Bu iletişim kuralı karter temizleme bezi kullanımı ve Zebra balığı sistemleri, hangi nöbetçiler tek kullanım göre artan algılama patojen Aeromonas hydrophila, Mycobacterium spp. ve gibi algılamaya yol çamur analizini açıklar Pseudocapillaria tomentosa. P. tomentosa yumurta karantinada izlemek için bir sistem de önerilmiştir.
Sağlık izleme sistemleri geliştirilmiş ve Danio rerio Aeromonas hydrophila, Mycobacterium spp. ve Pseudocapillaria tomentosa gibi patojenler için potansiyel var çünkü Zebra balığı araştırma tesislerinde kullanılan hayvan refahı ve araştırma zarar. Mikrop tespit etmek için genellikle analiz post mortem balıklar. Nöbetçi’yi gözetim duyarlılığını artırmak için ve hayvanlar örnek sayısını azaltmak için önerilen bir yol kullanmaktır. Dolaşım sistemi ön filtrasyon sentinel havuzdan ayarı açıklanır. Teknik su kirliliği önlemek için ve balık nüfusu temsil etmek için yaş, cinsiyet ve suşların dikkatli bir seçim tarafından geliştirilmiştir. Hayvanların en az sayıda kullanmak için teknikleri çevre ekran da ayrıntılı olarak açıklanmıştır. Polimeraz zincir tepkimesi (PCR) yüzey karter temizleme bezi üzerinde önemli ölçüde bazı türlerin yaygın ve patojenik Mikobakteriyel Mycobacterium fortuitum, Mycobacterium haemophilumve gibi algılama geliştirmek için kullanılır Yol chelonae. Başka bir çevre yöntemi bir tankı veya P. tomentosa yumurta için bakmak için karter dibindeki çamuru işleme oluşur. Bu karantina uygulanan bir ucuz ve hızlı teknik bir üreme aygıtı alınan hayvanların tankı nerede sular altında. Son olarak, PCR çamur örneğe uygulanır ve A. hydrophila karter’ın alt ve yüzey algılanır. Genel olarak, bu belirli patojenlere uygulanan bu çevre tarama teknikleri ön filtrasyon nöbetçiler test için karşılaştırıldığında bir duyarlılık arttı açmıştır.
Araştırma ve hayvan refahı1,2korumak için patojenler varlığı içinde hayvan İmkanları izlenir. Zebra balığı söz konusu olduğunda, durum3,4,5,6,7,8,9,10,11 izleme kez analiz hayvanlar post mortem histopatoloji, Bakteriyolojinin kültür veya moleküler yöntemler kullanır. Sadece koloni hayvanların test balık ve patojenler düşük yaygınlık algılamak için gerekli olacaktır ilgili giderleri sayısından dolayı önerilen yöntem değildir. Bu nedenle, tercih edilen yöntem kirletici daha yüksek bir yük hayvanların küçük bir grup ortaya konmasıdır. Bu balık ön filtrasyon gözcü makine adı verilir. Bu poz için ay süren ve an artmak içinde hayvan bakıcı’nın iş yükünü ve/veya amaca uygun yapılmış bazı mühendislik çözüm içerir. İçe aktarılan satır tarama nerede canlı tutulması için bereketli hayvanlardır ve bu leşleri üzerinde rutin deneyleri ile uyumlu değil karantina altında başka bir mücadeledir.
Biz burada su sisteminin çevre eleme tarafından belirli Zebra balığı patojenler (A. hydrophila, Mycobacterium spp. ve P. tomentosa) algılamak için bazı yöntemler açıklanmaktadır. Sağlık kontrolü için kullanılan balık sayısını azaltmak için ve en iyi ciro, maliyet ve algılama hassasiyeti için amaçtır. Tür yöntemler hayvanlar kullanımı için bir alternatif ve karantina tarama İthalat için bazı teknikler uygulanabilir. Örneğin, Mocho9 karter temizleme bezi yerine (Nöbetçi’yi de dahil olmak üzere) Zebra balığı PCR gerçekleştirerek daha fazla patojenik Mikobakteriyel tür tespit edebilmek ve bu daha az örnekleri ile elde edildi. Aynı çalışma o, P. tomentosa yumurta ile daha fazla hassasiyet flotasyon ve mikroskopi kullanarak tank çamur eleme tarafından tespit edildi balık PCR ve histopatoloji tarafından test yerine.
Sentinel programları3,4,5,6,7,8,9,10 çeşitli özellikleri Tablo 1 özetler Zebra balığı özellikleri bir takım tarafından kullanılan. Bu ilk koloni balık tank dağıtılan kez ön filtrasyon nöbetçiler su almak ise sonrası filtrasyon nöbetçiler su herhangi bir koloni balık aynı şekilde alırsınız. Örneğin, ön filtrasyon nöbetçiler dolaşım sisteminde sürekli karter su alarak ayarlanabilir. Bir odada birçok bağımsız sistemler olduğunda bu bir seçenek olmayabilir. Bu durumda, ön filtrasyon nöbetçiler bir tank tüm oda ekran için kullanılabilir. Statik bir havuzdan dolaşım sistemi, nöbetçiler vardır ve onların su düzenli olarak, sadece ön filtrasyon su Yani, karter su odadaki tüm sistemlerden kullanarak değiştirilir. Bu teknik aşağıda çevre tarama etkinliğini ile karşılaştırma için bir temel olarak tanımlanmaktadır. Önerilen kurulum su kalitesi sorunları pH veya azot kirliliği azalma gibi kontrol etmek için tasarlanmıştır.
Bakteri tespit biyofilm gibi su yüzeyi karter duvarında bulunan veya bir tank dibinde çamur hipotez bakteriyel çevre tarama kavramını esas alır. Atık (su, dışkı, besleme ve diğer organik maddeler) topladığı karter bir ideal örnekleme noktasını recirculating yetiştiricilik sisteminde tüm tankları ön filtrasyon görünüyor. Karter yüzeyi genellikle kolayca ulaşılabilir, ev temizliği hızlı ve Çapraz bulaşma (üzerinden örneğin eldiven) örneğinin önlemek için aseptik gerçekleştirilebilir. Kavramı yaygın patojen Mycobacterium spp. Zebra balığı sistemleri9,12tanımlamak için kullanılır. Aşağıda açıklanan tekniği ve ayrıca A. hydrophila algılama Zebra balığı karter yüzey temizleme bezi ve çamur bildiriliyor.
Çevre tarama parazit yumurtaları için algılamayı Murray vd tarafından dayanmaktadır 13 ve flotasyon tekniği kullanılan rutin Parazitoloji ve mikroskobik parazit yumurtaları dışkı14taranması için. Mocho9 alternatif örnekleme işlemi için önerilen ve teknik diğer tür-in balık biyotop algılamak için kullanılan gösterdi. Virüslü D. rerio geçmek P. tomentosa onların dışkı ile yumurta ve çamur içinde belgili tanımlık tank dibinde parazit yumurtaları kalır. Onlar, orada onların yoğunluğu sudan daha büyük olması nedeniyle toplanan olabilir. Yumurta yoğunluğu çevre örnek çok işlemek için kullanılır. Santrifüjü ile ilk bir flotasyon ağır madde su ve ışık enkaz ayırır. İkinci Santrifüjü doymuş şeker çözeltisi ( P. tomentosa yumurta yoğunluk büyük bir yoğunluk ile) tüp yüzeyde ortaya parazit yumurtaları için izin vermek için kullanır.
Biyofilm bakteri ve P. tomentosa –dan belgili tanımlık tank dip tarama sonra ilk Santrifüjü elde edilen çamur örnek tortu üzerinde tüm bu patojenler için PCR gerçekleştirerek birleştirilebilir. Bu örnekleme zaman en iyi duruma getirir. Yöntem aşağıda açıklanmıştır. Ayrıca bir karantina bağlamda bu teknikleri kullanmayı öneriyorum. Canlı tutulması gereken alınan yetişkin Zebra balığı ekran için bir üreme aygıtı karantina deposuna eklenir. Bir hafta sonra dışkı ve diğer atık maddeler üreme aygıtı içinde toplanan ve mikroskopi veya PCR tarafından tarandı. Aşağıda açıklanan tekniği ve P. tomentosa yumurta mikroskobu bu bağlamda tarafından tespit edildi.
Teknikleri, kritik adımlar, sınırlamaları ve sorun giderme:
Yaş, cinsiyet, zorlanma ve maruz kalma nöbetçiler uzunluğu standart değil. Bu Tablo 1‘ de gösterilmiştir. Aşağıda 6 ay yaş ve yaşlı balık Balık çok az tarama vardır. Genç balık büyük nüfus10,18,19,20dakikaya daha yaygın bazı patojen olarak etkileyen bazı patojen olabilir. Benzer şekilde, cinsiyet cinsiyet önyargı bazı patojenlerin21bazı rapor rağmen bazı sentinel gruplar seçimine kabul edilmez. Zorlanma seçimine göre belirli bir patojen izlemek için yapılmış olabilir, ancak bu sorunları çözmek önerilen tekniği çalışır. Örneğin, TU Mycobacterium spp.12,22algılama ile yardımcı olabilir ama nöbetçiler sonra göstermek veya rezervuar klinik belirtiler hareket edeceğini bir risk. Pozlama uzunluğu ile ilgili, Zebra balığı Uluslararası Kaynak Merkezi10 yaklaşım yetersiz kirlenme noktayla cevapsız patojenler algılamak için şansını artırır. Uzunsüre maruz kalanlar için ihtiyaç Nöbetçiler hazır değildir anlamına gelir. Çevre örnekleri ek esneklik ve tarama olayların çarpma sağlar. Örneğin, örnekleme iki ayda bir 4 ay aralığındaki her tarama yöntemi arasında yer alabilir. Bu yeni tanıtılan bir patojen algılanması zaman sukut azaltabilir.
Çevre tarama teknikleri çevre patojenler tespiti güveniyor. Patojenler tarafından Balık tutmak ve bu nedenle sistem suda seyreltilmiş. Patojenler su filtrasyon23 tarafından yakalama olasılığını araştırdı değil. Patojenler balık ve biyofilm algılama izin kirlenme bir eşik ulaşmak için çarpmak için yeterli zaman verilirse biz açıklamak için tek etkili yöntemlerdir. Bu sınırlama teknikleri örnekleme siteleri kritik bir seçime göre küçültülür: çamur içinde belgili tanımlık tank karter çamur yerine örneklenir ve karter bir tank veya yerine sonrası filtrasyon yüzeyde su ve biyofilm örnek. Yine de, aynı sistem üzerinden tüm örneklerini aynı sonuçlar vermek olası değildir. P. tomentosa için olumlu sonuçlar başka bir tahlil (histopatoloji, PCR veya çamur analiz) kullanarak onaylanabilir. Mikobakteriyel PCR olumlu sonuçlar kültür veya başka bir tanı Laboratuvarı tarafından onaylanabilir. Ancak, sağlık durumu kurarken daha fazla örnekleri herhangi bir çevre tarama tekniği olumsuz sonuçları onaylamak için tavsiye edilir.
Mevcut/alternatif yöntemleri ile ilgili olarak teknik önemi:
Mycobacterium spp. ortamında ortak ve karter onların huzurunda onların patojenitesi12tahmin değil. Mocho9 mortalite oranları izleme sağlık sorunları gelişmeleri incelemek için anahtar olduğunu gösterdi. Hayvan örnekleri kullanımı hayvan hastalıklarıyla ilgili herhangi bir soruşturma için gerekli kalır. Sağlık izleme bir tesiste tüm yaygın patojenler tespiti anlamına gelir ve bu çevre tarama teknikleri tek kullanım ile elde edilemez. Yine de, tanı araçları hassasiyetinin eksikliği geciktirebilir veya sistem durumu doğru bir tanımını önlemek. Iken gözcü makine kullanımı yaygın bir mikrop kalabalıkta algılamak için gerekli balık sayısını azaltır, duyarlılık eksikliği çevre tarama5,23gibi yöntemleri kullanarak için ağırlık ekler. Gerçekten de öyle ki çevre ve hayvan örnekleri negatif24,25sınamalısınız belirli patojen ücretsiz durum genellikle tesis içinde bir tür yokluğu olarak tanımlanır.
Mycobacterium spp. tanımlamak için karter çubukla sonuçları örnekleri yanlış olumsuz sağlık durumuna neden olabilir balık güvenerek gösterin. 6 test Mikobakteriyel tür olarak patojenik açıklanan veya potansiyel Zebra balığı15 ve bazı patojen tarafından yumurta yüzey dezenfeksiyon gibi düzenli olarak yapılan karantinada klor26 ile ortadan değil. Bu nedenle, yanlış negatif bazı satırları ithal ortak çalışanlar için sonuçlara yol açabilir. Örneğin, M. fortuitum PCR balık örneği tarafından kaçırılan ancak karter çubukla PCR yarısından fazlası algılandı. Bu mikobakteriler daha klor için su sistemleri27‘ büyümeye yeteneklerini ve diğerleri daha dayanıklı olduğunu göz önünde bulundurursak, bu sigara-kirlenmiş alma tesisi için bir risk var. Satırlar alma izin vermek için güven ve onların ile ihracat tesisin sağlık raporları karşılaştırmak yöneticileri gerekir. ICLAS performans değerlendirme programı28 kemirgenler bu süreçte anahtarıdır. RESAMA ağ M. gordonae ve M. mucogenicum tespiti Fransız D. rerio11bildirir. Bu mikobakteriler kullandığımız ticari laboratuvarları panellerinde teklif değil. ICLAS program genişletmek için ve patojenik türler29listesinin yanı sıra tanı testleri uyum için yararlı olacaktır.
A. hydrophila klor30 onun duyarlılık onun eleme daha büyük olasılıkla rutin yumurta yüzey dezenfeksiyon sırasında geçici olsa da hayvanlar, içe aktarırken tanıttı olmak potansiyeline sahiptir hastalık da. Karter, pamuklu çubuk ve çamur sonuçları çevre tarama bu patojen tespit etmek için kullanılabileceğini göstermektedir. Diğer bakteriler Mycobacterium spp. gibi çamur içinde PCR23tarafından tespit edildi. Döken patojenler algılanmasını sağlayan bu yana bu tür örnek bir özellikle ilgili. Örneğin, başka bir yeni alınan balık karantinada P. tomentosaiçin ekran için çamur analizi uygulamasıdır. Parazit hayvanın sağlık13 ve neoplazi modelleri16için bir tehdit oluşturuyor. Ayrıca, rutin Zebra balığı yumurta yüzey dezenfeksiyon içinde kullanılan klor konsantrasyonu verimli31değildir. Bu nedenle, bir haftalık cirosu olan ve olmayan herhangi bir balık ötenazi alınan hayvanlar ekran yeteneği çok cazip görünüyor. Bu teknik bir önceliklendirme ithalatın izin vererek karantina ve Biyogüvenlik kuralları etkisi altına alabiliyor. Karar verme sürecinin ardından verilirken tesiste yaygın patojenler, içe aktarılan balık ve alma tesisi10sağlık durumunu ödün riski örnekleri algılanan patojenler göre tasarlanmıştır.
Gelecekteki uygulamalar veya bu teknikleri Mastering sonra yön:
Rutin karantina tedavi seçilen seçeneği olsa bile, bu tür ilaç32,33,34,35,36 etkinliğini üreme aygıtı çamur analizi ile tespit edilebilir. Daha genel olarak, çevre tarama bileşikler bakteri ve parazit karşı test etmek için kullanılan ortadan kaldırılması, Balık biyotop dahil olmak üzere. Başka bir niş çevre tarama patojen nüfus canlı izlemek için37,38yem uygulamadır. Tanı toolbox Zebra balığı tesislerinde izleme sağlık için değerli bir ek olarak ana uygulama bu tekniklerin olmasına rağmen. Bir daha doğru maliyet ve zaman sayesinde sağlık durumu, karter temizleme bezi ve çamur analiz verimli tanımını sentinel gözetim ve rutin karantina uygulama için tamamlayıcı vardır. Gerçekten de, gelecekte bu tekniklerin herhangi bir su laboratuvar sağlık raporu rutin bir parçası olmaktır.
The authors have nothing to disclose.
Yazarlar BRF su sporları ekibi Francis Crick Enstitüsü onların kritik giriş ve teknik yardım için teşekkür etmek istiyorum. Bu eser onun çekirdek kanser araştırmaları İngiltere (FC001999), İngiltere’de tıbbi araştırma Konseyi (FC001999) ve Wellcome Trust (FC001999) fon alır Francis Crick Enstitüsü tarafından desteklenmiştir.
Aqua-Sed 250 mL | Vetark | 2-phenoxyethanol | |
Tubed Sterile Dryswab Tip | mwe | MW100 | Sump surface |
BD Plastipak Disposable Syringe 50mL Eccentric | Becton Dickinson |
300866 | They are actually graduated to 60 ml |
Centrifuge tube 15 mL Corning | Corning | 430766 | |
Centaur 2 benchtop centrifuge with 4 x 200 mL Swing–Out Rotor (unsealed) | Sanyo | MSB020.CX1.5 | |
Cover Glass 22 mm x22 mm | Menzel-Glaser | MNJ-350-020H | |
Plain Swab Sterile Plastic Applicator Rayon Tipped White Cap | Sterilin Ltd Thermo Fisher Scientific | F155CA | Swab sediment from sludge |
50 mL Self-Standing Centrifuge Tube CentriStar Cap | Corning | 430921 | |
In-Tank Spawning Tray Set | MBK Installations Ltd |