ह्यूमन मेंटल सेल लिंफोमा के एक Xenograft माउस मॉडल में ट्यूमर Engraftment
Summary
मेंटल सेल लिंफोमा (MCL) बी कोशिका विकार का इलाज करने के लिए एक मुश्किल है और चिकित्सा विज्ञान के अध्ययन और विकसित करने के लिए प्राथमिक MCL के एक xenograft माउस मॉडल स्थापित करने के लिए समान रूप से मुश्किल है । यहां, हम चूहों में MCL xenografts की सफल स्थापना का वर्णन करने में मदद अपने अंतर्निहित जीवविज्ञानी समझते हैं ।
Abstract
बी लिम्फोसाइटों प्रतिरक्षा कोशिका परिसंचरण में प्रमुख खिलाड़ी है और वे मुख्य रूप से घर के लिए और लसीकावत् अंगों में रहते हैं । जबकि सामांय बी कोशिकाओं केवल पैदा करना जब टी लिम्फोसाइटों, oncogenic बी कोशिकाओं के जीवित रहने और अपरिभाषित अंग niches में autonomously विस्तार से उत्तेजित । मेंटल सेल लिंफोमा (MCL) एक ऐसे बी सेल विकार है, जहां रोगियों की औसत जीवित रहने की दर 4-5 साल है । प्रभावी तंत्र की जरूरत के लिए यह कहता है जिसके द्वारा इन कोशिकाओं के होमिंग और engraftment को अवरुद्ध किया जाता है ताकि रोगियों के अस्तित्व और दीर्घायु को बढ़ाया जा सके । इसलिए, vivo में होमिंग तंत्र को अवरुद्ध करके MCL चिकित्सीय की प्रभावकारिता का अध्ययन करने के लिए एक xenograft माउस मॉडल को विकसित करने का प्रयास अत्यंत महत्वपूर्ण है । मानव कोशिका xenotransplantation के लिए पशु प्राप्तकर्ताओं का विकास प्रारंभिक चरण दवाओं का परीक्षण करने के लिए लंबे समय तक पीछा किया गया है, के रूप में प्रासंगिक पूर्व नैदानिक माउस मॉडल नए चिकित्सीय एजेंटों स्क्रीन करने के लिए महत्वपूर्ण हैं । इस पशु मॉडल मानव भ्रष्टाचार अस्वीकृति से बचने के लिए और मानव रोगों के लिए एक मॉडल स्थापित करने के लिए विकसित की है, और यह विभिन्न लिंफोमा प्रकार के रोग प्रगति का अध्ययन करने के लिए और उंमीदवार दवाओं के लिए नैदानिक परीक्षण प्रदर्शन करने के लिए एक अत्यंत उपयोगी उपकरण हो सकता है hematologic द्रोही, MCL की तरह. हम एक xenograft माउस मॉडल है कि एक उत्कृष्ट संसाधन के लिए अध्ययन और MCL के लिए उपंयास चिकित्सीय दृष्टिकोण विकसित करने के रूप में काम करेंगे की स्थापना की ।
Introduction
प्रकृति द्वारा लिम्फोसाइटों प्रतिरक्षा निगरानी में एक प्रमुख भूमिका निभाते हैं, और लिम्फोसाइट ्े बढ़ते प्रतिजन विशिष्ट उन्मुक्ति1,2में एक महत्वपूर्ण कदम है । इस प्रक्रिया में थाइमस से रक्त प्रवाह के लिए भोले टी लिम्फोसाइटों का प्रवास शामिल है, और वहां से माध्यमिक लसीकावत् अंगों, लिम्फ नोड्स, Peyer के पैच, या तिल्ली, जहां वे cognate एंटीजन को पूरा शामिल है । बी लिम्फोसाइटों अस्थि मज्जा में अंतर और माध्यमिक लसीकावत् अंगों के रोम में भोली कोशिकाओं के रूप में विस्थापित3। इन बी कोशिकाओं में से कुछ उनके रिसेप्टर के साथ प्रतिजन बाँध और विशिष्ट टी कोशिकाओं द्वारा सक्रिय कर रहे हैं. प्रसार और विभेदन इन बी कोशिकाओं के कूप के मेंटल जोन में गैर सक्रिय, भोली बी कोशिकाओं धक्का । सक्रिय कोशिकाओं को तो स्मृति बी कोशिकाओं में अंतर कर सकते हैं, जो गश्ती शरीर, या immunoglobulin में परिपक्व प्लाज्मा कोशिकाओं है कि अस्थि मज्जा4की ओर पलायन स्रावित ।
MCL तब होता है जब भोली बी मेंटल जोन में लिम्फोसाइटों को एक ट्यूमर में परिणत कर देती है. इन लिंफोमा कोशिकाओं लसीकावत् अंगों और पैदा करना के स्वतंत्र रूप से विशिष्ट टी लिम्फोसाइट नियंत्रण के microenvironment में रहते हैं । हालांकि, घनत्व के एक निश्चित चरण में वे इस आला से बचने के लिए और अंय अंगों में niches के लिए खोज में खून में reसंचारित । आसंजन अणुओं की जटिलता और chemokines और उनके रिसेप्टर्स की संकीर्णता को देखते हुए vivo में इस सेलुलर तस्करी का तंत्र खराब समझा जाता है और इसलिए चिकित्सा में बाधा उत्पन्न होती है । उपंयास तरीकों को प्रभावी ढंग से इस प्रवास की प्रक्रिया को रोकने के लिए नए microenvironments तक पहुंचने से लिंफोमा बी कोशिकाओं को रोक की जरूरत है ।
MCL बी सेल द्रोह का इलाज करने के लिए सबसे मुश्किल में से एक है । MCL के एक नवोत्पादित phenotype का विकास एक multistep झरना, अद्वितीय जीवविज्ञान संपत्तियों के अधिग्रहण की विशेषता का परिणाम है । निदान के समय, अधिकांश रोगियों (70%) पहले से ही एक प्रसार रोग के साथ मौजूद, तिल्ली, अस्थि मज्जा में extranodal भागीदारी का प्रदर्शन मामलों के बहुमत के साथ, और/या जठरांत्र संबंधी मार्ग5,6. इलाज रोगियों में, एक कुछ वर्षों के भीतर प्रतिरोधी ट्यूमर से पतन आम है, भले ही पारंपरिक कीमोथेरेपी अल्पावधि7,8में उच्च छूट दरों लाती है । यहां हम एक नया रोग मॉडल है कि मदद कर सकता है वर्तमान MCL प्रसार और उसके अंतर्निहित जीवविज्ञानी: हम एक मानव MCL xenograft माउस मॉडल है कि रोगियों की प्राथमिक ट्यूमर कोशिकाओं से उत्पंन की स्थापना की । हमें उंमीद है कि इस मॉडल MCL प्रसार के खिलाफ चिकित्सकीय रणनीतियों के विकास में मदद मिलेगी, और संभवतः इष्टतम निदान और पलटा रोगियों के उपचार के लिए नए नैदानिक दृष्टिकोण प्रदान करते हैं ।
Protocol
Representative Results
Discussion
नैदानिक परीक्षणों दवाओं है कि विकास के एक उन्नत चरण में कर रहे हैं के लिए संभव है, लेकिन दवा की खोज के लिए इस्तेमाल नहीं किया जा सकता । प्रारंभिक चरण की दवाओं का परीक्षण करने के लिए मानव कोशिका xenotransplantation के ?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस कार्य को Ligue Genevoise contre le Cancer, शौकीन डॉ. Dubois Ferriere दिनु-Lipatti, Oncosuisse KPS-ocs, ocs-02260-08-2008 और 2914-02-2012, और स्विस राष्ट्रीय विज्ञान फाउंडेशन अनुदान 31003A_156760 और 310030-153456 द्वारा समर्थित किया गया था ।
Materials
| Ficoll-paque media | GE Healthcare | 17-1440-02 | for separation of mononuclear cells |
| RPMI Medium 1640 | Gibco-Life technologies | 61870-010 | for dilution of blood sample |
| Phosphate Buffered Saline (PBS) | Sigma-Aldrich | D8537 | washing of cells |
| Bovine Serum Albumin (BSA) | Sigma-Aldrich | A8412 | for preparation of PBS with 1% BSA used in washing cells during isolation |
| CD19-APC700 | Beckman Coulter | B49212 | human pan-B cell marker |
| CD20-APC | Beckman Coulter | A21693 | human pan-B cell marker |
| CD20-ECD | Beckman Coulter | IM3607 | human pan-B cell marker |
| CD5-PC 5.5 | Beckman Coulter | PN A70203 | human T cell marker |
| CD23-PE | Pharmingen | 555711 | Cell surface protein typically absent in MCL |
| CD45 KO | Beckman Coulter | B36294 | Pan-leucocyte marker |
| CD200-PE | Pharmingen | 552475 | Cell surface protein typically absent in MCL |
| NOD scid gamma (NSG) mice | Charles River Laboratories | 5557 | used to develop MCL xenografts in this study |
| Easy sep Human B cell enrichment kit | Stem cell technologies | 19054 | used to enrich B cells to obtain pure cells for injecting into mice |
| FACS | Beckman Coulter | Navios | used to characterize MCL sample and to study the organs for MCL engraftment |
| 1X ammonium chloride potassium buffer | red blood lysis buffer (NH4Cl 8,024 mg/l; KHCO3 1,001 mg/l; EDTA.Na2·2H2O 3.722 mg/l ) |
Referências
- Baggiolini, M., Dewald, B., Moser, B. Human chemokines: an update. Annu Rev Immunol. 15, 675-705 (1997).
- Baggiolini, M. Chemokines and leukocyte traffic. Nature. 392, 565-568 (1998).
- Janeway, C. A., Travers, P., Walport, M., Shlomchik, M. J. . Immunobiology: The Immune System in Health and Disease. , (2001).
- De Silva, N. S., Klein, U. Dynamics of B cells in germinal centres. Nat Rev Immunol. 15 (3), 137-148 (2015).
- Cohen, P. L., Kurtin, P. J., Donovan, K. A., Hanson, C. A. Bone marrow and peripheral blood involvement in mantle cell lymphoma. Br. J. Haematol. 101, 302-310 (1998).
- Meusers, P., Hense, J., Brittinger, G. Mantle cell lymphoma: diagnostic criteria, clinical aspects and therapeutic problems. Leukemia (Baltimore). 11 (Suppl 2), S60-S64 (1997).
- Herrmann, A., et al. Improvement of overall survival in advanced stage mantle cell lymphoma. J Clin Oncol. 27 (4), 511-518 (2008).
- Martin, P., et al. Intensive treatment strategies may not provide superior outcomes in mantle cell lymphoma: overall survival exceeding 7 years with standard therapies. Ann Oncol. 19 (7), 1327-1330 (2008).
- Iyengar, S., et al. Characteristics of human primary mantle cell lymphoma engraftment in NSG mice. Br J Haematol. 173 (1), 165-169 (2016).
- Klco, J. M., et al. Functional heterogeneity of genetically defined subclones in acute myeloid leukemia. Cancer cell. 25 (3), 379-392 (2014).
- Kerbel, R. S. Human tumor xenografts as predictive preclinical models for anticancer drug activity in humans: better than commonly perceived-but they can be improved. Cancer Biol Ther. 2 (4 Suppl 1), S134-S139 (2003).
- Johnson, J. I., et al. Relationships between drug activity in NCI preclinical in vitro and in vivo models and early clinical trials. Br. J. Cancer. 84, 1424-1431 (2001).
- Scholz, C. C., Berger, D. P., Winterhalter, B. R., Henss, H., Fiebig, H. H. Correlation of drug response in patients and in the clonogenic assay with solid human tumour xenografts. Eur. J. Cancer. 26, 901-905 (1990).
- Doñate, C., Vijaya Kumar, A., Imhof, B. A., Matthes, T. Frontline Science: Anti-JAM-C therapy eliminates tumor engraftment in a xenograft model of mantle cell lymphoma. J Leukoc Biol. 100 (5), 843-853 (2016).
