Não restrição EEG radiotelemetria é uma abordagem metodológica valiosa para gravar in vivo eletroencefalogramas de longo prazo de roedores que se movem livremente. Este protocolo detalhado descreve epidural estereotáxico e colocação de eletrodos intracerebral profunda em diferentes regiões do cérebro a fim de obter registos fiáveis de CNS ritmicidade e estágios comportamentais relacionadas com o SNC.
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Artigo de método
Não restrição EEG Radiotelemetria: Epidural e Deep intracerebral estereotáxica EEG Colocação de eletrodos
Neste artigo
Resumo
Resumo
Implantável radiotelemetria EEG é de importância central na caracterização neurológica de modelos de ratinho transgénicos de doenças neuropsiquiátricas e neurodegenerativas, bem como epilepsias. Esta poderosa técnica não só fornecem informações valiosas sobre os mecanismos fisiopatológicos subjacentes, ie., A etiopatogenia de doenças relacionadas com o SNC, ele também facilita o desenvolvimento de nova translação, ou seja., Abordagens terapêuticas. Considerando que as técnicas concorrentes que fazem uso de sistemas de registo utilizados nos revestimentos ou sistemas amarrados sofrer com a sua restrição não fisiológicas ao caráter semi-restrição, gravações de EEG radiotelemetric superar estas desvantagens. Tecnicamente, implantável radiotelemetria EEG permite a medição precisa e altamente sensível, EEGs intracerebrais peridural e profundas sob várias condições fisiológicas e fisiopatológicas. Primeiro, apresentamos um protocolo detalhado de uma para a frente, bem sucedido,técnica rápida e eficiente para gravações peridural (superfície) EEG, resultando em electrocorticograms de alta qualidade. Em segundo lugar, demonstramos como implantar, eletrodos de EEG intracerebrais profundas, por exemplo, no hipocampo (electrohippocampogram). Para ambas as abordagens, um sistema de implante de eletrodos estereotáxica 3D computadorizada é utilizada. O próprio transmissor de radiofrequência é implantado numa bolsa subcutânea em ambos os ratinhos e ratos. Especial atenção tem de ser pago para pré, peri e pós-operatório de tratamento dos animais experimentais. preparo pré-operatório de camundongos e ratos, anestesia adequados, bem como de gestão de tratamento e dor pós-operatória são descritos em detalhes.
Introdução
Radiotelemetria é uma abordagem metodológica mais valioso para medir uma variedade de parâmetros fisiológicos e comportamentais em animais conscientes não restringidos, de vários tamanhos, em particular no contexto do EEG, ECG, EMG, pressão arterial, temperatura corporal ou medições de actividade 1-7. Teoricamente, qualquer espécie pode ser analisada utilizando implantável radiotelemetria EEG de roedores de laboratório tais como ratinhos e ratos a gatos, cães, porcos e primatas 3,8. Mesmo os peixes, répteis e anfíbios estão sujeitas à fiscalização radiotelemetric 9. Ao longo das últimas duas décadas, implantável radiotelemetria EEG pr....
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Protocolo
Declaração de Ética: Todos experimentação animal foi realizada de acordo com as orientações do Conselho local e institucional on Animal Care (Universidade de Bonn, BfArM, LANUV, Alemanha). Além disso, toda a experimentação animal foi realizada em conformidade com a legislação superior, por exemplo., A directiva, de Novembro de 1986 (86/609 / CEE) ou indivíduo legislação 24 regional ou nacional Conselho Comunidades Europeias. esforço específico é feito para minimizar o número de animais utilizados e seu sofrimento.
1. Animais Experimentais
- Seleção de animais experimentais e espécies
- Realizar estudos radioteleme....
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Resultados
Esta seção ilustra exemplos obtidos a partir de, gravações de EEG intracerebrais profundas superfície e. Inicialmente deve-se afirmar que as gravações da linha de base em condições fisiológicas são obrigatórios antes gravações posteriores seguintes por exemplo, o tratamento farmacológico. Tais gravações de linha de base podem fornecer informações valiosas sobre a interdependência funcional da ritmicidade cérebro com diferentes estados comportamentais ou dormir / ritmicidade circ.......
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Discussão
Implantável radiotelemetria EEG é de relevância central, pois é uma técnica não-restrição permitindo que animais experimentais para realizar seu repertório completo do comportamento 1,3. Isto é de grande interesse como a abordagem de telemetria permite não só EEG espontâneo, mas também gravações sob tarefas cognitivas e configurações analíticas circadianos, tais como T-labirinto, labirinto radial, labirinto de água, as tarefas de privação de sono ou sempre que uma gravação de EEG é necessário ou útil durante .......
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Divulgações
Os autores não têm nada a divulgar.
Agradecimentos
Os autores gostariam de agradecer à Dra. Christina Ginkel (Centro Alemão de Doenças Neurodegenerativas, DZNE), Dra. Michaela Möhring (DZNE) e Dr. Robert Stark (DZNE) pela assistência na criação de animais e cuidados com a saúde animal. Este trabalho foi apoiado financeiramente pelo Instituto Federal de Medicamentos e Dispositivos Médicos (Bundesinstitut für Arzneimittel und Medizinprodukte, BfArM) Bonn, Alemanha.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Carprofeno (Rimadyl VET - InjektionA2:D43slö sung) | Pfizer | PZN 0110208 | |
| Microscópio de ampliação cirúrgica binocular de 20 ml | Zeiss Stemi 2000 | 0000001003877, 4355400000000, 0000001063306, 4170530000000, 4170959255000, 4551820000000, 4170959040000, 4170959050000 | |
| Bulldog serrefine | F.S.T.18051-28 | de | 28 mm |
| (Macrolon) | Techniplast | 1264C, 1290D | |
| Fonte de luz fria | Schott KL2500 LCD | 9.705 202 | encomendados na Th.Geyer |
| Aplicadores de ponta de algodão (estéreis) | Carl Roth | EH12.1 | |
| Dexpantenol (Bepanthen Wund- und Heilsalbe) | Bayer | PZN: 1578818 | |
| Cortinas (estéreis) | Hartmann | PZN 0366787 | |
| 70% de etanol | Carl Roth | 9065.5 | |
| Solução de peróxido de hidrogênio a 0,3%/3% Sigma | 95321 | Solução estoque a 30% | |
| Luvas (estéreis) | Unigloves | 1570 | |
| Cimento de ionômero de vidros dentários | KentDental /NORDENTA | 957 321 | |
| Solução de glutaraldeído a 2% | Sigma | G6257 | |
| Graefe Fórceps curvo, serrilhado | FST | 11052-10 | |
| Halsey Micro Needle Holder-Tungsten Carbide | F.S.T.12500-12 | 12.5 cm | |
| Esterilizador de instrumentos cirúrgicos à base de calor | F.S.T. | 18000-50 | |
| Almofada de aquecimento | AEG HK5510 | 520010 | encomendada na myToolStore |
| Broca dental de alta velocidade | Adeor | SI-1708 | |
| Tesoura de íris extra fina | F.S.T.14058-09 | 9 cm | |
| Sistema de estupefacientes por inalação (isoflurano) | Harvard Apparatus GmbH | 34-1352, 10-1340, 34-0422, 34-1041, 34-0401, 34-1067, 72-3044, 34-0426, 34-0387, 34-0415, 69-0230 | |
| Isoflurano | Baxter 250 ml | PZN 6497131 | |
| Cetamina | Pfizer | PZN 07506004 | |
| Lactato Ringer» s solução (estéril) | Braun | L7502 | |
| Lexar-Baby Tesoura-reta, 10 cm | F.S.T.14078-10 | 10 cm | |
| Solução de coloração Nissl | Armin Baack | BAA31712159 | |
| Material de sutura não absorvível 5-0/6-0 (estéril) | SABANA (Sabafil) | N-63123-45 | |
| Covidien (Sofsilk) | S1172, S1173 | ||
| Halsey Porta-agulhas | F.S.T.12001-13 | 13 cm | |
| Almofadas (estéreis) | ReWa Krankenhausbedarf | 2003/01 | |
| 0,9% de solução salina (NaCl, estéril) | Braun | PZN:8609255 | |
| Lâminas de bisturi com cabo (estéril) | propraxis | 2029/10 | |
| Fórceps de padrão padrão | F.S.T.11000-12 | , 11000-14 | 12 cm e 14,5 cm de comprimento |
| Eletrodos de aço e tungstênio revestidos com parileno | FHC Inc., EUA) | UEWLGESEANND | |
| Quadro estereotáxico | Neurostar | 51730M | encomendado em Stoelting |
| (Stereo Drive-New Motorized Stereotaxic) | |||
| Fitas (estéreis) | BSN medical GmbH & Co. KG | 626225 | |
| TA10ETA-F20 | DSI | 270-0042-001X | Transmissor de radiofrequência 3.9 g, 3,9 g, 1,9 ml, faixa de tensão de entrada ± 2,5 mV, largura de banda do canal (B) 1 - 200 Hz, taxa de amostragem nominal (f) 1.000 Hz (f = 5B) faixa de operação de temperatura 34 - 41 ° C vida útil da bateria garantida 4 meses |
| TL11M2-F20EET | DSI | 270-0124-001X Transmissor de | radiofrequência 3,9 g, 1,9 ml, faixa de tensão de entrada ± 1,25 mV, largura de banda do canal (B) 1 - 50 Hz, taxa de amostragem nominal (f) 250 Hz (f = 5B) faixa de operação de temperatura 34 - 41 ° C vida útil da bateria garantida 1,5 meses |
| Pinça de tecido- 1x2 Dentes 12 cm | FST11021-12 12 | cm de comprimento | |
| Tesoura de íris de carboneto de tungstênio | FST14558-11 | 11,5 cm | |
| Vibroslicer 5000 MZ | Microscopia Eletrônica | Ciências 5000-005 | |
| Xilazina (Rompun) | Bayer | PZN: 1320422 |
Referências
- Kramer, K., et al. The use of radiotelemetry in small laboratory animals: recent advances. Contemp Top Lab Anim Sci. 40, 8-16 (2001).
- Kramer, K., et al. The use of telemetry to record electrocardiogram and hea....
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Reimpressões e permissões
