After puncturing the aorta through the inferior vena cava (IVC) to create an aorto-caval fistula in the mouse, solution containing a drug is infused into the IVC via the same needle, followed by incubation. This method enables more robust drug delivery to the venous endothelium compared to the external route.
Levering av terapeutiske midler for å forbedre arteriovenøs fistel (AVF) modning kan administreres enten via intraluminale eller ytre ruter. Den enkle murine AVF modell ble kombinert med intraluminal administrering av medikamentløsning til vene endotelet samtidig som fistula oppretting. Tekniske aspektene ved denne modellen er diskutert. Under generell anestesi, er en abdominal snitt gjort og aorta og vena cava inferior (IVC) er utsatt. Den infra-renal aorta og IVC er dissekert for klemming. Etter proksimale og distale klem, er stikkstedet eksponert og en 25 G nål brukes til å punktere begge veggene i aorta og inn i IVC. Umiddelbart etter punktering, var en reporter gen-uttrykke viral vektor tilført i IVC via samme nål, etterfulgt av 15 min inkubasjon. Den intraluminal administrasjon metoden aktivert mer robust viral genet levering til vene endotelet i forhold til administrasjon av den eksterne ruten. dette novel metode for levering vil legge til rette for studier som utforsker rolle endotelet i AVF modning og gjør intraluminal levering av legemidler ved kirurgisk operasjon.
Den murine aortovenous fistel (AVF) punktering modell mellom aorta og vena cava inferior (IVC) er nå en etablert teknikk. 1 I denne modellen, både vegger av infra-nyre aorta er punktert med en 25 G nål, avslutter inn i tilstøtende infra-renal vena cava; den fremre aorta inngangshullet er reparert med enkel kompresjon, og krever ikke sutur reparasjon. Serie oppfølgningen av høyoppløselig Doppler ultralyd og histologiske analyser viser AVF å ha en modningsfase og deretter en sviktende fase, rekapitulere den kjente patofysiologien av menneskelig AVF. 2
Å utforske mekanismer som modulerer AVF modning, er forbedrede metoder for levering av terapeutiske midler til modning AVF endotelet nødvendig. Levering av terapeutiske midler for å fartøy kan være enten via endovaskulær levering til lumen, eller via ekstern levering til adventitia. Et eksempel på ekstern levering er comvanlig benyttes adventitia anvendelse av Pluronic gel. Denne kopolymer er termo-reverserbar og omdannet fra flytende til fast gel når det oppvarmes til kroppstemperatur. Tidligere studier har vist vedvarende medikamentavgivelse oppnås når stoffet blandes i Pluronic gel påføres topisk in vivo. 3,4 adventitia anvendelse av virale vektorer eller siRNA med Pluronic gelen har blitt rapportert å være effektiv som et perivaskulær leveringssystem. 5,6 Vi har også rapportert at behandling av eksplanterte humane saphenous vener med adventitia stimulering av peptider førte til fosforylering av endotel-reseptorproteiner. 7
På den annen side, har forskere også brukt intraluminal levering av både virale og ikke-virale vektorer i canine 8-10 og kanin 11,12 modeller av venetransplantater. I disse rapportene, ble genoverføring utført ex vivo etter vene innhøsting. Eslami et al. Rapporterte endovaskulær virale gen leverey til carotis årer i situ uten å lage en bypass. 13 Gloverman et al. rapportert intraluminal og adventitia levering av nakent DNA i rotte lårarterie-overflate epigastriet vene fistler. 14 The Mayo gruppen rapporterte adventitia levering av legemidler i mus arteria carotis-halspulsåren fistler. 15,16 Men disse tidligere rapporterte modellene kreves en sutureres anastomose å skape den AVF. I denne rapporten er intraluminal levering av legemidler med samtidig AVF skapningen i mus beskrevet, ved hjelp av en sutur-mindre modell av AVF skapelsen. Ved å bruke denne modifiserte modell murine AVF en enkel metode for intraluminal legemiddelavlevering til vene lem av fistelen kan utføres.
Denne modifikasjon av den murine modellen AVF inkorporerer intraluminal medikamentavgivelse til den venøse endotelet ved tidspunktet for opprettelse AVF. En AVF ble skapt ved punktering av infra-renal aorta med en 25 G nål og forlenge punktering gjennom den motsatte aortaveggen inn i IVC, etterfulgt av injeksjon av medikamentløsning gjennom den samme kanyle. Oppløsningen holdes intra-cava, altså., I veneslangen AVF, inntil de-klem. Det som skiller denne modellen fra andre murine modeller AVF 17-19</su…
The authors have nothing to disclose.
This work was supported in part by the United States Department of Veterans Affairs Biomedical Laboratory Research and Development Program Merit Review Award I01-BX002336, the National Institute of Health grant R56-HL095498, as well as with the resources and the use of facilities at the VA Connecticut Healthcare System, West Haven, CT.
Pluronic F-127 | Sigma-Aldrich | P2443-250G | Used as 30% solution in d-water |
GFP antibody | NOVUS BIOLOGICALS INC | NB100-1770 | |
Ad-CMV-GFP | VECTOR BIOLABS | 1060 | |
0.9% Sodium Chloride Irrigation, USP | Baxter | 2F7122 | |
BD PrecisionGlide Needle 25G x 5/8 | BD | 305122 | |
BD 1ml Syringe Tuberculin Slip Tip | BD | 309659 | |
Scarpel | Surgical Design Inc | 22079707 | |
6-0 ETHILON P-1 11mm 3/8c Reverse Cutting | ETHICON INC | 697G | |
Vevo 770 ultrasound machine | Visualsonics | 20-60 Mhz scan head; RMV-704 | |
Vascular clamp | Roboz Surgical Instrument Co. | RS-5424 | |
Clamp applying forceps | Roboz Surgical Instrument Co. | RS-5410 |