Summary

マウスにおける低侵襲横大動脈狭窄

Published: March 14, 2017
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Summary

気管挿管と人工呼吸器の使用を排除しながら、低侵襲性横大動脈狭窄(MTAC)は、通常の横方向の大動脈狭窄(TAC)の必需品を節約します。これは、特に翻訳研究における左心室過負荷のハイスループット研究のために非常に望ましい方法であることが分かります。

Abstract

低侵襲性の横大動脈狭窄(MTAC)は、標準開胸横大動脈狭窄(TAC)より、マウスにおける横大動脈の狭窄のためのより望ましい方法です。横方向の大動脈狭窄は、左心室における高圧の誘導のための機能性に優れた方法であるが、それは気管挿管と人工呼吸の使用のために、より困難で長い手順です。 TACは、新しい方法、MTACとして、しばしばも少ない存続可能ではありません、どちらも換気セットアップで肋骨と肋間筋の切断や気管挿管を必要とします。胸腔にアクセスするために開胸とは対照的にMTACでは、大動脈弓は、前首の正中切開を介して到達されます。甲状腺は、胸骨切痕を明らかにするために引き戻されます。胸骨はその後、第2リブレベルに削減され、大動脈弓は、結合組織と胸腺を分離することによって、単純に到達します。からそこに、縫合糸は、アーチの周りに包まれ、スペーサで結ばれ、その後、胸骨カットし、皮膚を閉じることができますすることができます。 MTACは、左心室の高血圧症を誘発するより速く、より侵襲性の低い方法であり、ハイスループット研究の可能性を可能にします。狭窄の成功は、大動脈弓と左右の頸動脈血管の寸法の流速を決定するために、高周波経胸腔心エコー検査法、特にカラードップラーとパルス波ドップラーを使用して確認することができ、かつ左心室機能と形態。成功したくびれはまた、間質および血管周囲線維症の心筋細胞肥大などの重要な組織病理学的変化を、トリガされます。ここでは、MTACの手順は、頸動脈中の得られた流れの変化は、心エコー検査、全体の形態、および心臓内の組織病理学的変化に調べることができる方法を示す、記載されています。

Introduction

この記事の全体的な目的は、マウスの大動脈狭窄(TAC)は、より単純で好都合手術を生産するように改変することができる方法を横断実証することです。 TACは、1991年1に導入され、操作ゲノム2、3、4、5、6を特に小動物において、左心室および心不全に肥大につながる細胞および分子経路を研究するために分子生物学を有効にしました。所望の圧力過負荷の製造におけるその有効性にもかかわらず、技術は、最終的手順を行う際に、その低い生存率により困難によって制限されます。 TACを行う外科医は、気管内挿管、開胸術を実行することができ、および肺虚脱1を防止するために人工呼吸を使用しなければなりません。

コンテンツは">多くの場合、簡単かつ低侵襲性の方法が望まれている。その結果、低侵襲横断大動脈狭窄(MTAC)は3を考案した。結果(具体的には、左心室肥大)が同じであるが、手順が有意に少ない装置を含みます動物へとダメージが少ない。MTACが90%以上の大きな生存率を、持っている、とだけ15〜25分の動作時間を持つことが望ましい方法であることが判明している。成功した手術後の死亡のまれな例があまりにに起因することができます驚異的な左心室過負荷や、腎臓などの重要な臓器への血液供給の致命的な減少をもたらす大動脈弓の-tightくびれ、。

手順が完了した後、心エコー検査は、バンディングおよび心臓形態および機能の成功を評価するために使用することができます。高周波超音波システムは、直径を測定し、左右の変化を流すために利用することができます頚動脈、ピークフロー速度測定のための大動脈弓の狭窄を可視化するため、および左心室壁の厚さと機能パラメータ7,8決定します。安楽死の後、器官はまた、ヘマトキシリン及びエオシン染色およびピクロシリウスコラーゲン染色で組織病理学的研究のために収集することができ、後者の線維を観察するために特に有用です。

Protocol

プロトコルは、香港の大学の教育・研究(CULATR)でライブ動物の使用に関する委員会のガイドラインに従います。 1.運用サイトの準備 75%イソプロピルアルコールで手術部位を消毒します。心の変化や対象動物の呼吸速度を避けるために、37℃に加熱パッドの温度を調整します。 30分間、または他の適切な方法により、121℃で重力置換滅菌器で滅菌手術器?…

Representative Results

MTACは、タイムリーに、左心室の大幅な高血圧の誘導を可能にします。 ポリウレタン管を適所に曲げられて保持されるように4 30ゲージ針- 図1に見られるように、プロシージャのための主要なツールの製造は、2を必要とする、シンプルで最小です。外科手術自体はTACと比較して、容易に行うことができるよう?…

Discussion

ロックマンらは、心臓に圧負荷を研究するための方法として、大動脈結紮するための第1の方法を考案しました。これは、高血圧や心不全1の細胞および分子の結果を明らかに開始するための研究を可能にしました。改良された方法、低侵襲横断大動脈狭窄(MTAC)は、従来の横断大動脈狭窄9の欠点がない、左心室圧負荷および心不全の誘導のために適し、時…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

私たちは、VEVO 2100超音波システムを提供するための香港理工大学の生命科学における大学研究施設(ULS)を感謝したいです。訓練及び円滑のための医工学、香港理工大学、学際課から博士Chunyiウェンに感謝します。この作品は、香港政府RGCグラントGRF 17127215、764812とビリー・KCチョウにHKU6 / CRF / 11Gによってサポートされていました。

Materials

1 inch 30 Gauge Needles BD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA.  305128 Curved as in the procedure and Figure 1
27 Gauge Needle BD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA.  301629 Make blunt and smooth for spacer
6/0 Dafilon B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Germany. C0933066
6/0 Silkam B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Germany. C0762067
Sterile gloves A.R. Medicom, Inc (Asia), Hong Kong.
Cotton Applicator Mannings, Quarry Bay, Hong Kong. Local Shopping Center
Delapitory Cream Veet (Hong Kong), Kwun Tong, Kowloon, Hong Kong Local Shopping Center
Lexer-Baby Scissor FST, British Columbia V7H 0A6, Canada. 14078-10
Curved Iris Forcep FST, British Columbia V7H 0A6, Canada. 11065-07
Micro Olsen-Hegar Needle Holder WPI, Sarasota, FL 34240, USA.  501989
Stereo Micrioscope WPI, Sarasota, FL 34240, USA.  PZMIII-BS
GenTeal Gel Novartis, East Hanover, NJ 07936, USA.  Local Pharmacy
Heating Pad Kent Scientific Corporation, Torrington, CT 06790, USA.  DCT-20
Surgical tape Laboratory Animal Unit
Ketamine and Xylazine Laboratory Animal Unit
Betadine Laboratory Animal Unit
Buprenorphine Laboratory Animal Unit

Referências

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Citar este artigo
Zaw, A. M., Williams, C. M., Law, H. K. W., Chow, B. K. C. Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice. J. Vis. Exp. (121), e55293, doi:10.3791/55293 (2017).

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