ADSC ورقة زرع منع التقييد بعد موسع المريء بالمنظار تحت المخاطية تشريح
Summary
تقارير هذه الدراسة وسيلة ناجحة من endoscopical الدهنية الخلايا اللحمية المشتقة من الأنسجة (ADSC) -sheet زرع لمنع تضيق المريء بعد تشريح الموسع بالمنظار تحت المخاطية (ESD) في نموذج الخنازير.
Abstract
في السنوات الماضية، وقد حفزت بناء ورقة خلية باهتمام واسع في الطب التجديدي، وخاصة بالنسبة للإجراءات الجراحة الترميمية. وقد أدى تطوير تكنولوجيات متنوعة تجمع بين خلايا انسجة المشتقة من الأنسجة الدهنية (ADSCs) مع مختلف المواد الحيوية لبناء أنواع عديدة من بدائل هندسة الأنسجة، مثل العظام والغضاريف، والأنسجة الدهنية من القوارض، والخنازير، أو ADSCs الإنسان. تمديد المريء تشريح تحت المخاطية بالمنظار (ESD) هو المسؤول عن تشكيل تضيق المريء. يبقى منع تضيق صعبة، مع عدم وجود علاجات فعالة المتاحة. وذكرت دراسات سابقة فعالية زرع خلية ورقة الغشاء المخاطي في نموذج الكلاب والبشر. وتعزى ADSCs خصائص مضادة للالتهابات، وآثار التعديل المناعي المحلية، تحريض اتساع الأوعية الدموية، وقدرات التمايز في الوسيطة والأنساب غير الوسيطة. توضح هذه الدراسة الأصلية وهيئة تنظيم الاتصالات بالمنظارnsplantation لبناء الأنسجة المهندسة ADSC لمنع تضيق المريء في نموذج الخنازير. وتألفت لبناء ADSC من ورقتين ADSC الصنعية الطبقات على بعضها البعض على غشاء دعامة الورق. وصفت وADSCs مع fluorophore PKH67 للسماح القائم على التحقيق ليزر متحد البؤر endomicroscopy الرصد (pCLE). في يوم من زرع، تم إجراء 5 سم، والبيئة والتنمية المستدامة نصفي كفافي المعروف للحث على تضيق المريء. تم على الفور زرع الحيوانات بالتنظير مع 4 بنيات ADSC. تم الحصول على التصاق كامل للبنيات ADSC بعد 10 دقيقة من تطبيق لطيف. تمت التضحية الحيوانات في يوم 28. تم زرع جميع الحيوانات بنجاح. وأكد زرع في يوم 3 مع تقييم pCLE إيجابي. بالمقارنة مع الحيوانات المزروعة، وضعت الحيوانات السيطرة قيود شديدة، مع تطور كبير أنسجة متليفة، مشكلة الهضمية أكثر تواترا، وتخفيض زيادة الوزن. في نموذجنا، وزرع allogeniج ADSCs، نظمت في أوراق خلية مزدوجة، بعد البيئة والتنمية المستدامة طويلة كانت ناجحة وترتبط بقوة مع انخفاض سعر تضيق المريء.
Introduction
لقد تغيرت إدارة أورام المريء سطحية مع تطور تقنيات المناظير الجديدة. في الوقت الحاضر، استئصال بالمنظار هو علاج الخط الأول. في الواقع، ويرتبط ذلك مع انخفاض معدلات الاعتلال والوفيات من الجراحة مع نتائج الأورام متساوية 1، 2، 3. استئصال بالمنظار المخاطية (EMR) وبتر تحت المخاطية بالمنظار (ESD) هي أكثر التقنيات المستخدمة على نطاق واسع. في حالة وجود ورم سطحي ممتد، ويفضل البيئة والتنمية المستدامة. مقارنة إقليم شرق المتوسط، البيئة والتنمية المستدامة تسمح أون resectioning كتلة، بغض النظر عن حجم الآفة والشكل 4، 5، 6. تأخر المضاعفات الرئيسية من أجل التنمية المستدامة هي تشكيل تضيق المريء، والذي يحدث عادة بين أسبوع وأسبوعين بعد استئصال. وقد أظهرت الدراسات التي نشرت مؤخرا ويرتبط ذلك تشكيل تضيق لحجم بتر. توصي جمعية بالمنظار اليابانية تجنب البيئة والتنمية المستدامة أحجام أكبر من ¾ من محيط المريء لأنها ترتبط مع تطور تضيق في أكثر من 90٪ من الحالات وتكون مسئولا عن مشاكل التغذية الحادة والتدهور الكبير في نوعية الحياة.
منع تضيق المريء لا يزال تحديا. الآليات التي تشارك في تشكيل تضيق لا يعلمها إلا جزئيا. تضيق تشكيلات يبدو أن تنجم عن رابطة آليتين مختلفتين: (1) الموالية للالتهابات التوظيف الخلوي و (2) تطوير التليف المفرطة 7. وقد اقترحت العديد من العلاجات الوقائية. ومع ذلك، وكانت النتائج غير مرضية، دون فائدة تذكر وآثار جانبية خطيرة 8 و 9. مؤخرا، قام فريق الياباني، Ohki وآخرون. واقترح لزرع خلية ورقة طبقة واحدة من الخلايا المخاطية الفموية ذاتي في esophندبة ageal. تم إجراء زرع مباشرة بعد ESD 10 و 11. أنها أثبتت فعالية هذا النهج المبتكر، لأول مرة في نموذج الكلاب ثم في المرضى.
الدهنية الخلايا اللحمية المشتقة من الأنسجة (ADSCs) واعدة في مجال الطب التجديدي. وقد أظهرت تطبيقها في العديد من المجالات نتائج مثيرة للاهتمام، وخاصة في عملية التئام الجروح. يقدم العلاج ADSC العديد من المزايا، لأن خلايا معزولة بسهولة وترتبط مع خصائص مضادة للالتهابات، والآثار المناعة المحلية، تحريض اتساع الأوعية الدموية، وقدرات التمايز في الوسيطة والأنساب غير الوسيطة 12 و 13 و 14.
في دراسة سابقة، أظهر فريقنا فعالية مزدوجة زرع بالمنظار ورقة ADSC لسابق تضيق المريءention بعد البيئة والتنمية المستدامة طويلة في نموذج الخنازير 15. في هذه المقالة، يتم عرض تقارير البناء ADSC ورقة وتقنية زرع endoscopical.
Protocol
Representative Results
Discussion
في هذا النموذج خنزير، كان زرع ورقة ADSC ناجحة من الناحية الفنية، ويسمح في الجسم الحي تقييم pCLE لرصد خلية engraftment. أظهرت التقييمات السريرية، endoscopical والإشعاعية، والنسيجية فعالية ورقة ADSC بالمنظار في منع تضيق المريء بعد البيئة والتنمية المستدامة طويلة.
<p class="jove_content" s…Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
This study was supported and funded by the Avenir Foundation (Fondation de l’Avenir, 255 rue de Vaugirard, 75719 Paris cedex 15, Paris, France). This study would never have been conducted without the precious help of the veterinary team of the Laboratory of Biosurgical Research from the Alain Carpentier Foundation.
Materials
| Transparent endoscopic cap Q180 compatible | Olympus Optical Co | ||
| GIF-Q180 gastroscope | Olympus Optical Co | ||
| Videoscope System Exera II | Olympus Optical Co | ||
| Injection needle 18 G | Olympus Optical Co | ||
| Electrosurgery unit ERBE ICC 350 | ERBE Technology | ||
| Indigo carmin 1% | Life | ||
| Endoscopic hybrid knife | Life | ||
| Minisonde Z pCLE green probe | Mauna Kea Technology | You must learn how tu use the probe. The manipulation could be difficult | |
| Fetal bovine serum | Sigma Aldrich | 12105C | |
| Trypsin | Sigma Aldrich | T146 | |
| Alpha minimum essential medium | Thermo Fisher | 22561-021 | |
| Phosphate-Buffered Salines | Thermo Fisher | 10010-023 | |
| PKH67 dye kit | Sigma Aldrich | Mini67-KT | |
| 12-well temperature responsive cell culture dish | Upcell Thermo Scientific | 174900 | Feel the weel with 4 mL standard medium culture 30 minutes before seeding cells |
| Esomeprazole 40 mg | Biogaran | ||
| Moprhine sulfate 50 mg/ mL | Lavoisier | ||
| Amoxicilline 1 g | Biogaran | ||
| Ketamine 250 mg/5 mL | Panpharma | ||
| Propofol 10 mg/ mL | Fresenius | ||
| Hydrophobic paper | Carrefour |
Referências
- Ono, S., Fujishiro, M., et al. Long-term outcomes of endoscopic submucosal dissection for superficial esophageal squamous cell neoplasms. Gastrointestinal endoscopy. 70 (5), 860-866 (2009).
- Pech, O., May, A., et al. Long-term efficacy and safety of endoscopic resection for patients with mucosal adenocarcinoma of the esophagus. Gastroenterology. 146 (3), 652-660 (2014).
- Yahagi, N. Is esophageal endoscopic submucosal dissection an extreme treatment modality, or can it be a standard treatment modality. Gastrointestinal Endoscopy. 68 (6), 1073-1075 (2008).
- Rösch, T., Sarbia, M., et al. Attempted endoscopic en bloc resection of mucosal and submucosal tumors using insulated-tip knives: a pilot series. Endoscopy. 36 (9), 788-801 (2004).
- Chennat, J., Ross, A. S., et al. Advanced pathology under squamous epithelium on initial EMR specimens in patients with Barrett’s esophagus and high-grade dysplasia or intramucosal carcinoma: implications for surveillance and endotherapy management. Gastrointestinal endoscopy. 70 (3), 417-421 (2009).
- Oyama, T., Tomori, A., et al. Endoscopic submucosal dissection of early esophageal cancer. Clinical gastroenterology and hepatology: the official clinical practice journal of the American Gastroenterological Association. 3 (7), 67-70 (2005).
- Werner, S., Krieg, T., Smola, H. Keratinocyte-fibroblast interactions in wound healing. The Journal of Investigative Dermatology. 127 (5), 998-1008 (2007).
- Yamaguchi, N., Isomoto, H., et al. Effect of oral prednisolone on esophageal stricture after complete circular endoscopic submucosal dissection for superficial esophageal squamous cell carcinoma: a case report. Digestion. 83 (4), 291-295 (2011).
- Hanaoka, N., Ishihara, R., et al. Intralesional steroid injection to prevent stricture after endoscopic submucosal dissection for esophageal cancer: a controlled prospective study. Endoscopy. 44 (11), 1007-1011 (2012).
- Ohki, T., Yamato, M., et al. Treatment of oesophageal ulcerations using endoscopic transplantation of tissue-engineered autologous oral mucosal epithelial cell sheets in a canine model. Gut. 55 (12), 1704-1710 (2006).
- Ohki, T., Yamato, M., et al. Prevention of esophageal stricture after endoscopic submucosal dissection using tissue-engineered cell sheets. Gastroenterology. 143 (3), 582-588 (2012).
- García-Gómez, I., Elvira, G., et al. Mesenchymal stem cells: biological properties and clinical applications. Expert opinion on biological therapy. 10 (10), 1453-1468 (2010).
- Jorgensen, C., Noël, D. Mesenchymal stem cells in osteoarticular diseases. Regenerative Medicine. 6 (6), 44-51 (2011).
- Antonic, A., Sena, E. S., et al. Stem cell transplantation in traumatic spinal cord injury: a systematic review and meta-analysis of animal studies. PLoS biology. 11 (12), 1001738 (2013).
- Perrod, G., Rahmi, G., et al. Cell Sheet Transplantation for Esophageal Stricture Prevention after Endoscopic Submucosal Dissection in a Porcine Model. PLOS ONE. 11 (3), 0148249 (2016).
- Mellow, M. H., Pinkas, H. Endoscopic laser therapy for malignancies affecting the esophagus and gastroesophageal junction. Analysis of technical and functional efficacy. Archives of Internal Medicine. 145 (8), 1443-1446 (1985).
- N.A.S.C.E.T. Beneficial effect of carotid endarterectomy in symptomatic patients with high-grade carotid stenosis. The New England Journal of Medicine. 325 (7), 445-453 (1991).
- . Randomised trial of endarterectomy for recently symptomatic carotid stenosis: final results of the MRC European Carotid Surgery Trial (ECST). Lancet. 351 (9113), 1379-1387 (1998).
- Kanai, N., Yamato, M., Ohki, T., Yamamoto, M., Okano, T. Fabricated autologous epidermal cell sheets for the prevention of esophageal stricture after circumferential ESD in a porcine model. Gastrointestinal Endoscopy. 76 (4), 873-881 (2012).
- Aggarwal, S., Pittenger, M. F. Human mesenchymal stem cells modulate allogeneic immune cell responses. Blood. 105 (4), 1815-1822 (2005).
- Maeda, M., Kanai, N., et al. Endoscopic cell sheet transplantation device developed by using a 3-dimensional printer and its feasibility evaluation in a porcine model. Gastrointestinal Endoscopy. , (2015).
- Haraguchi, Y., Shimizu, T., et al. Fabrication of functional three-dimensional tissues by stacking cell sheets in vitro. Nature Protocols. 7 (5), 850-858 (2012).
- Nishida, K., Yamato, M., et al. Corneal reconstruction with tissue-engineered cell sheets composed of autologous oral mucosal epithelium. The New England Journal of Medicine. 351 (12), 1187-1196 (2004).
- Napoléon, B., Lemaistre, A. -. I., et al. A novel approach to the diagnosis of pancreatic serous cystadenoma: needle-based confocal laser endomicroscopy. Endoscopy. 47 (1), 26-32 (2015).
- Gabbani, T., Manetti, N., Bonanomi, A. G., Annese, A. L., Annese, V. New endoscopic imaging techniques in surveillance of inflammatory bowel disease. World Journal of Gastrointestinal Endoscopy. 7 (3), 230-236 (2015).
- Nagyova, M., Slovinska, L., et al. A comparative study of PKH67, DiI, and BrdU labeling techniques for tracing rat mesenchymal stem cells. In Vitro Cellular & Developmental Biology. Animal. 50 (7), 656-663 (2014).
- Jain, D., Singhal, S. Esophageal Stricture Prevention after Endoscopic Submucosal Dissection. Clinical Endoscopy. 49 (3), 241-256 (2016).
- Lua, G. W., Tang, J., Liu, F., Li, Z. S. Prevention of Esophageal Strictures After Endoscopic Submucosal Dissection: A Promising Therapy Using Carboxymethyl Cellulose Sheets. Digestive Diseases and Sciences. 61 (6), 1763-1769 (2016).
- Sakaguchi, Y., Tsuji, Y., et al. Triamcinolone Injection and Shielding with Polyglycolic Acid Sheets and Fibrin Glue for Postoperative Stricture Prevention after Esophageal Endoscopic Resection: A Pilot Study. The American Journal of Gastroenterology. 111 (4), 581-583 (2016).
- Sakurai, T., Miyazaki, S., Miyata, G., Satomi, S., Hori, Y. Autologous buccal keratinocyte implantation for the prevention of stenosis after EMR of the esophagus. Gastrointestinal endoscopy. 66 (1), 167-173 (2007).
- Nieponice, A., McGrath, K., et al. An extracellular matrix scaffold for esophageal stricture prevention after circumferential EMR. Gastrointestinal Endoscopy. 69 (2), 289-296 (2009).
- Honda, M., Hori, Y., et al. Use of adipose tissue-derived stromal cells for prevention of esophageal stricture after circumferential EMR in a canine model. Gastrointestinal endoscopy. 73 (4), 777-784 (2011).
- Barret, M., Pratico, C. A., et al. Amniotic membrane grafts for the prevention of esophageal stricture after circumferential endoscopic submucosal dissection. PloS One. 9 (7), 100236 (2014).
