Farelerde Karın Adezyonların Oluşturulması
Summary
Abdominal adhesions that form after surgery are a major cause of pain, infertility, and hospitalization and reoperation for small bowel obstruction. Our surgical procedure for creating abdominal adhesions in mice is a reliable tool to study the mechanisms underlying the formation of adhesions.
Abstract
Abdominal adhesions consist of fibrotic tissue that forms in the peritoneal space in response to an inflammatory insult, typically surgery or intraabdominal infection. The precise mechanisms underlying adhesion formation are poorly understood. Many compounds and physical barriers have been tested for their ability to prevent adhesions after surgery with varying levels of success. The mouse and rat are important models for the study of abdominal adhesions. Several different techniques for the creation of adhesions in the mouse and rat exist in the literature. Here we describe a protocol utilizing abrasion of the cecum with sandpaper and sutures placed in the right abdominal sidewall. The mouse is anesthetized and the abdomen is prepped. A midline laparotomy is created and the cecum is identified. Sandpaper is used to gently abrade the surface of the cecum. Next, several figure-of-eight sutures are placed into the peritoneum of the right abdominal sidewall. The abdominal cavity is irrigated, a small amount of starch is applied, and the incision is closed. We have found that this technique produces the most consistent adhesions with the lowest mortality rate.
Introduction
Karın yapışıklıklar genellikle cerrahi veya karın içi enfeksiyonu takiben, inflamasyon yanıt olarak karın içinde formu skar dokusu bir form vardır. Yapışıklıklar kronik karın ağrısı ve kısırlık başlıca nedenidir ve ince bağırsak tıkanması 1 en sık nedenidir. Yapışıklıklar varlığı, ikinci bir karın operasyonu daha zor performans ve komplikasyonların 2 olasılığını artırır yapar.
Yıllar süren araştırmalara rağmen, yapışıklık oluşumunu altında yatan mekanizmaları yeterince anlaşılamamıştır. Peritoneal bir başlangıç yaralanma ardından barsak ve karın duvarı birlikte, 3 yüzeylerini bağlayan bir pıhtı oluşturan fibrin bakımından zengin sıvının, bir eksudasyon neden olduğu bilinmektedir. Daha sonra, fibroblastlar ve diğer hücreler yapışkan uzaya göç ve bağ dokusunu 4 salgılar. yıllara aylarda yapışma kan damarlarını ve sinirleri geliştirerek olgunlaşır <sup> 5.
Çeşitli ticari ürünler abdominal cerrahi (örneğin, Seprafilm) sonrasında doku kaynaşması oluşumunu azaltmak için tasarlanmış ürünler mevcuttur. Tüm bu ürünlerin mekanik bariyerler olarak hareket ve bağırsak döngüler ve karın duvarı 6,7 arasındaki fiziksel teması engelleyerek yapışma oluşumunu durdurmak. Cerrahi adhezyon bariyeri yapışıklık 8 oluşumunu azaltır kontrollü çalışmadan kanıtlara rağmen, pek çok cerrah anekdotal mekanik bariyer ürünlerin etkinliği ile hayal kırıklığı olmuştur.
Şu anda yapışıklık oluşumunda rol kesin süreçler tam olarak anlaşılamamıştır olduğu gerçeğini yansıtır herhangi bir ilaç tabanlı anti-yapışma tedaviler vardır. Özellikle yapışma oluşumunda yer olayların gelişmiş bir anlayış gerektirir yapışıklıkların oluşumuna katılan hücresel veya moleküler ajanlar hedefleyen bir terapi geliştirilmesi. çeşitli grups yapışıklık oluşumu 9-11 için önemli olabilir moleküler yollar belirledik. Hayvan modelleri yapışıklıklar oluşumunu incelemek için mükemmel bir ortam sağlar. Birçok çalışma, çok sayıda hayvan, özellikle de sıçan ve fare 6,12-14 yapışkanlıktaki cerrahi oluşturulmasını tarif yayınlanmıştır. Fare ve transgenik fareler ve fare tabanlı antikorların geniş yer fibrozis okuyan bizim deneyim göz önüne alındığında, yapışıklıklar çalışma için model olarak fare seçti. Bu yazıda, biz tekrarlanabilir ve güvenilir fare karın yapışıklıklar oluşturmak için geliştirilen tekniği rapor.
Protocol
Representative Results
Discussion
Bu prosedürde kritik adımlar şunlardır: iyice, perforasyon neden karın yanağında sütür yerleştirerek, ve nişasta doğru miktarda uygulamadan çekum aşındırma. Sadece çekum, ya da barsak küçük bir özel bölümüne zımpara kağıdı uygulayın. ince bağırsağın büyük miktarlarda zımpara yaygın kullanımı önemli ileus neden olmaktadır. yüzeyi pürüzlü hale yeterli kuvvetle çekum aşındırmak için özen, ancak duvar gözyaşları o kadar çok değil. Bu dengeyi bulmak biraz zaman alabilir…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
CDM Amerikan Cerrahlar Koleji (AKS) Resident Araştırma Bursu ile desteklenmiştir. MSH California Rejeneratif Tıp Enstitüsü (CIRM) Klinik Fellow eğitim bursu TG2-01159 tarafından desteklenmiştir. MSH, HPL ve MTL Maksillofasiyal Cerrahi American Society (ASMS) / Maksillofasiyal Cerrahlar Vakfı (MSF) Araştırma Bursu Ödülü tarafından desteklendi. HPL NIH hibe R01 GM087609 ve Anthony Shu onuruna Ingrid Lai ve Bill Shu bir hediye ile desteklenmiştir. HPL ve MTL Pediatrik Rejeneratif Tıp Hagey Laboratuvarı ve Meşe Vakfı tarafından desteklenmiştir. MTL Gunn / Olivier Fonu tarafından desteklenmiştir.
Materials
| Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" | Fisher Scientific | 14-206-62 | |
| Polylined Sterile Field, 18" x 24" | Busse Hospital Disposables | 696 | Cut a rectangular hole of the appropriate size |
| Isothesia isoflurane | Henry Schein | 050033 | |
| Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" | Fisher Scientific | 22-415-469 | |
| Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube | Dechra Veterinary Products | NDC 17033-211-38 | |
| Nair depilatory cream | Church & Dwight Co. | 22339-05 | |
| Buprenex buprenorphine 0.3 mg/mL | Reckitt Benckiser Pharmaceuticals Inc. | NDC 12496-0757-5 | |
| 1 cc insulin syringe, 27G | Becton Dickinson | 329412 | |
| Povidone Iodine Prep Solution | Medline | MDS093944H | |
| Webcol alcohol prep swabs | Covidien | 6818 | |
| General-Purpose Labarotory Labeling tape | VWR | 89097-912 | |
| BioGel PI surgical gloves | Mölnlycke Health Care | ALA42675Z | |
| Micro Forceps with teeth | Roboz | RS-5150 | |
| Fine scissors- sharp | Fine Science Tools | 14060-09 | |
| Straight serrated forceps | Fine Science Tools | 11050-10 | |
| Castro-Viejo needle driver | Fine Science Tools | 12565-14 | |
| 100 grit 1/4 sheet sandpaper | ACE Hardware | 1010446 | Cut into strips |
| 4-0 silk suture, 30", SH needle | Ethicon | K831 | |
| 7-0 PDS II absorbable monofilament suture, 30", BV-1 needle | Ethicon | Z135 | Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures. |
| Rice starch | MP Biomedicals | 102955 | |
| 0.9% Sodium Chloride Irrigation | Baxter | BHL2F7121 | Warm to 37° C prior to use |
| 10 mL syringe | Becton Dickinson | 309604 | |
| 6-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", RB-1 taper needle | Ethicon | J212H | |
| 6-0 Ethilon nylon monofilament suture, 18", P-3 needle, | Ethicon | 1698G | |
| Tegaderm Transparent Film Dressing Frame Style, 6 cm x 7 cm | 3M | 1624W | Cut in half lengthwise |
Referências
- Ellis, H., et al. Adhesion-related hospital readmissions after abdominal and pelvic surgery: a retrospective cohort study. Lancet. 353 (9163), 1476-1480 (1999).
- Brochhausen, C., et al. Current strategies and future perspectives for intraperitoneal adhesion prevention. J Gastrointest Surg. 16 (6), 1256-1274 (2012).
- diZerega, G. S., Campeau, J. D. Peritoneal repair and post-surgical adhesion formation. Hum Reprod Update. 7 (6), 547-555 (2001).
- Hellebrekers, B. W., Kooistra, T. Pathogenesis of postoperative adhesion formation. Br J Surg. 98 (11), 1503-1516 (2011).
- Herrick, S. E., et al. Human peritoneal adhesions are highly cellular, innervated, and vascularized. J Pathol. 192 (1), 67-72 (2000).
- Beyene, R. T., Kavalukas, S. L., Barbul, A. Intra-abdominal adhesions: Anatomy, physiology, pathophysiology, and treatment. Curr Probl Surg. 52 (7), 271-319 (2015).
- ten Broek, R. P., et al. Benefits and harms of adhesion barriers for abdominal surgery: a systematic review and meta-analysis. Lancet. 383 (9911), 48-59 (2014).
- Becker, J. M., et al. Prevention of postoperative abdominal adhesions by a sodium hyaluronate-based bioresorbable membrane: a prospective, randomized, double-blind multicenter study. J Am Coll Surg. 183 (4), 297-306 (1996).
- Cassidy, M. R., Sherburne, A. C., Heydrick, S. J., Stucchi, A. F. Combined intraoperative administration of a histone deacetylase inhibitor and a neurokinin-1 receptor antagonist synergistically reduces intra-abdominal adhesion formation in a rat model. Surgery. 157 (3), 581-589 (2015).
- Thaler, K., et al. Coincidence of connective tissue growth factor expression with fibrosis and angiogenesis in postoperative peritoneal adhesion formation. Eur Surg Res. 37 (4), 235-241 (2005).
- Hong, G. S., et al. Effects of macrophage-dependent peroxisome proliferator-activated receptor gamma signalling on adhesion formation after abdominal surgery in an experimental model. Br J Surg. 102 (12), 1506-1516 (2015).
- Whang, S. H., et al. In search of the best peritoneal adhesion model: comparison of different techniques in a rat model. J Surg Res. 167 (2), 245-250 (2011).
- Buckenmaier, C. C., Pusateri, A. E., Harris, R. A., Hetz, S. P. Comparison of antiadhesive treatments using an objective rat model. Am Surg. 65 (3), 274-282 (1999).
- Rajab, T. K., et al. An improved model for the induction of experimental adhesions. J Invest Surg. 23 (1), 35-39 (2010).
