Summary

Vurdere Spatial læring og hukommelse i små Squamate Krypdyr

Published: January 03, 2017
doi:

Summary

This paper describes a modification of the Barnes maze, a standard rodent paradigm used to assess spatial memory and learning, for use in small squamate reptiles.

Abstract

Klinisk forskning har leveraged en rekke paradigmer for å vurdere kognitiv svikt, ofte rettet mot romlig læring og hukommelse evner. Men interessen for de kognitive prosesser av nonmodel arter, typisk innenfor en økologisk sammenheng, har også blitt en voksende fagområde. Spesielt er interessen for de kognitive prosesser i reptiler vokser selv om eksperimentelle studier på krypdyr kognisjon er sparsommelig. De få krypdyr studier som har eksperimentelt testet for romlig læring og hukommelse har brukt gnager paradigmer modifisert for bruk i reptiler. Men økologisk viktige aspekter av fysiologi og atferd i denne taksonomisk gruppe må tas i betraktning når du tester for romlig basert kognisjon. Her beskriver vi modifikasjoner av det tørre land Barnes labyrint og tilhørende testing protokoll som kan forbedre ytelsen når sondering for romlig læring og hukommelse evne i små squamate reptiler. Den beskrevne paradigmet og proprosedyrer ble brukt med hell med mannlige side blotched øgler (Uta stansburiana), som viser at romlig læring og hukommelse kan bli vurdert i denne taksonomisk gruppe med en økologisk relevant apparat og protokoll.

Introduction

Mange av nevrodegenerative sykdommer så som Alzheimers til stede med en progressiv nedgang i kognitive evner, vanligvis sammenfallende med degradering av hjernen 1-4. For å teste for påvirkning av hjerneskade og degradering på kognitive prosesser, har klinisk forskning utnyttes fordelene med modellgnagerarter og standardisering av testapparatet og protokoll. Spesielt har romlige læring og hukommelse prosesser blitt vurdert gjennom flere standard paradigmer som Morris vannet labyrint, Barnes labyrint, og radial arm labyrint (for en omfattende gjennomgang av disse og andre paradigmer, se 5,6). Den rike historien til disse romlige læring og hukommelse paradigmer har vist seg ganske vellykket, slik at forskerne å forstå mange av de fasetter og nyanser av forholdet mellom menneskets hukommelse, hjernens funksjon, og sykdom.

Mens vurdering av kognitive prosesser har blitt undersøkt i klinisk forskning for å sluttee litt tid, forskning rettet mot de kognitive evnene til nonmodel arter er relativt ny. Forskere som studerer kognisjon i nonmodel arter er vanligvis interessert i økologisk og evolusjonær relevansen av kognitive prosesser, spesielt i sammenheng med overlevelse og reproduksjon. Noen studier i reptiler har antydet at avanserte kognitive evner, spesielt romlig minne, kan ligge til grunn for noen atferd, særlig de som gjelder navigering og orientering. Men mens mange studier har vist at reptiler kan reorientere etter forskyvning 7,8, den kognitive mekanismene bak reorientering oppførsel har ennå ikke blitt ertet hverandre. På grunn av dette, har noen studier forsøkt å eksperimentelt vurdere betydningen av romlig læring og hukommelse under navigering 9-17. Metodikken i disse studiene er hovedsakelig modellert etter gnager paradigmer og protokoller, noen ganger modifisert for bruk i reptiler, men disse studienehar hatt variabel suksess i å vurdere romlig minne. Noen studier har vist romlig læring og hukommelse i enkelte arter 11-17 mens andre studier fant ingen bevis for en slik 9,10. Dermed er rollen eller eksistensen av romlig læring og hukommelse under navigering i reptiler fortsatt uklart.

Et problem som kan være problematisk når eksperimentelt vurdere romlig læring og hukommelse i reptiler er den økologiske relevansen av oppgaven. Reptiler er en spesiell taksonomisk gruppe ganske forskjellig fra gnagere, viser stor variasjon i økologi, atferd og fysiologi. Forskjeller i atferd over krypdyr arter kunne påvirke vurderingen av romlige kognitive evner, spesielt hvis paradigmet brukes ikke tappe inn i en naturlig atferd. For eksempel, i en art som vanligvis søker tilflukt i små sprekker, romlige evner kan lett bli vurdert ved hjelp av en Barnes labyrint mens denne labyrinten ikke kan være det ideelle paradigmet valgi en art som vanligvis forblir urørlig. Likeledes er de fleste squamate reptiler er ikke vann og dermed Morris vannlabyrint kan ikke være et egnet valg for testing romlig læring og hukommelse (men se 15); kan imidlertid denne labyrinten være et ideelt valg for testing romlige evner i skilpadder 16. Til slutt må fysiologi av denne gruppen gjøres rede for, som reptiler er ectothermic og riktig temperatur vedlikehold, spesielt av underlaget, må vurderes i løpet av testprosedyren.

Protokollen og paradigmet som presenteres her ble brukt til å undersøke for romlig læring og hukommelse hos voksne side blotched øgler (Uta stansburiana) 13, en liten øgle som vanligvis flykter fra rovdyr i små sprekker i bergarter 18. Å vite dette aspektet av naturhistorie og oppførsel av artene, brukte vi en modifikasjon av den tradisjonelle Barnes labyrinten for å teste for romlig læring og hukommelse. Barnes labyrinten isa tørt-land labyrint og vanligvis brukt for å teste romlig erkjennelse i gnagermodeller. Vi modifisert vår labyrint på flere måter fra gnager labyrint, både i design og protokoll (beskrevet nedenfor). Vår labyrint besto av en sirkulær plattform med 10 hull med samme avstand fra hverandre langs omkretsen av plattformen (figur 1). Protokollen er beskrevet her innebærer en gjenstand som deltar i opplæring forsøk for å lære plasseringen av et mål hull, da, når faget lærer plasseringen av målet hull, en sonde prøve brukes til å fastslå romlig minne bruk under navigering til mål.

Protocol

Alle prosedyrer ble godkjent av Penn State University Institutional Animal Care og bruk Committee (IACUC – Protokoll ID: 43242) og levd opp til alle lokale, statlige og føderale forskrifter. 1. Forberedelse Kjøpe eller bygge Barnes labyrinten, sikre dette målet hullene er riktig størrelse for de arter av interesse. For denne protokollen, bruker sju voksne side blotched øgler (Uta stansburiana). Bestem tilstrekkelig utvalgsstørrelse for studier med andre arter. <…

Representative Results

Denne protokollen gjør det mulig for den eksperimentelle vurdering av romlig basert navigasjon i små øgler. En tidligere studie med hell brukt denne protokollen for å sondere for romlig navigasjon i mannlige side flekket øgler 13. I den aktuelle studien, menn ble opplært til å navigere til et mål hull, og når kriteriet ble nådd, kommet inn i en sonde rettssak for å vurdere signaler prioriterte når du navigerer til et mål hull. <p class="jove_content" fo:keep-t…

Discussion

Når eksperimentelt teste for romlig læring og hukommelse, er det flere viktige konseptuelle problemstillinger som er omtalt i noen av de viktigste trinnene i protokollen. For det første må fag demonstrere at de lærer plasseringen av målet hullet i løpet av treningsforsøk. Oppnå den forhåndsinnstilte kriteriet viser at læring i mål hullet plassering har oppstått. Dersom fag ikke lærer plasseringen av målet hullet, er det ikke mulig måte å deretter bestemme et navigasjons strategi. Hvis dyrene nå kriteri…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

We thank M. Forney, R. Maged, and K. Hellwinkle for data collection and two anonymous reviewers for comments on a previous version of this manuscript. This research was supported by an NSF award to LDL (IOS-0918268).

Materials

Barnes maze TSE Systems 302050-BM/M Available from other vendors. Alternatively, a Barnes maze can be constructed from a standard, non-porous round table.
Heat tape Big Apple Pet Supply May also use a small space heater situated on the floor under the maze.
Pet keeper for small animals Petco 1230204 Housing enclosure that can be mounted under the maze.
Nickel plated shelf support pegs Newegg 241941 Pegs attached to underside of maze. Secures enclosure to maze during trials.
LifeCam Studio webcam Microsoft Q2F-00013 Available from other vendors. Other brands of webcams may also be used.
Tracking software Code custom written for Matlab
and the Image Toolbox
Video tracking software. Other tracking software such as VideoMot 2 from TSE Systems can be used.

Referências

  1. Adriano, F., Caltagirone, C., Spalletta, G. Hippocampal volume reduction in first-episode and chronic schizophrenia: A review and meta-analysis. Neuroscientist. 18, 180-200 (2012).
  2. Karl, A., Schaefer, M., Malta, L. S., Dorfel, D., Rohleder, N., Werner, A. A meta-analysis of structural brain abnormalities in PTSD. Neurosci. Biobehav. Rev. 30, 1004-1031 (2006).
  3. Shi, F., Liu, B., Zhou, Y., Yu, C., Jiang, T. Hippocampal volume and asymmetry in mild cognitive impairment and Alzheimer’s disease: Meta-analyses of MRI studies. Hippocampus. 19, 1055-1064 (2009).
  4. Videbech, P., Ravnkilde, B. Hippocampal volume and depression: A meta-analysis of MRI studies. Am. J. Psychiatry. 161, 1957-1966 (2004).
  5. Sharma, S., Rakoczy, S., Brown-Borg, H. Assessment of spatial memory in mice. Life Sci. 87, 521-536 (2010).
  6. Vorhees, C. V., Williams, M. T. Assessing spatial learning and memory in rodents. ILAR J. 55, 310-332 (2014).
  7. Jenssen, T. A. Spatial awareness by the lizard Anolis Cristatellus: Why should a non-ranging species demonstrate homing behavior. Herpetologica. 58, 364-371 (2002).
  8. Pittman, S. E., Hart, K. M., Cherkiss, M. S., Snow, R. W., Fujisaki, I., Smith, B. J., Mazzotti, F. J., Dorcas, M. E. Homing of invasive Burmese pythons in South Florida: evidence for map and compass senses in snakes. Biol. Lett. 10, (2014).
  9. Day, L. B., Crews, C., Wilczynski, W. Spatial and reversal learning in congeneric lizards with different foraging strategies. Anim. Behav. 57, 393-407 (1999).
  10. Day, L. B., Crews, C., Wilczynski, W. Effects of medial and dorsal cortex lesions on spatial memory in lizards. Behav. Brain Res. 118, 27-42 (2001).
  11. Holtzman, D. A. From Slither to Hither: Orientation and Spatial Learning in Snakes. Integr. Biol. 1, 81-89 (1998).
  12. Holtzman, D. A., Harris, T. W., Aranguren, G., Bostock, E. Spatial learning of an escape task by young corn snakes, Elaphe guttata guttata. Anim. Behav. 57, 51-60 (1999).
  13. LaDage, L. D., Roth, T. C., Cerjanic, A. M., Sinervo, B., Pravosudov, V. V. Spatial memory: are lizards really deficient. Biol. Lett. 8, 939-941 (2012).
  14. Nobel, D. W. A., Carazo, P., Whiting, M. J. Learning outdoors: male lizards show flexible spatial learning under semi-natural conditions. Biol. Lett. 8, 946-948 (2012).
  15. Foà, A., Basaglia, F., Beltrami, G., Carnacina, M., Moretto, E., Bertolucci, C. Orientation of lizards in a Morris water-maze: roles of the sun compass and the parietal eye. J. Exp. Biol. 212, 2918-2924 (2009).
  16. López, J. C., Vargas, J. P., Gómez, Y., Salas, C. Spatial and non-spatial learning in turtles: the role of medial cortex. Behav. Brain Res. 143, 109-120 (2003).
  17. Petrillo, M., Ritter, C. A., Powers, A. S. A role for acetylcholine in spatial memory in turtles. Physiol. Behav. 56, 135-141 (1994).
  18. Zani, P. A., Jones, T. D., Neuhaus, R. A., Milgrom, J. E. Effect of refuge distance on escape behavior of side-blotched lizards (Uta stansburiana). Can. J. Zool. 87, 407-414 (2009).
  19. Mason, R. T., Gans, C., Crews, D. Reptilian Pheromone. Hormones, Brain, and Behavior: Biology of the Reptilia. , 114-228 (1992).
  20. Crawley, J. N., et al. Behavioral phenotypes of inbred mouse strains: implications and recommendations for molecular studies. Psychopharmacology. 132, 107-124 (1997).
  21. Schellinck, H. M., Cyr, D. P., Brown, R. E. How Many Ways Can Mouse Behavioral Experiments Go Wrong? Confounding Variables in Mouse Models of Neurodegenerative Diseases and How to Control Them. Adv. Stud. Behav. 41, 255-366 (2010).
  22. O’Leary, T. P., Brown, R. E. The effects of apparatus design and test procedure on learning and memory performance of C57BL/6J mice on the Barnes maze. J. Neurosci. Methods. 203, 315-324 (2012).
  23. O’Leary, T. P., Brown, R. E. Optimization of apparatus design and behavioral measures for the assessment of visuo-spatial learning and memory of mice on the Barnes maze. Learn. Mem. 20, 85-96 (2013).
  24. Patil, S. S., Sunyer, B., Höger, H., Lubec, G. Evaluation of spatial memory of C57BL/6J and CD1 mice in the Barnes maze, the Multiple T-maze and in the Morris water maze. Behav. Brain. Res. 198, 58-68 (2009).
  25. Roth, T. C., Krochmal, A. R. The role of age-specific learning and experience for turtles navigating a changing landscape. Curr. Biol. 25, 333-337 (2015).
check_url/pt/55103?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
LaDage, L. D., Cobb Irvin, T. E., Gould, V. A. Assessing Spatial Learning and Memory in Small Squamate Reptiles. J. Vis. Exp. (119), e55103, doi:10.3791/55103 (2017).

View Video