Крысы модель Связывание печени раздела и воротной вены перевязку процедура поэтапного гепатектомии (ALPPS)

Summary

Вызывая быстрое печени гипертрофия, с помощью сопоставления раздела печени и воротной вены перевязки для балетмейстер гепатектомии (ALPPS) было предложено для резекции границы опухоли резектабельными печени. Эта модель может разъяснить механизмы, участвующие в быстрой гипертрофия и позволяет тестирование препаратов, которые поощряют или блокировать ускорение регенерации.

Abstract

Последние клинические данные поддержки агрессивной хирургической подход к первичных и метастатических опухолей печени. Для некоторых индикаций, как колоректальный метастазов в печени количество ткани печени оставил после резекции печени стал основным ограничивающим фактором резектабельность больших или множественные опухоли печени. Минимальное количество функциональных тканей требуется избежать тяжелых осложнений пост гепатектомии печеночная недостаточность, которая имеет высокие показатели заболеваемости и смертности. Вызывая печени роста перспективных остатком до резекции больше установилась в хирургии печени, либо в виде эмболизации воротной вены, интервенционных радиологов или в виде воротной вены перевязки несколько недель до резекции. Недавно было показано, что регенерации печени более широкого и быстрого, когда Паренхиматозный перерезка добавляется лигирование воротной вены на первом этапе, а затем, после только одной недели ожидания, резекция осуществляется на втором этапе (связывание печени раздела и воротной вены перевязки для балетмейстер гепатектомии = ALPPS). ALPPS быстро стала популярной во всем мире, но был подвергнут критике за его высокой Постоперационная смертность. Механизм ускоренного и обширные роста, вызванного этой процедуры не хорошо понимают. Животные модели были разработаны для изучения физиологических и молекулярных механизмов ускоренной регенерации печени в ALPPS. Этот протокол представляет модель крыса, которая позволяет механистический разведки ускоренной регенерации.

Introduction

Размер печени остатки ограничивает резектабельности опухолей печени. ¹ в общих, когда менее чем 25% печени ткани остался позади, пациент повышенному риску смерти от острой печеночной недостаточности из-за отсутствия метаболические функции всего организма в целом («слишком маленький размер синдром»). ² этот пост гепатектомии печеночная недостаточность является наиболее разрушительным осложнением после резекции печени. Поэтому врачи пытались заставить регенерации печени до резекция печени, манипулируя поток воротной вены. ³ было установлено, что, когда закрыта воротной вены, оставшаяся часть с потоком воротной вены начинает расти медленными темпами и таким образом можно увеличить до 60% в размер. Интервенционная воротной вены хирургического лигирования⁵ или ⁴ непроходимость обоих клинически созданы. ⁴ увеличение объема и функции печени является надежным, но темпы роста печени после портала непроходимость находится лишь около одной пятой по сравнению с ростом остатки печени после частичной гепатектомии. ⁶

Время, необходимое для печени расти-недель до месяцев, даже несмотря на то, что печень может регенерировать гораздо более быстрыми темпами после резекции. Таким образом печень является единственным органом, который растет вернуться к нормальной функции после удаления его частью. ⁷ Роман процедуры, вызывая регенерации печени аналогичные темпами, как после частичного hepactectomy была разработана группой хирургов кто обнаружил, что добавление перерезка между окклюзии и не закрыта часть печени индуцирует печени гипертрофия такими же темпами роста, как после резекции печени, но до резекции. ⁹ процедура инициирует быстрого гипертрофия 80% в течение недели в будущем печени остаток, который позволяет резекция опухолей обширные, главным образом неоперабельный, печени в течение недели. Эта процедура была вызвана «объединение разделов печени и портальной Вене перевязки для балетмейстер гепатектомии = ALPPS» и стал быстро популярен по всему миру. ¹⁰ несколько отчетов поддерживает расширение резектабельность пограничным резектабельными опухолей печени, достигнутые новой техники,¹¹ в то время как сложная хирургическая процедура была также критиковали за его высокой сложности курса. ^{12 , 13}

Развитие грызунов, а также большие животные модели медленных и быстрых гипертрофии предпринята после опубликования ALPPS в 2012 году позволить лучше Гистологическая характеристика и понимание механизмов и испытать воздействие наркотиков на разные темпы роста тканей печени у животных. Первые животные модель, разработанная была крыса модель. В этой модели быстрое гипертрофия после Паренхиматозный перерезка между правой и левой части средний лепесток ускоренной регенерации право средний лепесток. ¹⁴ различных модель была представлена позже в мыши. В этой модели был резецируется левой боковых лепестков и ветвей воротной вены на каждый лепесток печени за исключением левой средней доли были связаны. ¹⁵ в то же время, большие животные модели ALPPS в свиней были описаны как хорошо. ¹⁶

Для изучения физиологических механизмов как изменения потока и давления в воротной вены, перфузии и оксигенации тканей печени крысы модель превосходит модель ALPPS в мышах. Еще одно преимущество над моделью мышиных крысы является, что в модели крыс нет необходимости для резекции левой боковых лепестка,¹⁵ , которые могут загрязнить эффекты резекции печени с теми ALPPS. В отличие от крыс модель не снижает печени клеточной массы. Свинья модель использует правой задней доли как растущей доли, но свинья печени весьма lobulated. Таким образом трудно создать перерезка самолет в уже тонкие ткани мост между правой задней и передней правой доле. В противоположность этому средний лепесток в крыс состоят из двух частей, которые поставляются отдельно от воротной вены и Паренхиматозный перерезка плоскости могут быть созданы легко между ними с использованием микрохирургической техники. Наличие небольших животных компьютерная томография (КТ) и/или магнит-резонансной томографии (МРТ) позволяет очень точно количественная оценка объемной роста между воротной вены перевязкой только и воротной вены перевязки и добавлен перерезка, которая имеет важное значение для проверки любой модели быстрого гипертрофия печени.

Представленные здесь протокол описывает хирургической техники и процедуры, используемые для объемного проверки и физиологических характеристик модели медленных и быстрых гипертрофия после перевязки воротной вены и воротной вены перевязки с перерезка, соответственно в крыс.

Protocol

Все эксперименты в этом протоколе были утверждены ветеринарные власти кантона Цюрих, Швейцария (№ 60/2014). Кроме того все экспериментальные шаги были выполнены в строгом соответствии с руководящими принципами экспериментов с животными, Швейцарская академия медицинских наук (МСС) и руко?…

Representative Results

Две различные хирургические процедуры лигирования воротной вены (ПВЛ) и ПВЛ с перерезка (ПВЛ + T) результат в совершенно разных роста кинетики. ПВЛ индуцирует объем умеренное увеличение в течение 3 дней, тогда как в ПВЛ + T может быть намного больше право средний лепесток (…

Discussion

Этот протокол представляет животной модели ALPPS с его быстрое гипертрофия индуцированных PVL + T, что приблизительно удваивает увеличение объема в течение 3 дней, по сравнению с PVL одиночку. ¹⁷ право середине печени доли используется в качестве модели для выращивания печени дол?…

Materials

Isoflurane, 250ml bottles	Attane, Piramal, Mumbai, India	LDNI 22098	Standard vet. equipment
Tec-3 Isofluorane Vaporizer	Ohmeda, GE-Healthcare, Chicago, IL	not available anymore	Standard vet. equipment
Buprenorphine (Temgesic)	Indivior, Baar, Switzerland	7680419310353	GTIN-number
Vitamine A ointment	Bausch&Lomp, Zug, Switzerland	7680223980247	GTIN-number
Atropine sulfate 0.5mg/ml	Sintetica SA, Mendrisio, Switzerland	7680565330045	GTIN-number
Microsurgery microscope	Olympus, Tokio, Japan	SZX10	Standard vet. equipment
Betadine	Mundipharma, Basel, Switzerland	7680342821377	GTIN-number
Sponges	Carl Roth GmbH, Karlsruhe, Germany	NK83.1	Mini-sponges
Abdominal Wall retractors	N/A	N/A	Self-made from paper clips and Q-Tips
3-0 silk	Ethicon, Sommerville, NJ	K872H	Standard surgical
Scissors	World precision instruments (WPI), Sarasota, FL	503371	Standard microsurgical
Adson forceps	World precision instruments (WPI), Sarasota, FL	501244-G	Standard microsurgical
Fine tips microforceps	World precision instruments (WPI), Sarasota, FL	501976	Tips need to be polished regularly
Curved fine tips microforceps	World precision instruments (WPI), Sarasota, FL	504513	Essential to go around the portal vein branches
6-0 LOOK black braided silk	Surgical Specalities Corporation, Wyomissing, PA	SP114	Spool, precut prior to the procedure
2-0 silk sutures	Ethicon, Sommerville, NJ	K833	Standard surgical
5-0 maxon sutures	Covidien, Dublin, Ireland	6608-21	Standard surgical
Bipolar microforceps	Sutter, Freiburg, Germany	780148SGS	Essential for parenchymal transection
Q-tips small	Carl Roth GmbH, Karlsruhe, Germany	EH11.1	Standard surgical
Q-tips big	Carl Roth GmbH, Karlsruhe, Germany	XL54.1	Standard surgical
G30 needle	Terumo, Tokyo, Japan	NN-3013R	Standard anesthesia equipment
2mm volume flow probe	Transonic Systems, Ithaca, NY	MA-2PS	Smallest available probe for HAT-311 flow meter
Transonic flow meter	Transonic Systems, Ithaca, NY	HAT-311 Transsonic flow QC meter	One of the  first generation flow flow meters for surgery
ExiTron nano 12,000	Miltenyi Biotech, Bergisch Gladbach, Germany	130-095-698	Nanomoloecular contrast medium that opacifies liver and spleen
G26 intravenous catheter	Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ	391349	Standard anesthesia equipment
Quantum FX MicroCT	Perkin Elmer, Waltham, MA	N/A	Standard small animal CT scanner at the institute of physiology, University of Zürich
OsiriX 8.0	Pixmeo Sarl, Geneva, Switzerland	N/A	Public domain software : www.pixmeo.com