A compreensão dos mecanismos celulares e moleculares da re-endotelização após lesão desnudamento arterial é de suma importância na prevenção de trombose e restenose das artérias. Aqui nós descrevemos um protocolo de lesão desnudamento arterial reprodutível da aorta abdominal infra-renal. O procedimento foi desenvolvido para investigar os mecanismos subjacentes que regulam a regeneração endotelial usando modelos do rato.
intervenções vasculares percutâneos uniformemente resultar em lesões denudação arteriais que, posteriormente, levar a trombose e restenose. Estas complicações podem ser atribuídos a deficiências no re-endotelização dentro das margens da ferida. No entanto, os mecanismos celulares e moleculares da re-endotelização continuam a ser definida. Enquanto vários modelos animais para estudar a re-endotelização após desnudação arterial estão disponíveis, alguns são realizadas no rato por causa das limitações cirúrgicos. Isso prejudica a oportunidade de explorar linhas de camundongos transgênicos e investigar a contribuição de genes específicos para o processo de re-endotelização. Aqui, apresentamos um protocolo passo-a-passo para a criação de um modelo murino altamente reprodutível de lesão desnudamento arterial na aorta abdominal infra usando clampeamento vascular externo. coloração imunocitoquímico de aortas feridos para fibrinogênio e β-catenina demonstrar a exposição de uma uma superfície pró-trombóticod fronteira do endotélio intacto, respectivamente. O método aqui apresentado tem as vantagens de velocidade, excelente taxa de sobrevivência global, e facilidade técnica relativa, a criação de uma ferramenta exclusivamente prático para a imposição de lesão desnudação arterial em modelos de ratinho transgénicos. Usando este método, os investigadores podem elucidar os mecanismos de re-endotelização em condições normais ou patológicas.
Trombose e restenose são graves complicações precoces e tardias em pacientes que se submetem a intervenções vasculares percutâneos, como a angioplastia com balão endovascular e implante de stent 1,2. Várias estratégias têm sido empregadas para tratar estas complicações, terapia antiplaquetária dupla particular e stents farmacológicos. No entanto, pouca atenção tem sido colocada sobre a causa subjacente de trombose e restenose, ou seja, a perda de cobertura de célula endotelial (desnudação). lesão desnudamento é uma consequência inevitável de procedimentos de intervenção devido a trauma mecânico à parede do vaso sanguíneo. Este trauma mecânico pode resultar em danos e a remoção da camada protectora do endotélio e a exposição da membrana basal e do músculo liso vascular ao sangue que circula 3. A perda de células endoteliais nessas áreas cria um ambiente pró-trombóticos e pró-inflamatório que não apenas promove a aderência de plaquetas e trombose subsequente, mas umlso estimula a migração e proliferação de células musculares lisas vasculares, resultando no espessamento da neointima e reestenose 4. Estas complicações e suas terapias associadas, levar a morbidade significativa, doença isquêmica mais notavelmente recorrentes e eventos hemorrágicos que impactam a saúde humana.
Re-endotelização da lesão desnudada das margens da ferida é de suma importância na prevenção de trombose e reestenose 5. Os resultados da autópsia e modelos animais têm efetivamente demonstrado taxas reduzidas de trombose com a cobertura de stent struts 6,7. Os stents farmacológicos, concebido para diminuir as taxas de reestenose pela inibição da proliferação do músculo liso e hiperplasia neointimal, resultar em deficiências significativas no arterial re-endotelização e aumento das taxas de final de trombose 3. Infelizmente, a compreensão dos mecanismos de re-endotelização tem sido um processo lento, em grande parte limitada pela falta de APmodelos animais propriate 8.
Vários modelos animais para compreender os papéis das células endoteliais e células de músculo liso vascular após lesão arterial, foram criados 7,9,10. O modelo de lesão por balão da artéria carótida de rato é o melhor caracterizado e foi utilizado para estudar os efeitos da lesão desnudação no nível bruto, celular e molecular 11. No entanto, um modelo murino altamente reprodutível de lesão desnudamento arterial com taxas de sobrevivência excelentes está faltando e muito necessário para tirar proveito de múltiplas linhagens transgênicas disponíveis para melhor elucidar a regeneração vascular em várias configurações.
Este manuscrito apresenta um modelo murino de lesão desnudação arterial que é reprodutível e de simples execução. A abordagem mostrou morbidade e mortalidade mínima em várias linhagens transgênicas. Devido ao seu largo número de linhas de ratinhos geneticamente modificados, este modelo pode ser usado paraelucidar os mecanismos moleculares subjacentes à re-endotelização após a lesão desnudamento.
Lesão desnudamento arterial devido a intervenções percutâneas, como a angioplastia com balão e implante de stent vascular, resultar em trombose vascular precoce e tardia e reestenose e contribui para eventos isquêmicos recorrentes 3,12. Curiosamente, pinçamento vascular cirúrgica também foi implicado como causa de desnudamento arterial, expandindo o escopo do problema para pacientes submetidos a qualquer procedimento vascular, seja percutânea ou aberta 13. Enquanto prejudicada re-endoteli…
The authors have nothing to disclose.
Este trabalho foi apoiado por subsídios da Eli e Edythe Broad Centro de Medicina Regenerativa e Stem Cell Research no Programa de Formação de UCLA para ASS e AIM, Philip J. Whitcome Fellowship à AIM, e os Institutos Nacionais de Saúde (HL130290) para MLIA.
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