Élevage<em> Ixodes scapularis,</em> La tique à pattes noires: alimentation sur des souris étapes Immature
Summary
La production de tiques élevées élevées en laboratoire est essentielle pour les études sur la biologie des tiques et les interactions tic-pathogène. Ici, nous démontrons un protocole simple pour l'alimentation de tiques immatures qui est rentable et moins stressant pour les souris.
Abstract
Ixodes scapularis , le vecteur de la maladie de Lyme, est l'un des vecteurs de maladies les plus importants dans l'est et le Midwest des États-Unis. Cette espèce est une tumeur de trois hôtes qui nécessite un repas sanguin provenant d'un hôte vertébré pour chaque étape de développement, et les femelles adultes ont besoin d'un repas sanguin pour la reproduction. Les tiques larvaires s'attachent à leur hôte pendant 3 à 5 jours pour nourrir et déposer l'hôte lorsqu'ils sont complètement engorgés. Cette dépendance à l'égard de plusieurs hôtes différents et le temps d'attachement prolongé pour engorgement complique l'élevage de tiques en laboratoire. Cependant, pour comprendre les interactions biologie et tick-pathogène, la production de tiques saines et élevées en laboratoire est essentielle. Ici, nous démontrons un protocole simple et rentable pour l'alimentation des tiques immatures sur les souris. Nous avons modifié les protocoles existants pour une diminution du stress sur les souris et une augmentation de la réussite et de la survie de l'attaque par utilisation de cages jetables sans fond de maille pour éviter le contact des tiques avecL'eau contaminée par les urines et les excréments de souris.
Introduction
Les tiques sont des ectoparasites hématophages obligés des vertébrés et sont distribués dans le monde entier. Aux États-Unis, au moins 11 espèces de tiques sont des vecteurs d'agents pathogènes d'importance pour la santé publique 1 . Ixodes scapularis est responsable de la transmission de plusieurs agents pathogènes tels que les agents responsables de la fièvre récurrente de la maladie de Lyme ( Borrelia burgdorferi ) ( B. miyamotoi), l'anaplasmose granulocytaire humaine ( Anaplasma phagocytophilum ) et la babésiose (Babesia spp.). Malgré l'importance de I. scapularis en tant que vecteur de maladie, la collecte de ces arachnides en abondance de la nature pour des études au laboratoire n'est pas toujours réalisable. Par conséquent, la production de tiques saines élevées en laboratoire est essentielle pour les études sur la biologie des tiques et les interactions tic-pathogène.
Le cycle de vie de toutes les tiques dures (famille Ixodidae), y compris I. scapularis, consiste en l'oeuf et trois activétapes e: larve, nymphe et adulte. Chaque phase active se nourrit d'un hôte vertébré. Les interactions complexes qui ont lieu entre les tiques et leurs hôtes pendant plusieurs jours de fixation et d' alimentation sont presque impossibles à reproduire en utilisant les mangeoires artificielles, et ne sont pas susceptibles de fournir suffisamment de numéros de fed tiques pour l' élevage de masse 2, 3, 4. Par conséquent, des souris vivantes et les lapins sont utilisés le plus souvent comme hôtes pour l'élevage immatures (larves et nymphes), et les stades matures (adultes) de tiques, respectivement. L'exigence de plusieurs hôtes pour l' alimentation du sang au cours de chaque stade de développement complique l' élevage de la tique, et il est long et coûteux 5, 6, 7. La plupart des protocoles d' élevage tiques exigent en gardant les souris dans une cage de plancher en treillis métallique suspendue 7, 8 ou dans un ca cylindriquege de dimensions telles que l'animal ne peut pas se déplacer librement et de se toiletter 6, 9, 10.
Ces cages cylindriques sont ensuite transférés dans une cage de boîte à chaussures avec une grille de fil. Engorgés, les tiques individuelles sont ensuite recueillies à partir de l'eau en dessous. Cependant, cette méthode conduit à exposer les tiques nourris à l' eau contaminée par des matières fécales et l' urine qui peuvent augmenter la croissance fongique et les tiques de la mortalité 9. De plus, il augmente la possibilité d'échapper à cocher du bac d'eau, ainsi que causer du stress à des souris. Pour contourner ces problèmes, nous démontrons ici l'alimentation des larves de tiques sur des souris dans des cages en plastique jetables de type boîte à chaussures. Cette méthode permet le comportement normal des souris, des augmentations engorgés récupération des tiques, et diminue la mortalité des tiques en raison de la contamination.
Protocol
Representative Results
Discussion
Étapes critiques dans le protocole
Il est important d'avoir plusieurs niveaux de mesures de sécurité lors de l'élevage des tiques pour éviter une fuite accidentelle. L'utilisation de ruban adhésif et d'un fossé d'eau est essentielle pour assurer la sécurité. Il est important de garder la souris anesthésiée sur un coussin chauffant pour maintenir la température du corps constante. Nous avons également constaté que le rasage de la souris ne fournit aucun bénéfi…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The authors acknowledge the help from the staff of Laboratory Animal Medicine, University of Nevada, Reno. MM received funding from Nevada INBRE.
Materials
| Puralube vet ointment | Amazon | Available from any Pet store or online store | |
| Disposable mouse cage | Innovive, San Diego, CA | MV 2 | Set of bottom and lid |
| White Alpha dri bedding | Lab Supply, Fort Worth, TX | ALPHA-Dri™ |
Referências
- Gleim, E. R., et al. Factors associated with tick bites and pathogen prevalence in ticks parasitizing humans in Georgia, USA. Parasites & Vectors. 9 (125), 1-13 (2016).
- Krober, T., Guerin, P. M. In vitro feeding assays for hard ticks. Trends Parasitol. 23 (9), 445-449 (2007).
- Kuhnert, F. Feeding of Hard Ticks In Vitro: New Perspectives for Rearing and for the Identification of Systemic Acaricides. ALTEX. 13 (2), 76-87 (1996).
- Voigt, W. P., et al. In vitro feeding of instars of the ixodid tick Amblyomma variegaturn on skin membranes and its application to the transmission of Theileria mutans and Cowdria ruminantium. Parasitol. 107, 257-263 (1993).
- Gregson, J. D., Smith, C. N. Ticks. Insect Colonization and Mass Production. , 49-72 (1966).
- Sonenshine, D. E. . Biology of Ticks. 2, (1993).
- Bouchard, K. R., Wikel, S. K., Marquaedt, W. C. Care, maintenance, and experimental infestation of ticks in the laboratory setting. Biology of Disease Vectors. , 705-711 (2005).
- Schumaker, T. S., Barros, D. M. Life cycle of Ornithodoros (Alectorobius) talaje. (Acari:Argasidae) in laboratory. J Med Entomol. 32, 249-254 (1995).
- Banks, C. W., Oliver, J. H., Hopla, C. E., Dotson, E. M. Laboratory life cycle of Ixodes woodi (Acari:Ixodidae). J. Med. Entomol. 35, 177-179 (1998).
- James, A. M., Oliver, J. H. Feeding and host preference of immature Ixodes dammini,I.scapularis,and I.pacificus.(Acari:Ixodidae). J. Med. Entomol. 27, 324-330 (1990).
