पार्श्व लगातार कपाल खिड़की तैयारी में सक्षम बनाता है<em> Vivo</em> चूहे में दूरस्थ मध्य मस्तिष्क धमनी रोड़ा निम्नलिखित अवलोकन
Summary
एक बाहर का मध्य मस्तिष्क धमनी शाखा (MCAO) के सर्जिकल रोड़ा प्रयोगात्मक स्ट्रोक अनुसंधान के क्षेत्र में एक बार उपयोग किया मॉडल है। यह पांडुलिपि स्थायी MCAO की बुनियादी तकनीक, एक पार्श्व कपाल खिड़की की प्रविष्टि है, जो चूहों में अनुदैर्ध्य intravital माइक्रोस्कोपी के लिए अवसर प्रदान करता है के साथ संयुक्त वर्णन करता है।
Abstract
फोकल मस्तिष्क ischemia (यानी, इस्कीमिक स्ट्रोक) प्रमुख मस्तिष्क की चोट के कारण हो सकता है, neuronal समारोह का एक गंभीर नुकसान के लिए और फलस्वरूप मोटर और संज्ञानात्मक विकलांग की एक मेजबान के लिए अग्रणी। इसकी उच्च व्यापकता एक गंभीर स्वास्थ्य बोझ बन गया है, के रूप में स्ट्रोक लंबी अवधि विकलांगता और मौत के लिए दुनिया भर में 1 की प्रिंसिपल कारणों में से एक है। न्यूरोनल समारोह की वसूली ज्यादातर मामलों में, केवल आंशिक है। अब तक, उपचार के विकल्प बहुत थ्रोम्बोलिसिस 2,3 के लिए संकीर्ण समय खिड़की के कारण सीमित कर रहे हैं, विशेष रूप से। तरीकों का निर्धारण स्ट्रोक से वसूली में तेजी लाने के लिए एक प्रमुख चिकित्सा लक्ष्य रहता है; हालांकि, इस वसूली की प्रक्रिया में अपर्याप्त यंत्रवत अंतर्दृष्टि के द्वारा बाधा उत्पन्न की गई है। प्रायोगिक स्ट्रोक शोधकर्ताओं अक्सर फोकल मस्तिष्क ischemia के कृंतक मॉडल को रोजगार। तीव्र चरण के अलावा, स्ट्रोक अनुसंधान तेजी से मस्तिष्क ischemia निम्नलिखित उप तीव्र और जीर्ण चरण पर ध्यान केंद्रित किया है। स्थायी या Tran अधिकांश स्ट्रोक शोधकर्ताओं लागूचूहों या चूहों में एमसीए की sient रोड़ा। रोगियों में, एमसीए के अवरोध इस्कीमिक स्ट्रोक 4 के सबसे लगातार कारणों में से एक हैं। एमसीए के समीपस्थ रोड़ा रेशा मॉडल का उपयोग इसके अलावा, बाहर का एमसीए की शल्य रोड़ा शायद प्रयोगात्मक स्ट्रोक अनुसंधान 5 में सबसे अक्सर इस्तेमाल किया मॉडल है। एक बाहर का एमसीए शाखा (lenticulo-रेखायुक्त धमनियों की शाखाओं के लिए) की आड़ में आम तौर पर स्ट्रिएटम की जरूरत नहीं पड़ती और मुख्य रूप से नियोकॉर्टेक्स प्रभावित करता है। पोत रोड़ा स्थायी या क्षणिक हो सकता है। लंबी अवधि के परिणाम के संबंध में घाव मात्रा और बहुत कम मृत्यु दर के उच्च reproducibility इस मॉडल का मुख्य लाभ कर रहे हैं। यहाँ, हम कैसे बाण साइनस के लिए एक पुरानी कपाल खिड़की (सीडब्ल्यू) तैयारी पार्श्व प्रदर्शन करने के लिए, और बाद में कैसे एक craniotomy दृष्टिकोण का उपयोग कर खिड़की के नीचे एक बाहर का स्ट्रोक के लिए प्रेरित करने के लिए शल्य चिकित्सा प्रदर्शित करता है। इस दृष्टिकोण के माध्यम से ischemia निम्नलिखित तीव्र और जीर्ण परिवर्तन के अनुक्रमिक इमेजिंग के लिए लागू किया जा सकतामहामारी रोशन, confocal लेजर स्कैनिंग, और दो-फोटॉन intravital माइक्रोस्कोपी।
Introduction
Stroke is among the principal causes of long-term disability and death worldwide1, coming second after coronary heart disease. In addition, stroke is the primary cause of long-term disability, underscoring its tremendous socioeconomic impact6-8. Beyond acute treatment, investigating new approaches and mechanisms to accelerate and enhance recovery after stroke remains a prime medical goal7.
In the last few decades, data from experimental stroke research has contributed substantially to understanding the complex pathophysiological cascades triggered by ischemia9,10. Excitotoxicity, apoptosis, peri-infarct depolarization, and inflammation have been identified as the most relevant mediators of cell death following focal cerebral ischemia. Moreover, using animal models of cerebral ischemia, important concepts, diagnostic modalities, and therapeutic approaches have been developed and validated (e.g., “penumbra” and thrombolysis)11.
The availability of experimental stroke models, combined with non-invasive imaging modalities (e.g., magnetic resonance imaging (MRI), computed tomography, or laser speckle contrast analysis), enables the researcher to investigate hyperacute and chronic pathophysiological changes induced by the ischemic insult in a longitudinal manner12. Along with studying the spatiotemporal profile of the evolving lesion, changes resembling neuronal plasticity can be investigated and correlated to functional outcomes and histological findings. Within the last few years, further methodological advances have been made using the combination of cerebral ischemia models and in vivo microscopy via cranial windows13. These new techniques allow investigators to analyze the neurovascular unit at the cellular and molecular level, with great analytic power in the acute, subacute, and chronic phases following focal cerebral ischemia14. Moreover, in vivo microscopy imaging of microcirculatory dynamics has revealed novel aspects of cerebral microvasculature function and angioarchitecture, with significant pathophysiological relevance15-17.
In this protocol, we present how to perform a chronic CW preparation lateral to the sagittal sinus and how to surgically induce a distal stroke underneath the window. This mouse model can be applied to sequential imaging of acute, subacute, and chronic changes following focal cerebral ischemia via epi-illuminating, confocal laser scanning, and two-photon intravital microscopy.
Protocol
Representative Results
Discussion
स्ट्रोक लंबी अवधि विकलांगता और मौत के लिए दुनिया भर में 1 की प्रिंसिपल कारणों में से एक है। तीव्र उपचार, नए तरीकों और तंत्र की जांच में तेजी लाने और स्ट्रोक के बाद वसूली बढ़ाने के लिए परे एक प्रमुख चि…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
VP is a participant in the Charité Clinical Scientist Program, funded by the Charité – Universitätsmedizin Berlin and the Berlin Institute of Health. TB is an SNSF PostDoc Mobility fellow. The authors receive grant support from EinsteinStiftung/A-2012-153 to PV.
Materials
| Binocular surgical microscope | Zeiss | Stemi 2000 C | |
| Light source for microscope | Zeiss | CL 6000 LED | |
| Heating pad with rectal probe | FST | 21061-10 | |
| Stereotactic frame | Kopf | Model 930 | |
| Anaethesia system for isoflurane | Draeger | ||
| Isoflurane | Abott | ||
| Dumont forceps #5 | FST | 11251-10 | |
| Dumont forceps #7 | FST | 11271-30 | |
| Bipolar Forceps | Erbe | 20195-501 | |
| Bipolar Forceps | Erbe 20195-022 | ||
| Microdrill | FST 18000-17 | ||
| Needle holder | FST | 12010-14 | |
| 5-0 silk suture | Feuerstein, Suprama | ||
| 7-0 silk suture | Feuerstein,Suprama | ||
| 8-0 silk suture | Feuerstein, Suprama | ||
| Veterinary Recovery Chamber | Peco Services | V1200 | |
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