Reabsorção de ácidos biliares de intestino-dependente e feedback a inibição da síntese hepática de ácidos biliares é importante para a saúde e homeostase sistêmica. Neste estudo, descrevemos um modelo do rato para ressecção ileal avaliar a toxicidade no intestino de rato, overaccumulation e má-absorção induzida por ileectomy biliar.
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Artigo de método
Overaccumulation induzida por Ileectomy biliares no intestino de rato
* These authors contributed equally
Neste artigo
Resumo
Resumo
Ressecção intestinal é uma abordagem terapêutica comum para doenças humanas tais como a obesidade, doença inflamatória intestinal, doença de Crohn e câncer de cólon que muitas vezes resulta em do intestino curto grave síndrome, como os efeitos adversos incluindo diarreia de ácidos biliares, desidratação, distúrbios do eletrólito e má absorção de nutrientes. Aqui apresentamos um modelo murino de ressecção ileal, denominado ileectomy, para avaliar a comunicação de tecido e a manutenção da homeostase sistêmica. Após a ressecção ileal, circulação de sangue é permanentemente desprovida do hormônio endócrino específicas do íleo fator de crescimento 15 (FGF15), que libera sua endócrino inibição da síntese de ácidos biliares no fígado. Em combinação com o aumento da produção e abolida a reabsorção de ácidos biliares após remover o íleo, ratos que se submeteram à cirurgia sofrem overaccumulation de sais biliares no intestino e diarreia associada, morbidade e mortalidade. Romance de uso do modelo cirurgia introduzido neste estudo pode fornecer insights mecanicistas e funcionais sobre ileal controle da regulação metabólica sistêmica na fisiologia e na doença.
Introdução
Na investigação biomédica moderna, modelos animais geneticamente manipulados são amplamente utilizados para respigar insights sobre doenças humanas. Em particular, tecido ou célula específica ganho e perda de funções dos genes têm sido costumava estudar Regulamento molecular, bem como efeitos biológicos induzidos. Apesar dos avanços em manipular o alvo genes na vivo, existem limitações persistentes. Primeiro, muitas células ou tecidos exclusões específicas afetará múltiplos órgãos. Por exemplo, exclusão de gene epiteliais eliminará a expressão no epitélio de vários tecidos. Além disso, mesmo se a exclusão é restrita a um tecido específico, controle espacial é....
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Protocolo
protocolo animal foi revisado e aprovado pelo Comitê de uso caso Western Reserve University School of Medicine e institucional Cuidado Animal e foi conduzido de acordo com o National Institutes of Health (NIH) guia para a Cuidado e uso de animais de laboratório (8ª edição, 2011). Os ratos foram sacrificados pelos métodos compatíveis com as diretrizes do American veterinária Medical Association (AVMA) para eutanásia de animais (edição de 2013). Camundongos machos, de 8-16 semanas C57Bl/6J, foram utilizados no presente protocolo. Os ratos foram alojados em um ambiente de ciclo claro/escuro de 12 h.
1. pré-operatório preparação
- rat....
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Resultados
Os procedimentos para ileectomy são mostrados na Figura 1. A primeira etapa inclui a preparar a pele abdominal de rato, fazendo uma incisão abdominal e utilizando retractores expor totalmente o intestino (Figura 1A-C). Em seguida, se localizava o ceco de rato (Figura 1D); dado que o seu tamanho e forma tornam um marco facilmente identificável. O ceco, íleo e parte do.......
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Discussão
Para realizar uma ileectomy bem sucedida, a artéria mesentérica superior deve ser ligada com antecedência para bloquear o suprimento de sangue ao segmento resecting. O segmento ileal isquêmico girará roxo escuro depois da ligadura. O segmento ileal, então deve ser completamente ressecado. Assegurar um suprimento de sangue normal para as extremidades retidas. Isto é essencial para evitar a remoção inadequada e sangramento, que pode facilmente causa falha cirúrgica devido à necrose isquêmica após a sutura. Durante a anasto.......
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Divulgações
Os autores não têm nada para divulgar.
Agradecimentos
Esta pesquisa é suportada pelo Tom Peterson Foundation e NIH grant R01-HL119780 (Jain, MK).
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Microscópio de dissecção | Olympus | SZ61 | Para cirurgia |
| Controlador de temperatura para animais | Physitemp Instruments, Inc. | TCAT-2LV | Para controle de temperatura corporal |
| Vaporizador anestésico Isoflurano | VetEquip | 911104 | Para anestesia |
| Pinça de dissecção | Ferramentas de Belas Ciências, Inc. | 11274-20 | Para cirurgia |
| Tesoura | Ferramentas de Belas Ciências, Inc. | 14084-08 | Para cirurgia |
| Porta-agulhas | Roboz Instrumento Cirúrgico Co. | RS-7882 | Para cirurgia |
| Micro facas-lâmina de agulha | Fisher Scientific | 10318-14 | Para cirurgia |
| Sutura monofilamentar 6-0 | Ethicon | 1698G | Para fechamento da pele abdominal |
| 7-0 sutura de seda | Ethicon | 766G | Para ligadura |
| 8-0 sutura monofilamentar | Ethicon | 1714G | Para anastomose |
| Esponjas cirúrgicas | Dynarex Corp. | 3333 | Para cirurgia |
| Pequenos aplicadores com ponta de algodão | Fisher Scientific | 23-400-118 | Para cirurgia |
| Isoflurano | Piramal Healthcare Limited | 66794-013-25 | Para anestesia |
| Cloridrato de buprenorfina | Reckitt-Benckiser Pharmaceuticals | 12496-0757-1 | Para analgesia |
| Injeção de cloreto de sódio a 0,9% B | . Braun Medical Inc. | 0264-7800-10 | Para lavagem/injeção |
| Solução de preparação de iodopovidona | Dynarex Corp. | 1413 | Para preparação da pele |
| Pomada veterinária | Dechra | 17033-211-38 | Para proteção ocular |
| Loção removedora de cabelo | Igreja & Dwight Co., Inc. | Para preparação da pele | |
| Unidade de terapia intensiva | ThermoCare | FW-1 | Para recuperação pós-cirúrgica |
| Recuperação DietGel ClearH2O | 72-06-5022 | Para recuperação pós-cirúrgica | |
| Kit de tecido gorduroso e fibroso de RNA total Aurum | Bio-Rad | 7326830 | Para isolamento de RNA |
| supermix de transcrição reversa iScript para RT-qPCR | Bio-Rad | 1708841 | Para ensaio de transcrição reversa |
| TaqMan fast advanced master mix | Applied Biosystems/Life Technologies | 4444965 | Para análise de QPCR |
| Kit de ensaio de ácido biliar total | Genzyme Diagnostic | DZ042A-K01 | Para ensaio de ácido biliar |
| C57BL/6J | O Laboratório |
Referências
- McLeod, R. S. Surgery for inflammatory bowel diseases. Dig Dis. 21, 168-179 (2003).
- Hancock, L., Windsor, A. C., Mortensen, N. J. Inflammatory bowel disease: the view of the surgeon. Colorectal Dis. 8, 10-14 (2006).
- Polle, S. W., Bemelman, W. A.
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Reimpressões e permissões
