずれか腔内または外部の経路を介して投与することができます。簡単なマウスAVFモデルは、瘻の作成と同時に静脈内皮への薬液の管腔内投与と組み合わせました。このモデルの技術的な側面が議論されています。全身麻酔下で、腹部切開が行われ、大動脈と下大静脈（IVC）が露出しています。赤外線腎大動脈とIVCをクランプするために解剖されています。近位および遠位のクランプ後、穿刺部位が露出され、25 G針を大動脈およびIVCに両方の壁を穿刺するために使用されます。すぐに穿刺した後、レポーター遺伝子を発現するウイルスベクターは、インキュベーションの15分間、続いて、同じ針を介しIVCに注入しました。腔内投与方法は、外部の経路による投与に比べて静脈内皮へのより強固なウイルス遺伝子送達を可能にしました。このノーブ配信lの方法は、AVFの成熟における内皮の役割を探求し、手術時の管腔内薬物送達を可能にする研究を促進します。
Introduction
大動脈と下大静脈（IVC）の間ネズミaortovenous瘻（AVF）穿刺モデルが確立された技術である。このモデルでは1、赤外線腎大動脈の両方の壁がに出た、25 G針で穿刺されています赤外線腎大静脈に隣接します。前方大動脈エントランスホールは、単純な圧縮で修復され、縫合糸の修理を必要としません。高解像度のドップラー超音波および組織学的分析によりシリアルフォローアップ検査は、AVFは人間のAVFの既知の病態生理を反復する、成熟期、その後、失敗の位相を持つように示している。2
AVFの成熟を調節する機構を調査するために、成熟AVF内皮への治療剤の送達のための改良された方法が必要とされています。血管への治療薬の送達は、内腔への血管内送達を介して、または外膜の外部の送達を介してのいずれかであることができます。外部配信の一例は、comのですmonlyプルロニックゲルの外膜のアプリケーションを使用していました。この共重合体は、熱可逆性であり、体温に暖めたとき、固体ゲルを液体から変換されました。以前の研究は、プルロニックゲルで混合し、薬剤がインビボで局所的に適用されたときに持続的薬物送達が達成される。プルロニックゲルを有するウイルスベクターまたはsiRNAの3,4-外膜アプリケーションは血管周囲送達システムとして有効であることが報告されている示されている。5,6我々また、ペプチドによる外膜の刺激による外植人間の伏在静脈の治療は、内皮受容体タンパク質のリン酸化をもたらしたことを報告している。7
一方、研究者らはまた、静脈グラフトの8月10日 、イヌおよびウサギ11,12モデルにおけるウイルスおよび非ウイルスベクターの両方の管腔内配信を使用しています。これらの報告では、遺伝子導入は、静脈収穫後ex vivoで実施しました。 Eslami らは、血管内のウイルス遺伝子が提供する報告しましたyはバイパスを作成せずにその場で静脈を頸動脈にする。13 Glovermanら。ラット大腿動脈、浅腹壁静脈瘻における裸のDNAの管腔内および外膜の配信を報告した。14メイヨー・グループは、マウス頸動脈-頚静脈瘻における外膜の薬物送達を報告した。15,16しかし、これらの以前に報告されたモデルが作成する縫合吻合を必要とAVF。この報告書では、マウスでの同時AVFの作成と管腔内薬物送達は、AVF作成の縫合レスモデルを用いて、記載されています。この修正されたマウスAVFモデルを用いて瘻孔の静脈血肢に管腔内薬物送達のための簡単な方法を行うことができます。
Protocol
Representative Results
Discussion
ネズミAVFモデルのこの変更は、AVFの作成時に静脈内皮への管腔内薬物送達を内蔵しています。 AVFは25 G針で赤外線腎動脈を穿刺し、同じ針を介して薬液の注入に続いてIVCへの反対大動脈壁を通って穿刺を拡張することによって作成されました。解決策は、イントラ大静脈維持されている、すなわち 。、AVFの静脈手足に、デクランプまで。何17-19他のネズミAVFモデルからこのモデ…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
This work was supported in part by the United States Department of Veterans Affairs Biomedical Laboratory Research and Development Program Merit Review Award I01-BX002336, the National Institute of Health grant R56-HL095498, as well as with the resources and the use of facilities at the VA Connecticut Healthcare System, West Haven, CT.
Materials
| Pluronic F-127 | Sigma-Aldrich | P2443-250G | Used as 30% solution in d-water |
| GFP antibody | NOVUS BIOLOGICALS INC | NB100-1770 | |
| Ad-CMV-GFP | VECTOR BIOLABS | 1060 | |
| 0.9% Sodium Chloride Irrigation, USP | Baxter | 2F7122 | |
| BD PrecisionGlide Needle 25G x 5/8 | BD | 305122 | |
| BD 1ml Syringe Tuberculin Slip Tip | BD | 309659 | |
| Scarpel | Surgical Design Inc | 22079707 | |
| 6-0 ETHILON P-1 11mm 3/8c Reverse Cutting | ETHICON INC | 697G | |
| Vevo 770 ultrasound machine | Visualsonics | 20-60 Mhz scan head; RMV-704 | |
| Vascular clamp | Roboz Surgical Instrument Co. | RS-5424 | |
| Clamp applying forceps | Roboz Surgical Instrument Co. | RS-5410 |
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