L'esposizione del Maiale CNS per l'analisi istologica: Un manuale per la decapitazione, Teschio di apertura, e Cervello di rimozione
Summary
L'obiettivo di questo documento e video didattico è quello di descrivere come esporre e rimuovere il post-mortem del cervello di maiale e ghiandola pituitaria in uno stato integro, adatto per la successiva analisi macroscopica e istologica.
Abstract
Suini sono diventate sempre più popolari in larga animale ricerca traslazionale neuroscienze come sostituto economicamente ed eticamente fattibile primati non umani. La dimensione del cervello di grandi dimensioni del maiale permette l'utilizzo di convenzionali imager cervello clinica e l'uso diretto e la sperimentazione di procedure e attrezzature neurochirurgiche dalla clinica umana. Ulteriori analisi macroscopica e istologica, tuttavia, richiede l'esposizione post mortem del maiale sistema nervoso centrale (SNC) e successiva rimozione del cervello. Questo non è un compito facile, come il maiale CNS è incapsulato da una fitta, il cranio ossuto e della colonna vertebrale. L'obiettivo di questo documento e video didattico è quello di descrivere come esporre e rimuovere il cervello post-mortem di suini e la ghiandola pituitaria in uno stato integro, adatto per la successiva analisi macroscopica e istologica.
Introduction
studi neuroscienze traslazionale nei suini sono diventati sempre più popolari nel corso degli ultimi due decenni. Le grandi dimensioni del cervello di maiale consente l'utilizzo di convenzionali imager cerebrali clinica e l'uso diretto e sperimentazione di procedure neurochirurgiche ed attrezzature dalla clinica umana 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8. Negli ultimi 20 anni, maiali, specialmente maialino (ad esempio, Göttingen cavia), sono stati utilizzati per esaminare modalità di trattamento neuromodulatori, come il trapianto di cellule staminali; Vettore virale trasfezione; e la stimolazione cerebrale profonda diretta verso il morbo di Parkinson, l'obesità, la depressione, e la malattia di Alzheimer 2, 6,= "xref"> 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17. Questo è stato seguito dallo sviluppo di approcci stereotassica e chirurgici per manipolare cavia CNS 3, 18, 19, 20, 21. I cambiamenti del SNC istituiti sono state valutate in animali vivi mediante imaging cerebrale (PET 10, 13, 22, 24 e MR 23), cistometria 11, 12, 25, analisi del passo17, la valutazione neurologica 9, 17, e l'esame autoptico basato su istologia e analisi stereologica 14, 15, 17, 26, 27, 31. Tuttavia, l'analisi post-mortem richiede l'esposizione e la rimozione del cervello di maiale, che non è un compito facile, come una spessa cranio osseo e durale fibroso che copre circondano il cervello di maiale.
L'obiettivo di questo documento e video didattico è quello di descrivere come il cervello post-mortem di suini e dell'ipofisi possono essere esposti e rimossi in uno stato integro in 15-20 minuti utilizzando strumenti chirurgici non motorizzati. Il video didattico e illustrazioni fotografiche mostrano cavie di sesso maschile (età: 6 mesi, a corpo libero: 20-25 kg) utilizzato per uno studio anatomico sulla ghiandola pituitaria cavia.
Protocol
Representative Results
Discussion
La maggior parte degli studi di neuroscienze sperimentali vengono eseguiti in piccole specie animali, come topi e ratti, in cui l'accesso al sistema nervoso centrale è facilitato da un sottile skull- e durale spessore. Tuttavia, in animali da esperimento più grandi come maiali 1, 4, 8, pecore 32, e primati non umani, l'elevato spessore di queste strutture richiede l'uso di strumenti robusti…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Gli autori riconoscono con gratitudine l'aiuto sapiente della signora Trine W. Mikkelsen, la signora M. Lise montaggio, e il personale a Påskehøjgaard. The Danish Medical Research Council, la Fondazione Lundbeck, e la Novo Nordisk Foundation sostenuti finanziariamente lo studio.
Materials
| Heavy Scalpel Handle #4 | FST (Fine Science Tools) | 10008-13 | Good for skin incision and soft tissue removal |
| Non-Sterile Scalpel Blades #23 | FST | 10023-00 | |
| Scalpel Handle #7 | FST | 10007-12 | Optimal for dural incision and precision work |
| Non-Sterile Scalpel Blades #11 | FST | 10011-00 | |
| Surgical Forceps | FST | 11024-18 | The tip of the surgical forceps ensure a firm grip |
| Kerrison Bone Punch | Aesculap Neurosurgery | FF713R | Must be robust, bite size 3-5 mm |
| Bone Rongeur | Aesculap Neurosurgery | MD615 | Must be robust, bite size 15 x 5 mm |
| Bone Rongeur | Aesculap Neurosurgery | FO551R | Must be robust, bite size 25 x 15 mm |
| Bone Chisel | Lawton | 67-0335 | The size of the chisel head should not exceed 20 mm |
| Mallet (Hammer) | Millarco | 5624108 | Weigth 300 g, length 30 cm, head hit area size 2 x 2 cm |
| Micro-Scissor | FST | 14002-14 | |
| Dissector | Aesculap Neurosurgery | OL165R | |
| Göttingen minipigs | Ellegaard Göttingen Minipigs A/S, Denmark | ||
| Euthanimal | pentobarbital | ||
| Ketamine | Pfizer | ||
| Midazolam | Hameln Pharmaceuticals |
Referências
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