A perda de colônias de abelhas mel é um desafio para os serviços de polinização de culturas. As atuais práticas de proteção de polinizadores garantem uma abordagem alternativa para minimizar o contato de abelhas com pesticidas nocivos usando produtos químicos repelentes. Aqui, fornecemos métodos detalhados para um protocolo de rastreamento visual para detecção de dissuasores para abelhas.
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Artigo de método
Protocolo de rastreamento de vídeo para a tela de quimioterapia para abelhas
Neste artigo
Resumo
Resumo
A abelha de abelha européia, Apis Mellifera L. , é uma polinizadora econômica e agrícola que gera bilhões de dólares por ano. O número de colônias de abelhas tem diminuído nos Estados Unidos e em muitos países europeus desde 1947. Vários fatores desempenham um papel neste declínio, incluindo a exposição não intencional de abelhas para pesticidas. O desenvolvimento de novos métodos e regulamentos é garantido para reduzir a exposição aos pesticidas a esses polinizadores. Uma abordagem é o uso de substâncias químicas repelentes que impedem as abelhas de uma cultura recentemente tratada com pesticida. Aqui, descrevemos um protocolo para discernir a dissuasão das abelhas expostas a quimicas repelentes seletivas. Os matadores de abelhas de mel são coletados e passaram a passar a noite numa incubadora 15 h antes do teste. Abelhas de mel individuais são colocadas em pratos de Petri que possuem um cubo de agarose-agarose (tratamento de controle) ou um cubo de açúcar-agarose-composto (tratamento repelente) colocado emPara o meio do prato. A placa de Petri serve como a arena que é colocada sob uma câmera em uma caixa de luz para gravar as atividades locomotoras de abelha de mel usando software de rastreamento de vídeo. Um total de 8 tratamentos de controle e 8 repelentes foram analisados por um período de 10 min, cada tratamento foi duplicado com novas abelhas. Aqui, demonstramos que as abelhas são dissuadidas dos cubos de açúcar-agarose com um tratamento composto, enquanto que as abelhas são atraídas para os cubos de açúcar-agarose sem um composto adicionado.
Introdução
A abelha de mel europeia, Apis melliferaL. , É um inseto econômico e de importância agrícola que fornece serviços de polinização que são valorizados em mais de US $ 200 bilhões globalmente 1 . Nos Estados Unidos e na Europa, os números das colônias de abelhas têm diminuído. Os Estados Unidos perderam ca. 60% das colônias de abelhas de mel geridas de 1947 a 2008, enquanto a Europa perdeu ca. 27% de 1961 a 2007 2 , 3 . Existem vários fatores que podem ser responsáveis pelo aumento do número de perdas de colônias, incluindo, entre outras, infestações parasitár....
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Protocolo
1. Prepare cubos de agarosa-agarose
- Pesar 8 g de açúcar e colocar em um balão Erlenmeyer de 50 ml.
- Encha o frasco Erlenmeyer com 20 mL de água desionizada. Dissolver o açúcar girando o frasco.
- Pesar 170 mg de agarose e adicioná-lo à solução de açúcar.
- Aqueça a solução de açúcar-agarose em um microondas alto durante 25 s. Dissolver a agarose na solução de açúcar.
- Permitir que o frasco e a solução de açúcar-agarose esfriem.
NOTA: O frasco deve ser frio ao toque, mas não permita que a solução se solidifique.- Para preparar um cubo de agarose-agarose para o tratamento de controle, despeje ....
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Resultados
Um protocolo de rastreamento visual foi desenvolvido para registrar a quantidade de tempo que as abelhas doces passaram em uma zona-alvo com açúcar-agarose (tratamento de controle) ou cubo de açúcar-agarose-composto (tratamento dissuasivo). O tempo gravado foi analisado usando um programa de software estatístico e o tempo médio gasto ± erro padrão na zona alvo é relatado como um gráfico de barras. DEET, o padrão-ouro para testes de repelente de insetos / dissuasão, foi usado neste protoc.......
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Discussão
Este protocolo de rastreamento visual fornece uma abordagem simples para dissuasores químicos de tela para abelhas de uma maneira relativamente rápida e fácil. Não há protocolos recomendados para o teste laboratorial de dissuasores químicos para abelhas. Estudos anteriores de campo semi- e completo examinaram os repelentes de abelhas mel 14 , 15 ; No entanto, os protocolos descritos são demorados, são intensivos em mão-de-obra e requerem recursos adicionais da i.......
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Divulgações
Os autores não têm nada a revelar.
Agradecimentos
Gostaríamos de agradecer ao Dr. Thomas Kuhar pelo uso do software de rastreamento visual e equipamentos. Agradecemos a James Wilson e Scott O'Neal por sua assistência técnica.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Balão Erlenmeyer de 50 mL | Kimax | 26500-50 | usado para fazer os cubos de açúcar/agarose |
| Açúcar | Kroger | qualquer produto similar será suficiente | |
| Água | adquirida em casa | ||
| Agarose | Apex | 20-102 | usado para fazer os cubos de açúcar/agarose |
| Molde para cubos de agarose (Barco de pesagem) | qualquer molde que forneça ao pesquisador um cubo de açúcar/agarose de 1,5 cm x 1,5 cm x 0,3 cm será suficiente | ||
| de rastreamento visual | EthoVision XT | Noldus | |
| LEDs de 633 nm Cyron | HTP904E | Essas luzes foram colocadas em uma caixa de luz construída para iluminar as arenas por baixo. A caixa era uma estrutura de madeira simples com uma tampa de plástico fosco / vidro plexi que permitia que a luz se dispersasse para cima sem qualquer brilho. | |
| Laptop ou PC | Dell | Inspiron One 2305 | necessário para software de rastreamento de vídeo. Qualquer dispositivo de PC capaz de executar o software de rastreamento visual será suficiente |
| as roupas de proteção | Dadant & Sons Inc | V0126 | qualquer capuz e jaqueta de proteção serão suficientes |
| Ferramenta Hive | Dadant & Sons Inc | M00757 | usado para abrir colmeia |
| abelhas Recipiente para abelhas | de mel qualquer recipiente adequado para abrigar e armazenar abelhas de mel será suficiente | ||
| Ponta estreita de fórceps de peso pena | Bioquip | 4748 | usado para selecionar abelhas individuais |
| 9 cm (diâmetro) Placa de Petri | Fisher Scientific | S01778 | arena usada para conter abelhas individuais durante o rastreamento de vídeo |
| Dispositivo de gravação (câmera) | Basler | acA-1300-60gm | qualquer dispositivo que possa gravar o assunto claramente e transferir o arquivo para um computador será suficiente |
| GraphPad Prism | Graphpad | qualquer pacote de software estatístico será suficiente |
Referências
- Gallai, N., Salles, J. M., Settele, J., Vaissière, B. E. Economic valuation of the vulnerability of world agriculture confronted with pollinator decline. Ecol Econ. 68 (3), 810-821 (2009).
- van Engelsdorp, D., Meixner, M. D. A historical review of managed honey bee populations in Europe and the United States and th....
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Reimpressões e permissões
