Summary

Rearing<em> Scapularis קרצית,</em> את הטיק השחור רגליים: האכלת שלבי Immature על עכברים

Published: May 08, 2017
doi:

Summary

ההפקה של קרציות מעבדה-שגדל בריאה חיונית מחקרים על ביולוגית קרציה, וסמן-הפתוגן אינטראקציות. כאן אנו מדגימים פרוטוקול פשוט עבור האכלה לתקתק בשלה כי היא חסכונית ופחות מלחיץ לעכברים.

Abstract

Scapularis קרצית, הווקטור של מחלת ליים, הוא אחד וקטורי המחלה החשובים ביותר במזרח ובמערב התיכון ארצות הברית. מין זה הוא קרציה שלושה מארח הדורש ארוחת דם שורה החולייתנים עבור כל שלב פיתוח, והנקבות המבוגרות דורשות ארוחת דם לצורך הרבייה. הזחל קרציות לצרף המארח שלהם במשך 3 – 5 ימים על האכלה להשיל המארח כאשר צבה מלא. תלות זו בכמה צבאות שונים וזמן המצורף הממושך עבור גודש המסבך לתקתק גידול בסביבת המעבדה. עם זאת, כדי להבין ביולוגיה לתקתק וקרציות-הפתוגן אינטראקציות, ההפקה של קרציות בריאה, שגדל-מעבדה חיונית. הנה, אנחנו מדגימים פרוטוקול פשוט, חסכוני עבור לתקתק בשלה האכלה על עכברים. שינינו את הפרוטוקולים הקיימים עבור מתח ירד על עכברים וגדילה לתקתק האכלת הצלחה והישרדות באמצעות כלובים פנויים ללא תחתית רשת כדי למנוע מגע של Wi קרציותמים מזוהמים עם שתן עכברים וצואה.

Introduction

קרציות הן לחייב ectoparasites hematophagous של בעלי חוליות, ומופצים ברחבי העולם. בארצות הברית, לפחות 11 מינים של קרציות הם וקטורים של פתוגנים חשיבות 1 בריאות הציבור. Scapularis קרצית אחראי להעברת מספר פתוגנים כגון סוכני סיבתי של מחלת ליים (burgdorferi Borrelia) ההתקפי חום (miyamotoi ב), anaplasmosis granulocytic האנושי (phagocytophilum Anaplasma), ו babesiosis (SPP babesia.). למרות החשיבות של I. scapularis כוקטור מחלה, איסוף arachnids אלה בשפע מן פרא ללימודים במעבדה הוא לא תמיד אפשרי. לכן, הפקת קרציות מעבדה-שגדל בריאה חיונית מחקרים על ביולוגית קרציה, וסמן-הפתוגן אינטראקציות.

מחזור החיים של כל קרציות קשה (משפחה Ixodidae), כולל scapularis I., מורכב Activ ביצה ושלושהבשלבי דואר: זחל, נימפה, מבוגר. כל שלב פעיל נזון שורת חוליות. את יחסי הגומלין המורכבים המתרחשים בין קרציות המארחים שלהם על פני כמה ימים של קובץ מצורף והאכלה הם כמעט בלתי אפשריים לשחזר באמצעות מתקני האכלה מלאכותיות, וכן צפויים לספק מספרים מספיקים של הפד קרציות עבור המוני גידול 2, 3, 4. לכן, עכברים וארנבים חיים משמשים לרוב כמארחים לגידול בשלה (זחלים ונימפות), וכן בשלבים בוגרים (מבוגרים) של קרציות, בהתאמה. הדרישה של מארחים מרובים עבור האכלת דם במהלך כל שלב התפתחותי מסבך גידול קרציה, ואת הזמן ועלות 5 אינטנסיבית, 6, 7. רוב פרוטוקולי גידול לתקתק דורשים שמירת עכברים בכלוב רצפת רשת תיל מושעה 7, 8 או CA גליליGE בקנה מידה כזה שהיה החיה לא יכולה לנוע בחופשיות וחתן עצמו 6, 9, 10.

כלובי גלילי אלה מועברים לאחר מכן לכלוב קופסת נעליים עם רשת תיל. צבה, קרציות מנותקת אז נאספים המים מתחת. עם זאת, תוצאות בשיטה זו בחשיפת הפד קרציות למים מזוהמים עם שתן וצואה שיכולה להגדיל את צמיחת פטריות וקרציות תמותה 9. בנוסף, הוא מגביר את האפשרות של בריחת קרצייה מן השוקת כמו גם גורם ללחץ על עכברים. כדי לעקוף את הבעיות הללו, אנו כאן להפגין האכלה לתקתק זחל על עכברים בתוך כלובי הפנויה קופסא נעליים מסוג הפלסטיק. שיטה זו מאפשרת התנהגות נורמלית של עכברים, מגדילה צבה התאוששות קרציה, ומקטין תמותה לתקתק עקב זיהום.

Protocol

פרוטוקול (מספר- 00,682) המפורטים להלן תאושר על ידי ועדת טיפול בבעלי חיים מוסדיים השתמש (IACUC) באוניברסיטת נבדה רינו והוא פועל בהתאם להנחיות של אוניברסיטת נבאדה, ועדת האתיקה במחקר בבעלי חיים של רינו. בקצרה, עכברים היו מורדמים עם isoflurane ו חרטומו שמש שמירה על רמות isoflurane רציפות …

Representative Results

שינינו פרוטוקולים קיימים הגברת טיק 6 , 10 לשיפור יעילות האכלה ואת הלחץ מופחת על המארח העכבר. התוצאות מראות כי הסטנדרטים סטנדרטיים בסגנון נעל בסגנון העכבר מתאימים לגידול טיק. המצעים הלבנים סיפקו ניגוד טוב לאוסף קל של טד…

Discussion

צעדים קריטיים בתוך הפרוטוקול

חשוב יש כמה רמות של אמצעי בטיחות כאשר גידול קרציות כדי למנוע בריחת בשוגג. שימוש סרט דביק וחפיר מים הם קריטיים כדי להבטיח בטיחות. חשוב לשמור על העכבר הרדים על כרית חימום כדי לשמור על טמפרטורה קבועה בגוף. …

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

The authors acknowledge the help from the staff of Laboratory Animal Medicine, University of Nevada, Reno. MM received funding from Nevada INBRE.

Materials

Puralube vet ointment Amazon Available from any Pet store or online store
Disposable mouse cage  Innovive, San Diego, CA  MV 2 Set of bottom and lid
White Alpha dri bedding  Lab Supply, Fort Worth, TX  ALPHA-Dri™

Referências

  1. Gleim, E. R., et al. Factors associated with tick bites and pathogen prevalence in ticks parasitizing humans in Georgia, USA. Parasites &amp; Vectors. 9 (125), 1-13 (2016).
  2. Krober, T., Guerin, P. M. In vitro feeding assays for hard ticks. Trends Parasitol. 23 (9), 445-449 (2007).
  3. Kuhnert, F. Feeding of Hard Ticks In Vitro: New Perspectives for Rearing and for the Identification of Systemic Acaricides. ALTEX. 13 (2), 76-87 (1996).
  4. Voigt, W. P., et al. In vitro feeding of instars of the ixodid tick Amblyomma variegaturn on skin membranes and its application to the transmission of Theileria mutans and Cowdria ruminantium. Parasitol. 107, 257-263 (1993).
  5. Gregson, J. D., Smith, C. N. Ticks. Insect Colonization and Mass Production. , 49-72 (1966).
  6. Sonenshine, D. E. . Biology of Ticks. 2, (1993).
  7. Bouchard, K. R., Wikel, S. K., Marquaedt, W. C. Care, maintenance, and experimental infestation of ticks in the laboratory setting. Biology of Disease Vectors. , 705-711 (2005).
  8. Schumaker, T. S., Barros, D. M. Life cycle of Ornithodoros (Alectorobius) talaje. (Acari:Argasidae) in laboratory. J Med Entomol. 32, 249-254 (1995).
  9. Banks, C. W., Oliver, J. H., Hopla, C. E., Dotson, E. M. Laboratory life cycle of Ixodes woodi (Acari:Ixodidae). J. Med. Entomol. 35, 177-179 (1998).
  10. James, A. M., Oliver, J. H. Feeding and host preference of immature Ixodes dammini,I.scapularis,and I.pacificus.(Acari:Ixodidae). J. Med. Entomol. 27, 324-330 (1990).
check_url/pt/55286?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
Nuss, A. B., Mathew, M. G., Gulia-Nuss, M. Rearing Ixodes scapularis, the Black-legged Tick: Feeding Immature Stages on Mice. J. Vis. Exp. (123), e55286, doi:10.3791/55286 (2017).

View Video