Summary

ADSC 매 이식은 확장 식도 내시경 점막하 절개 후 협착을 방지하는

Published: February 10, 2017
doi:

Summary

이 연구는 내시경 지방 조직 유래 기질 세포 (ADSC)의 성공적인 방법을보고하는 돼지 모델의 확장 내시경 점막하 절제술 (ESD) 후 식도 협착 방지를위한 – 시트 이식.

Abstract

지난 몇 년 동안, 세포 시트의 구조는 특히 재건 수술 절차, 재생 의학에서 폭 넓은 관심을 촉발하고있다. 다양한 생체 물질과 지방 조직 유래 기질 세포 (ADSCs)를 조합 한 다양한 기술의 개발은 뼈, 연골, 그리고 쥐, 돼지, 인간 ADSCs에서 지방 조직과 같은 조직 공학적 대체, 수많은 종류의 건설을 주도하고있다. 확장 식도 내시경 점막하 절제술 (ESD)은 식도 협착 형성 할 책임이있다. 협착 방지를 사용할 수없는 효율적인 치료와 함께 도전 남아있다. 이전의 연구는 송곳니 모델과 인간 점막 세포 시트를 이식 효과를보고 하였다. ADSCs는 중간 엽과 비 중간 엽 계통에 항 염증, 지방의 면역 변조 효과, 혈관 신생 유도 및 분화 능력을 기인한다. 이 원래의 연구는 내시경 TRA 설명ADSC의 조직 공학적 구조의 nsplantation은 돼지 모델에서 식도 협착을 방지합니다. ADSC 구조는 종이지지 막 서로에 계층이 동종 ADSC 시트로 구성되었다. ADSCs는 프로브 기반 공 초점 레이저 endomicroscopy (pCLE) 모니터링을 허용하는 PKH67의 형광으로 표지 하였다. 이식 당일 5 cm 식도 협착을 유발하는 것으로 알려져 헤미 둘레 ESD 수행 하였다. 동물은 즉시 내시경 4 ADSC 구조로 이식되었다. ADSC 구조의 완전한 접착 부드러운 적용 10 분 후에 얻어졌다. 동물은 모든 동물이 성공적으로 이식 날 (28)에 희생되었다. 이식은 양의 pCLE 평가와 함께 3 일에 확인되었다. 이식 된 동물에 비해 대조군의 주요 섬유 성 조직 개발 빈번한 소화 문제, 및 감소 된 체중 증가와 심한 협착을 개발 하였다. allogeni 우리의 모델에서, 이식C 이중 세포 시트로 구성 ADSCs는 확장 된 ESD 후 성공적으로 강하게 하부 식도 협착 속도와 관련된했다.

Introduction

피상적 식도 종양 관리 새로운 내시경 기술의 발달로 변경되었다. 요즘, 내시경 절제술은 제 치료제이다. 사실상, 종양은 동일한 결과 1, 2, 3과 수술보다 낮은 이환율 및 사망률과 연관된다. 내시경 점막 절제술 (EMR) 및 내시경 적 점막하 절제술 (ESD)는 가장 널리 사용되는 기술이다. 확장 된 표면 종양의 경우, ESD가 바람직하다. EMR에 비해 ESD 관계없이 병변의 크기, 일괄 resectioning 욕실 수, 4, 5, 6을 형성. ESD의 주요 지연 합병증은 일반적으로 절제 후 1 2 주 사이에 발생하는 식도 협착 형성된다. 최근 발표 된 연구는 협착 형성이 상관된다 보여절제의 크기입니다. 일본 내시경 학회 ESD들이 사건의 90 % 이상에 협착 개발과 관련된 심각한 공급 문제와 삶의 질에 큰 저하에 대한 책임 때문에 식도 주위의 ¾보다 큰 크기를 피하는 것이 좋습니다.

식도 협착의 예방 도전 남아 있습니다. 협착 형성에 관여하는 메커니즘은 부분적으로 만 알려져있다. (1) 염증성 세포 모집 및 (2) 과도한 섬유화 개발 7 : 형성을 협착은 두 개의 서로 다른 메커니즘의 관계에서 발생할 것으로 보인다. 몇 가지 예방 치료가 제안되었다. 그러나, 결과는 약간의 이익과 심각한 부작용이 8, 9, 불만족했다. 최근, 일본 팀, Ohki 등. 상기 esoph로자가 구강 점막 세포의 단층 세포 시트를 이식하는 것이 제안ageal 흉터. 이식 ESD (10), (11) 직후에 수행 하였다. 그들은 제 개과 모델 후 환자에서이 혁신적인 접근법의 효과를 입증 하였다.

지방 조직 유래 기질 세포 (ADSCs)는 재생 의학에 약속되어있다. 여러 분야에서의 응용 프로그램은 특히 상처 치유 과정에서 흥미로운 결과를 보여 주었다. 세포가 쉽게 분리되어 및 간엽 아닌 중간 엽 계통 (12, 13), (14)에 항염 로컬 면역 조절 효과, 혈관 신생을 유도하고, 분화 능력과 연관되기 때문에 ADSC 요법은 여러 장점을 제공한다.

이전 연구에서 우리 팀은 식도 협착 이전에 대한 이중 ADSC 장 내시경 이식의 효과를 입증돼지 모델 (15)의 확장 된 ESD 후 ention. 이 글에서, ADSC 장 건설 및 내시경 이식 기술의 보고서가 제공됩니다.

Protocol

모든 동물은 동물 연구 윤리위원회 (농업의 프랑스 교육부의 지침)에 따라 처리 하였다. 이 프로토콜은 파리 데카르트 대학에서 동물 실험과 승인 지역 윤리위원회의 승인을받은 (등록 번호 MESR 2035.02을, 학부 의학 파리 데카르트, 파리, 프랑스의). 1. ADSC 문화 및 라벨링 민간 기관에서 확인 ADSCs를 얻습니다. 37 ° C, 5 %, 10 % 태아 송아지 혈청과 1 % 항생제 (페니실린과 스트렙토 마이신)?…

Representative Results

ADSCs 및 ADSC 시트를 획득하는 절차의 문화는도 1에 도시된다. 도 2는 용지지지 막상에서 서로 적층 된 두 ADSC 시트로 이루어지는 그래프트의 구조를 나타낸다. ADSCs는 이전에 pCLE와 생체 이식 모니터링 수 있도록 PKH67의 형광으로 표지 하였다. 그림 3은 5 cm 및 헤미 – 원주 식도 흉터의 결과로, 확장 된 식도 내시경 점막하 박?…

Discussion

이 돼지 모델에서, ADSC 시트 이식 기술적 성공 및 생체 pCLE 평가 셀 생착 모니터링시켰다. 임상 내시경, 방사선 학적, 조직 학적 평가는 확장 된 ESD 후 식도 협착 예방에 내시경 ADSC 시트의 효과를 보여 주었다.

인디고 카민 염료를 함유하는 시트 ADSC 글리세롤 용액의 내시경 이식 재생 의학에 혁신적인 방법이다. Ohki 등. 제 내시경 이식 절차를 설명했다. 이들 연구…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

This study was supported and funded by the Avenir Foundation (Fondation de l’Avenir, 255 rue de Vaugirard, 75719 Paris cedex 15, Paris, France). This study would never have been conducted without the precious help of the veterinary team of the Laboratory of Biosurgical Research from the Alain Carpentier Foundation.

Materials

Transparent endoscopic cap Q180 compatible Olympus Optical Co
GIF-Q180 gastroscope  Olympus Optical Co
Videoscope System Exera II  Olympus Optical Co
Injection needle 18 G Olympus Optical Co
Electrosurgery unit ERBE ICC 350  ERBE Technology
Indigo carmin 1% Life
Endoscopic hybrid knife Life
Minisonde Z pCLE green probe Mauna Kea Technology You must learn how tu use the probe. The manipulation could be difficult
Fetal bovine serum Sigma Aldrich 12105C
Trypsin Sigma Aldrich T146
Alpha minimum essential medium Thermo Fisher 22561-021
Phosphate-Buffered Salines Thermo Fisher 10010-023
PKH67 dye kit Sigma Aldrich Mini67-KT
12-well temperature responsive cell culture dish Upcell Thermo Scientific 174900 Feel the weel with 4 mL standard medium culture 30 minutes before seeding cells
Esomeprazole 40 mg  Biogaran
Moprhine sulfate 50 mg/ mL Lavoisier
Amoxicilline 1 g Biogaran
Ketamine 250 mg/5 mL Panpharma
Propofol 10 mg/ mL Fresenius
Hydrophobic paper Carrefour

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Citar este artigo
Perrod, G., Pidial, L., Camilleri, S., Bellucci, A., Casanova, A., Viel, T., Tavitian, B., Cellier, C., Clément, O., Rahmi, G. ADSC-sheet Transplantation to Prevent Stricture after Extended Esophageal Endoscopic Submucosal Dissection. J. Vis. Exp. (120), e55018, doi:10.3791/55018 (2017).

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