Isolamento de células tumorais circulantes em um modelo de rato ortotópico de câncer colorretal

Susan Kochall; May-Linn Thepkaysone; Sebastián A. García; Alexander M. Betzler; Jürgen Weitz; Christoph Reissfelder; Sebastian Schölch

doi:10.3791/55357

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Artigo de método

Isolamento de células tumorais circulantes em um modelo de rato ortotópico de câncer colorretal

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DOI:

10.3791/55357

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18 de julho de 2017

Susan Kochall¹ , May-Linn Thepkaysone¹ , Sebastián A. García¹ , Alexander M. Betzler¹ , Jürgen Weitz¹^,²^,³ , Christoph Reissfelder¹ , Sebastian Schölch¹^,²^,³

¹Department of Gastrointestinal, Thoracic and Vascular Surgery, Medizinische Fakultät Carl Gustav Carus, Technische Universität Dresden, ²German Cancer Consortium (DKTK), ³German Cancer Research Center (DKFZ)

Neste artigo

Resumo

Descrevemos o estabelecimento de tumores colorretais ortotópicos através da injeção de células tumorais ou organoides no ceco de camundongos e o subsequente isolamento de células tumorais circulantes (CTCs) deste modelo.

Resumo

Apesar das vantagens de uma fácil aplicabilidade e custo-eficácia, os modelos de ratos subcutâneos têm limitações severas e não simulam com precisão a biologia do tumor e a disseminação de células tumorais. Modelos de mouse ortotópicos foram introduzidos para superar essas limitações; No entanto, esses modelos são tecnicamente exigentes, especialmente em órgãos vazios, como o intestino grosso. Para produzir tumores uniformes que crescem e metastatizam de forma confiável, são críticas técnicas padronizadas de preparação e injeção de células tumorais.

Desenvolvemos um modelo de câncer colorretal ortopsico (CRC) que desenvolve tumores altamente uniformes e pode ser utilizado para estudos de biologia tumoral, bem como ensaios terapêuticos. As células tumorais de ambos os tumores primários, linhas celulares bidimensionais (2D) ou organoides tridimensionais (3D) são injetadas no ceco e, dependendo do potencial metastático das células tumorais injetadas, formam tumores altamente metastáticos. Além do que, além do mais,Os CTCs podem ser encontrados regularmente. Aqui descrevemos a técnica de preparação de células tumorais a partir de linhas celulares 2D e organoídeos 3D, bem como tecido tumoral primário, técnicas cirúrgicas e de injeção, bem como o isolamento de CTCs dos camundongos portadores de tumor e dicas atuais para solução de problemas.

Introdução

O câncer colorretal (CRC) é uma das causas mais comuns de morte por câncer nos países ocidentais. ¹ Embora o tumor primário possa ser frequentemente ressecado, a ocorrência de metástases à distância piora dramaticamente o prognóstico e muitas vezes leva à morte. ² ^, ³ A correlação biológica da metástase é a circulação de células tumorais (CTCs), que se destacam do tumor, sobrevivem em circulação, se juntam ao epitélio no órgão alvo, invadem o órgão e, finalmente, superam novas lesões. ⁴ Embora os CTCs sejam de relevância prognóstica, ⁵