/

/

Selectieafhankelijke en onafhankelijke generatie van CRISPR / Cas9-gemedieerde Gene Knockouts in zoogdiercellen

JoVE Journal
Genetics

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Genetics

Selection-dependent and Independent Generation of CRISPR/Cas9-mediated Gene Knockouts in Mammalian Cells

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Selectieafhankelijke en onafhankelijke generatie van CRISPR / Cas9-gemedieerde Gene Knockouts in zoogdiercellen

DOI:

10.3791/55903-v

•

11:35 min

•

June 16, 2017

•

Erin L. Sternburg, Kristen C. Dias, Fedor V. Karginov

¹Cell Biology and Neuroscience,University of California, Riverside

Chapters

00:05Title
00:57Transfection of CRISPER Component into Cultured Cells and Drug Selection
02:31Isolation of Clonal Populations
03:53Screening Candidates by Dot Blot
06:30Screening Candidates by Colony PCR
08:59Results: Knockout Cell Lines Generated by Two CRISPER/Cas9 Methods
10:40Conclusion

Summary

Automatic Translation

Recente vooruitgang in het vermogen om somatische cellijnen genetisch te manipuleren, biedt een groot potentieel voor basis en toegepast onderzoek. Hier presenteren wij twee benaderingen voor CRISPR / Cas9 gegenereerde knockout productie en screening in zoogdiercellijnen, met en zonder het gebruik van selecteerbare markers.

Tags

CRISPR/Cas9 Gene Knockout Nonhomologous End Joining Homology-directed Repair T-REx-293 Cells Transfection Drug Selection Clonal Isolation

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Grootbrengen en Double-stranded RNA-gemedieerde gen knock-down in het verbergen Kever,<em> Dermestes maculatus</em

Gebruikmaking van een fluorescentie PCR-capillaire gelelektroforese techniek voor CRISPR Genotype / Cas9-gemedieerde knockout mutanten in een High-throughput Format

Een standaard methodiek te onderzoeken ter plaatse mutageniteit als een functie van punt mutatie reparatie gekatalyseerd door CRISPR/Cas9 en SsODN in menselijke cellen

Generatie van een gen-verstoord Streptococcus mutans stam zonder Gene klonen

CRISPR/Cas9-gemedieerde gerichte integratie In Vivo met behulp van een homologie-gemedieerde einde deelname aan gebaseerde strategie

Een Protocol voor de productie van Integrase-deficiënte lentivirale vectoren voor CRISPR/Cas9-gemedieerde Gene knock-out in cellen verdelen

Efficiënte productie en identificatie van CRISPR/Cas9-gegenereerd Gene uitsparingen in de modelsysteem Danio rerio

Formaldehyde-bijgewoonde isolatie van regelgevende elementen maatregel chromatine toegankelijkheid in zoogdiercellen

Hoogefficiënte Gene verstoring van lymfkliertest en menselijke hematopoïetische voorlopercellen door CRISPR/Cas9

Voorbereiding en genetische modificatie van Nonhuman primaat hematopoietische stamcellen en voorlopercellen

Read Article