マウス前立腺マイクロ解剖と外科的去勢
Summary
この原稿は、実験用マウスにおける前立腺顕微解剖や去勢手術のためのプロトコルについて説明します。また、これらのプロトコルによって生成される代表的な結果を示しています。最後に、我々は長所と、これらのプロトコルの利用を議論します。
Abstract
Mouse models are used extensively to study prostate cancer and other diseases. The mouse is an excellent model with which to study the prostate and has been used as a surrogate for discoveries in human prostate development and disease. Prostate micro-dissection allows consistent study of lobe-specific prostate anatomy, histology, and cellular characteristics in the absence of contamination of other tissues. Testosterone affects prostate development and disease. Androgen deprivation therapy is a common treatment for prostate cancer patients, but many prostate tumors become castration-resistant. Surgical castration of mouse models allows for the study of castration resistance and other facets of hormonal biology on the prostate. This procedure can be coupled with testosterone reintroduction, or hormonal regeneration of the prostate, a powerful method to study stem cell lineages in the prostate. Together, prostate micro-dissection and surgical castration opens up a multitude of opportunities for robust and consistent research of prostate development and disease. This manuscript describes the protocols for prostate micro-dissection and surgical castration in the laboratory mouse.
Introduction
前立腺は、米国における男性の癌の最も一般的な部位です。ほぼ22万男性毎年前立腺癌と診断され、約27,000人の男性は、自分の病気1に屈するます。男性は米国1における前立腺癌の診断の1 7の生涯リスクを持っています。良性前立腺肥大（BPH）、前立腺の年齢関連非癌性拡大は、80 2以上の男性の80％に影響を及ぼし、また広範な条件である。このように、前立腺はかなりの研究の焦点です。
マウスモデルは、前立腺3の疾患を研究するために広く用いられています。全体的に、マウスの前立腺は、ヒト腺4の優れた代表であるが、マウスとヒトの前立腺解剖学と生理学5の類似点と相違点があります。両種では、前立腺が尿道を取り囲む、膀胱の基部に位置しています。ヒト前立腺腺は、単一のLOです中央、トランジション、周辺機器、および前部線維筋間質：4つのゾーンに分け、こと。前側、腹、および背外側：これとは対照的に、マウスの前立腺は尿道の周りの異なる位置に3対になった葉で構成されています。 1、それは1：マウス6で4細胞レベルでは、主な違いは、ヒトにおける細胞比率を管腔する基底細胞が約1であることです。マウス間質は、ヒトへの相対的なマウスでも異なっている – 筋層は、マウス前立腺における非常に薄いですしながら、人間は、より広範な平滑筋を持っています。マウス前立腺の適切な識別、解剖、およびハンドリングは、マウスの前立腺研究に不可欠です。
ホルモンのレベルが大幅にヒトとマウスの両方で前立腺の開発と恒常性に影響を与えます。エストロゲンは、前立腺の発達7において役割を果たすと思われるが、前立腺における最も重要なホルモンはテストステロンです。テストステロンは腺開発ANのために不可欠ですDのメンテナンス。物理的または化学的のいずれかに続いて去勢、成人前立腺apoptose内腔側細胞の約90％、および腺が収縮します。テストステロンを去勢条件下で個体に再導入された場合、前立腺全容量に自分自身を再生することができます。テストステロンはまた、アンドロゲン除去療法が一般的に使用される治療戦略である理由である、前立腺癌を駆動するように思われます。しかし、多くの前立腺癌は、アンドロゲン除去に耐性になります。また、前立腺癌の治療のためのアンドロゲン枯渇療法を受けている男性は去勢、再生条件のサイクルを受けます。マウスでは、外科的去勢は、テストステロンを再導入することにより、前立腺のホルモン再生と共に、去勢抵抗性前立腺に対するテストステロンの循環の影響を研究すると重要なツールです。
この記事では、我々が議論し、locatすることにより、適切な技術のデモンストレーションを行いますeおよびマイクロ解剖マウスの前立腺を、同様にマウスを去勢外科的します。
Protocol
Representative Results
Discussion
前立腺顕微解剖は、マウス前立腺（ 図1）の葉特有の実験および分析を可能にします。遺伝子操作マウスモデルにおいて、表現型は、他で見られないもので葉に見られます。また、組織学的分析のために、このプロトコルは、純粋な前立腺組織の最大量は節中に存在する他の尿生殖路組織せず、切片と染色することができることを保証します。最後に、単一細胞実験のために、こ…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この原稿の数値の一部は寛大バートO.ウィリアムスの研究室によって提供されました。著者は、国立癌研究所によってサポートされていU54CA143803、CA163124、CA093900、およびCA143055を付与します。
Materials
| Surgical tools | Roboz | Various | |
| Formaldehyde | Sigma | F8775 | |
| OCT medium | VWR | 25608-930 | Must be placed on dry ice to freeze, and stored at -80C |
| PBS | Life Technologies | 10010 | |
| Isoflurane | Johns Hopkins | Also available from vendors online | |
| Cautery Pen | Medline | ESCT002 | |
| Silk suture | AD Surgical | M-S330R19 | |
| Surgical Wound Clips | Roboz | RS-9265 |
References
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