Minimamente Invasiva transversal aórtica constrição em Ratos
Summary
Minimamente invasiva constrição aórtica transversal (MTAC) conserva o essencial da constrição aórtica transversal regulares (TAC), eliminando o uso de um ventilador com intubação traqueal. Ele revela-se um método altamente desejável para os estudos de alto rendimento sobre a sobrecarga do ventrículo esquerdo, particularmente em estudos translacionais.
Abstract
Minimamente invasiva constrição da aorta transversal (MTAC) é um método mais conveniente para a constrição da aorta transversal em ratinhos que constrição padrão de tórax aberto transversal da aorta (TAC). Embora a constrição da aorta transversal é um método altamente funcional para a indução de alta pressão no ventrículo esquerdo, é um processo mais difícil e demorado devido ao seu uso de ventilação artificial com entubação traqueal. TAC é muitas vezes também menos de sobrevivência, como o método mais recente, MTAC, nem exige o corte das costelas e dos músculos intercostais nem intubação traqueal com uma configuração de ventilação. Em MTAC, por oposição ao de uma toracotomia para acesso à cavidade torácica, o arco aórtico é alcançado através de uma incisão na linha média anterior no pescoço. A tireóide é puxado para trás para revelar o entalhe esternal. O esterno é posteriormente reduzido para o segundo nível de costela, e o arco aórtico é alcançado simplesmente através da separação dos tecidos conjuntivos e timo. A partir deHá, um fio de sutura pode ser enrolado em torno do arco e amarrado com um espaçador, e em seguida, o corte do esterno e a pele pode ser fechada. MTAC é uma maneira muito mais rápida e menos invasiva para induzir hipertensão ventricular esquerda e permite a possibilidade de estudos de alto rendimento. O sucesso da constrição pode ser verificado usando-alta frequência ecocardiografia trans-torácica, especialmente Doppler colorido e pulsátil Doppler, para determinar as velocidades de fluxo do arco aórtico e à esquerda e artérias carótida direita, a dimensão dos vasos sanguíneos, e a função ventricular esquerda e morfologia. A constrição sucesso também irá desencadear alterações histopatológicas significativas, tais como hipertrofia das células do músculo cardíaco com fibrose intersticial e perivascular. Aqui, o procedimento de MTAC é descrita, demonstrando como as mudanças de fluxo resultantes nas artérias carótidas podem ser examinados com ecocardiografia, morfologia, e as alterações histopatológicas no coração.
Introduction
O objetivo geral deste artigo é demonstrar como transversal constrição aórtica (TAC) em ratos podem ser modificados para produzir uma cirurgia mais simples e mais conveniente. TAC foi introduzido pela primeira vez em 1991 1 e permitiu que os biólogos moleculares para estudar as vias celulares e moleculares que levam à hipertrofia no ventrículo esquerdo e insuficiência cardíaca, particularmente em pequenos animais com genomas manipuladas 2, 3, 4, 5, 6. Apesar da sua eficácia em produzir a sobrecarga de pressão desejado, em última análise, a técnica está limitada pela dificuldade em realizar o procedimento, e a sua baixa taxa de sobrevivência. Um cirurgião realização TAC devem ser capazes de realizar a entubação endotraqueal, toracotomia, e usar a ventilação artificial, a fim de evitar o colapso do pulmão 1.
conteúdo "> Muitas vezes, um método simples e menos invasiva é desejada. Como consequência, minimamente invasiva constrição da aorta transversal (MTAC) foi concebido 3. Embora o resultado (especificamente, hipertrofia do ventrículo esquerdo) é o mesmo, o procedimento envolve um número significativamente menor aparelhos e menos danos para o animal. MTAC revela-se um método conveniente que tem uma taxa de sobrevivência maior, acima de 90%, e tem um tempo de operação de apenas 15 a 25 min. os raros casos de morte após cirurgia bem sucedida pode ser atribuída ao excesso constrição -tight do arco aórtico, resultando em sobrecarga ventricular esquerda tremenda e redução fatal de fornecimento de sangue para os órgãos críticos, tais como os rins.Após o processo é completado, a ecocardiografia pode ser usado para avaliar o sucesso de bandas e a morfologia e da função cardíaca. Um sistema de ultra-som de alta frequência pode ser utilizado para medir o diâmetro e as alterações no fluxo na esquerda e direitaartérias carótidas, para visualizar o arco aórtico constrição para medições de pico de velocidade de fluxo, e para determinar a espessura da parede do ventrículo esquerdo e parâmetros funcionais 7, 8. Após a eutanásia, os órgãos também podem ser recolhidos para estudos histopatológicos com hematoxilina e eosina e colágeno coloração Picrosirius, sendo este último particularmente útil para a observação de fibrose.
Protocol
Representative Results
Discussion
Rockman e colegas desenvolveu o primeiro método para bandagem aórtica como um método para estudar sobrecarga de pressão no coração. Esta pesquisa permitiu começar a descobrir as conseqüências celulares e moleculares da hipertensão e insuficiência cardíaca 1. Um método melhorado, minimamente invasiva constrição da aorta transversal (MTAC), fornece um método passível, dependente do tempo para a indução de sobrecarga de pressão ventricular esquerda e insuficiência cardíaca, sem…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Gostaríamos de reconhecer o Mecanismo de Pesquisa da Universidade de Ciências da Vida (ULS) do Hong Kong Polytechnic University para a prestação de Vevo 2100 sistema de ultra-som. Um agradecimento especial ao Dr. Chunyi Wen da Divisão Interdisciplinar de Engenharia Biomédica, Hong Kong Polytechnic University, de formação e de facilitação. Este trabalho foi apoiado pelo governo HK RGC Grant GRF 17127215, 764812 e HKU6 / CRF / 11G para Billy KC Chow.
Materials
| 1 inch 30 Gauge Needles | BD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA. | 305128 | Curved as in the procedure and Figure 1 |
| 27 Gauge Needle | BD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA. | 301629 | Make blunt and smooth for spacer |
| 6/0 Dafilon | B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Germany. | C0933066 | |
| 6/0 Silkam | B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Germany. | C0762067 | |
| Sterile gloves | A.R. Medicom, Inc (Asia), Hong Kong. | ||
| Cotton Applicator | Mannings, Quarry Bay, Hong Kong. | Local Shopping Center | |
| Delapitory Cream | Veet (Hong Kong), Kwun Tong, Kowloon, Hong Kong | Local Shopping Center | |
| Lexer-Baby Scissor | FST, British Columbia V7H 0A6, Canada. | 14078-10 | |
| Curved Iris Forcep | FST, British Columbia V7H 0A6, Canada. | 11065-07 | |
| Micro Olsen-Hegar Needle Holder | WPI, Sarasota, FL 34240, USA. | 501989 | |
| Stereo Micrioscope | WPI, Sarasota, FL 34240, USA. | PZMIII-BS | |
| GenTeal Gel | Novartis, East Hanover, NJ 07936, USA. | Local Pharmacy | |
| Heating Pad | Kent Scientific Corporation, Torrington, CT 06790, USA. | DCT-20 | |
| Surgical tape | Laboratory Animal Unit | ||
| Ketamine and Xylazine | Laboratory Animal Unit | ||
| Betadine | Laboratory Animal Unit | ||
| Buprenorphine | Laboratory Animal Unit |
Referências
- Rockman, H. A., et al. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proc Natl Acad Sci U S A. 88 (18), 8277-8281 (1991).
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