Здесь мы описываем новый подход к травмированию черепно-мозговой травмы головного мозга у Drosophila melanogaster . Наш метод имеет то преимущество, что он обеспечивает непосредственную доставку повторяющихся ударов с регулируемой прочностью только на голову. Дальнейшее исследование беспозвоночной системы поможет осветить патогенез хронической травматической энцефалопатии.
Хроническая травматическая энцефалопатия (CTE) представляет собой установленное нейродегенеративное заболевание, которое тесно связано с воздействием повторяющейся легкой травматической травмы головного мозга (mTBI). Механизмы, ответственные за его сложные патологические изменения, остаются в значительной степени неуловимыми, несмотря на недавний консенсус по определению невропатологических критериев. Здесь мы описываем новый метод разработки модели CTE у Drosophila melanogaster ( Drosophila ) в попытке идентифицировать ключевые гены и пути, которые приводят к характерному гиперфосфорилированному накоплению тау и гибели нейронов в головном мозге. Удары с регулируемой силой для нанесения мягкой закрытой травмы доставляются непосредственно на головку мухи, подвергая головку быстрое ускорение и замедление. Наш метод устраняет потенциальные проблемы, присущие другим моделям TROBI Drosophila ( например, смерть животных может быть вызвана повреждениемДругие части тела или внутренние органы). Менее трудоемкий и дорогостоящий уход за животными, короткая продолжительность жизни и обширные генетические инструменты делают плод идеальной для изучения патогенеза СТЭ и позволяют проводить крупномасштабные генетические и фармакологические экраны с геномом. Мы ожидаем, что текущая характеристика модели будет иметь важное механическое представление о профилактике заболеваний и терапевтических подходах.
Хроническая травматическая энцефалопатия (КТР) недавно была признана явным нейродегенеративным расстройством, отделенным от других тауопатий, таких как болезнь Альцгеймера 1 . В отличие от болезни Альцгеймера и других распространенных тауопатий, наиболее важными факторами риска которых являются возраст возраста и семейная история деменции, CTE, как указано по его названию, подразумевает тесную связь с историей травм мозга, скорее всего, у спортсменов-контактных спортсменов, Таких как боксеры и футболисты, а также военные ветераны 2 , 3 , 4 , 5 . Считается, что он инициируется повторными ударными и сухожильными ударами по голове. Пациенты могут проявлять симптомы и признаки, такие как когнитивный дефицит, изменения настроения и поведения и дисфункция движения, которые значительно перекрываются с болезнью Альцгеймера,Деменция, деменция тела Льюи и болезнь Паркинсона 6 . Напротив, посмертные исследования ткани головного мозга выявляют четкую картину гиперфосфорилированного накопления тау, окружающего небольшие кровеносные сосуды на глубинах корковых сосудов, патогномоническую особенность, не наблюдаемую в других дегенеративных условиях 7 . Однако до сих пор очень мало известно о патогенезе, ведущем к проявлению болезни. Это во многом связано с отсутствием верной модели на животных – только недавно были созданы модели грызунов 5 , 8 . У этих модельных организмов есть недостатки дорогостоящего ухода и относительно длительный срок службы, которые не подходят для исследований нейродегенеративных заболеваний.
По сравнению с аналогами млекопитающих беспозвоночные животные, такие как Drosophila, являются отличной альтернативой, с их экономически эффективным обслуживанием,Обширные инструменты для рассечения генетических детерминант и относительно короткий срок службы 9 . Примечательно, что муха и человеческий мозг разделяют эволюционно сохраняющиеся молекулярные и клеточные пути, а также анатомические сходства 10 , 11 , 12 . Ранее сообщалось о двух гениальных моделях Drosophila для изучения травматической черепно-мозговой травмы 13 , 14 . Первое устройство «High Impact Trauma» (HIT), разработанное Катценбергером и коллегами, содержало свободно движущиеся мухи в пластиковом флаконе, который был привязан к свободному концу металлической пружины 13 , 15 . Когда пластиковый флакон был повернут вертикально и выпущен, он попал на полиуретановую подушечку и передал муравьям, когда они отскочили к стене флакона и отскочили. Напротив, Барекат и его коллеги разработали другой способ доставки насНа платформе гомогенизатора Omni Bead Ruptor-24 14 . Мухи были выведены из строя с CO 2 и помещены в 2-миллилитровую отвертку, которая была прикреплена к гомогенизатору и подвергнута предварительно запрограммированным условиям встряхивания. Одним из преимуществ использования системы тканевого гомогенизатора является то, что экспериментатор может модулировать интенсивность травм, продолжительность травмы и количество травм. Тем не менее, оба режима имеют такой же недостаток: первичные травмы головы случайным образом определяются с точки зрения местоположения и силы удара. Кроме того, оба метода привели к значительной смертности, вызванной неизбежным побочным повреждением других частей тела и внутренних органов. Здесь мы описываем новый метод индуцирования mTBI у плодовых мух. Наш аппарат состоит из газового баллистического ударника. По сравнению с существующими моделями 14 , 15 Drosophila , наш метод имеет уникальное преимущество -С уловимым воздействием, направленным только на свободно движущуюся головку летательного аппарата, что позволяет точно контролировать различные факторы, такие как тяжесть удара, временной интервал между воздействиями и общее количество ударов.
Модели животных, которые добросовестно моделируют функции CTE, включая нейрофизиологические изменения, невропатологические признаки и нейробиологические дефициты, необходимы для выявления механизмов заболевания и для разработки диагностических и терапевтических целей. Понятно, что…
The authors have nothing to disclose.
Авторам нечего раскрывать.
Aerosol Barrier | USA Scientific | 1120-8810 | Used as an impactor |
200 ul Pipette Tip | USA Scientific | 1111-0706 | Used as a fly head holder |
1000 ul Pipette Tip | USA Scientific | 1122-1830 | Used as a connector |
1 ml Tuberculin Syringe | Becton Dickinson | 309625 | |
60 mm Petri Dishes | Fisher Scientific | FB0875713A | Used as a tracking arenas |
Flow Regulator | Genesee Scientific | 59-122WC | |
Standard Clamp Holder/stand | EISCO Scientific | CH0688 | |
Fine Brush | Genesee Scientific | 59-204 | |
Flypad | Genesee Scientific | 59-114 | |
Sylgard Silicone Elastomer | Dow Corning | 4019862 | |
CCD Camera | Microsoft | HD-5000 | |
Ctrax Walking Fly Tracker | Caltech | Ctrax 0.2.11 | |
MATLAB Image Processing Toolbox | MATLAB | R2015b |