É necessária uma assinatura do JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou inicie seu teste gratuito.

Artigo de método

Minimamente Invasiva transversal aórtica constrição em Ratos

21K visualizações

⸱

DOI:

10.3791/55293

⸱

14 de março de 2017

 ,  ,  , 

Neste artigo

Resumo

Minimamente invasiva constrição aórtica transversal (MTAC) conserva o essencial da constrição aórtica transversal regulares (TAC), eliminando o uso de um ventilador com intubação traqueal. Ele revela-se um método altamente desejável para os estudos de alto rendimento sobre a sobrecarga do ventrículo esquerdo, particularmente em estudos translacionais.

Resumo

Minimamente invasiva constrição da aorta transversal (MTAC) é um método mais conveniente para a constrição da aorta transversal em ratinhos que constrição padrão de tórax aberto transversal da aorta (TAC). Embora a constrição da aorta transversal é um método altamente funcional para a indução de alta pressão no ventrículo esquerdo, é um processo mais difícil e demorado devido ao seu uso de ventilação artificial com entubação traqueal. TAC é muitas vezes também menos de sobrevivência, como o método mais recente, MTAC, nem exige o corte das costelas e dos músculos intercostais nem intubação traqueal com uma configuração de ventilação. Em MTAC, por oposição ao de uma toracotomia para acesso à cavidade torácica, o arco aórtico é alcançado através de uma incisão na linha média anterior no pescoço. A tireóide é puxado para trás para revelar o entalhe esternal. O esterno é posteriormente reduzido para o segundo nível de costela, e o arco aórtico é alcançado simplesmente através da separação dos tecidos conjuntivos e timo. A partir deHá, um fio de sutura pode ser enrolado em torno do arco e amarrado com um espaçador, e em seguida, o corte do esterno e a pele pode ser fechada. MTAC é uma maneira muito mais rápida e menos invasiva para induzir hipertensão ventricular esquerda e permite a possibilidade de estudos de alto rendimento. O sucesso da constrição pode ser verificado usando-alta frequência ecocardiografia trans-torácica, especialmente Doppler colorido e pulsátil Doppler, para determinar as velocidades de fluxo do arco aórtico e à esquerda e artérias carótida direita, a dimensão dos vasos sanguíneos, e a função ventricular esquerda e morfologia. A constrição sucesso também irá desencadear alterações histopatológicas significativas, tais como hipertrofia das células do músculo cardíaco com fibrose intersticial e perivascular. Aqui, o procedimento de MTAC é descrita, demonstrando como as mudanças de fluxo resultantes nas artérias carótidas podem ser examinados com ecocardiografia, morfologia, e as alterações histopatológicas no coração.

Introdução

O objetivo geral deste artigo é demonstrar como transversal constrição aórtica (TAC) em ratos podem ser modificados para produzir uma cirurgia mais simples e mais conveniente. TAC foi introduzido pela primeira vez em 1991 1 e permitiu que os biólogos moleculares para estudar as vias celulares e moleculares que levam à hipertrofia no ventrículo esquerdo e insuficiência cardíaca, particularmente em pequenos animais com genomas manipuladas 2, 3, 4, 5, 6. Apesar da sua eficácia em....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Protocolo

O protocolo segue as orientações da Comissão sobre o Uso de Animais Vivos em Ensino e Pesquisa (CULATR) da Universidade de Hong Kong.

1. Operação Preparação do Site

  1. Desinfectar o local da operação com álcool isopropílico 75%. Ajustar a temperatura da almofada de aquecimento a 37 ° C para evitar alterações no coração e taxas respiratórias do indivíduo animal.
  2. Use instrumentos cirúrgicos esterilizados num esterilizador gravidade deslocamento a 121 ° C durante 30 min ou por outros métodos apropriados.
  3. Aqui 2 - 4 agulhas de calibre 30 e curva-los com um suporte de agulha, como pode ser visto na Figura 1,....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Resultados

MTAC permite a indução da hipertensão significativa no ventrículo esquerdo de uma forma atempada.

Como visto na Figura 1, a preparação das ferramentas principais para o procedimento é simples e mínima, requerendo apenas 2-4 agulhas de calibre 30 para ser dobradas e mantidas no lugar com um tubo de poliuretano. O próprio procedimento cirúrgico também é menos complicado, como comparado a TAC, e pode ser realizad.......

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Discussão

Rockman e colegas desenvolveu o primeiro método para bandagem aórtica como um método para estudar sobrecarga de pressão no coração. Esta pesquisa permitiu começar a descobrir as conseqüências celulares e moleculares da hipertensão e insuficiência cardíaca 1. Um método melhorado, minimamente invasiva constrição da aorta transversal (MTAC), fornece um método passível, dependente do tempo para a indução de sobrecarga de pressão ventricular esquerda e insuficiência cardíaca, sem os inconvenientes da .......

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Divulgações

Os autores declaram que não têm interesses financeiros concorrentes.

Agradecimentos

Gostaríamos de reconhecer o Mecanismo de Pesquisa da Universidade de Ciências da Vida (ULS) do Hong Kong Polytechnic University para a prestação de Vevo 2100 sistema de ultra-som. Um agradecimento especial ao Dr. Chunyi Wen da Divisão Interdisciplinar de Engenharia Biomédica, Hong Kong Polytechnic University, de formação e de facilitação. Este trabalho foi apoiado pelo governo HK RGC Grant GRF 17127215, 764812 e HKU6 / CRF / 11G para Billy KC Chow.

....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
1 polegada 30 Gauge NeedlesBD, Franklin Lakes, NJ 07417, EUA. 305128Curvo como no procedimento e Figura 1
27 Agulha de calibreBD, Franklin Lakes, NJ 07417, EUA. 301629Faça sem corte e liso para espaçador
6/0 DafilonB. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Alemanha.C0933066
6/0 SilkamB. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Alemanha.C0762067
Luvas estéreisA.R. Medicom, Inc (Ásia), Hong Kong.
< aplicador > algodão forte< / forte >Mannings, Quarry Bay, Hong Kong.Local Shopping Center
Creme DepilatórioVeet (Hong Kong), Kwun Tong, Kowloon, Hong KongLocal Shopping Center
Lexer-Baby ScissorFST, Colúmbia Britânica V7H 0A6, Canadá.14078-10
Curved Iris ForcepFST, Colúmbia Britânica V7H 0A6, Canadá.11065-07
Micro Olsen-Hegar Porta-AgulhasWPI, Sarasota, FL 34240, EUA. 501989
Stereo MicrioscopeWPI, Sarasota, FL 34240, EUA. PZMIII-BS
strong>GenTeal Eye GelNovartis, East Hanover, NJ 07936, EUA. Farmácia Local
Almofada de AquecimentoKent Scientific Corporation, Torrington, CT 06790, EUA. DCT-20
Fita cirúrgicaUnidade de animais
Cetamina e xilazinaUnidade
BetadinaUnidade de animais de
BuprenorfinaUnidadede animais de laboratório
< de laboratório de animais de laboratório laboratório

Referências

  1. Rockman, H. A., et al. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proc Natl Acad Sci U S A. 88 (18), 8277-8281 (1991).
  2. de Almeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. Transverse aortic co....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Reimpressões e permissões

Explorar mais artigos

TAC Minimamente InvasivoHipertrofia Ventricular EsquerdaEcocardiografia de Alta FrequênciaAnálise de Doppler ColoridoDoppler de Onda PulsadaTécnica de Incisão EsternalLigadura do Arco AórticoHipertrofia do Músculo CardíacoAlterações Histopatológicas