Tümör Engraftment insan Mantle hücreli lenfoma, Xenograft fare modeli
Summary
Mantle hücreli Lenfoma (MCL) bir B hücre bozukluğu tedavi etmek zordur ve eşit bir xenograft fare modeli eğitim ve tedavi geliştirmek için birincil MCL kurmak zordur. Burada, onun temel Biyoloji anlamak farelerde MCL xenografts başarılı kurulması açıklayın.
Abstract
B lenfositler anahtar oyuncular bağışıklık hücre dolaşım ve onlar çoğunlukla ev sahipliği ve lenfoid organlarda bulunan. Normal B hücreleri yalnızca T lenfositler tarafından uyardığında çoğalırlar, oncogenic B hücreleri hayatta kalmak ve özerk olarak tanımlanmamış organ niş genişletin. Mantle hücreli Lenfoma (MCL) bir tür B hücresi, hastalarin medyan sağkalım oranı 4-5 yıl nerede hastalıktır. Bu etkili mekanizmalar tarafından posta ve bu hücrelerin engraftment hayatta kalma artırmak için engellenen ihtiyacı ve uzun ömürlü hastalar için çağırır. Bu nedenle, izleme mekanizması içinde vivo engelleyerek MCL tedavi etkinliğinin çalışmaya xenograft fare modeli geliştirmek için çaba son derece önemlidir. Erken sahne uyuşturucu test etmek için insan hücre xenotransplantation hayvan alıcılarına gelişimi uzun takip, ilgili preklinik fare modelleri ekran yeni terapötik ajanlar için çok önemli olduğu gibi. Bu hayvan modeli insan greft reddi önlemek ve insan hastalıkları için bir model kurmak için geliştirilen ve hastalık ilerleme farklı Lenfoma türlerinden çalışmaya ve preklinik için aday ilaçların test gerçekleştirmek için son derece yararlı bir araç olabilir hematolojik maligniteler, MCL gibi. Çalışma ve MCL için yeni tedavi yaklaşımları geliştirmek için mükemmel bir kaynak olarak görev yapacak bir xenograft fare modeli kurduk.
Introduction
Lenfositler doğası gereği immün gözetim içinde önemli bir rol oynamaktadır ve lenfosit kaçakçılığı antijen belirli bağışıklık1,2montaj kritik bir adımdır. Bu işlem geçiş saf T lenfositlerin kan akışına timus ve soydaş antijenleri buluştuğu orada ikincil lenfoid organlara, lenf düğümleri, Peyer’s yamalar veya dalak, dahil olmak üzere içerir. B lenfositler kemik iliğinde ayırt etmek ve saf hücreler olarak ikincil lenfoid organlara3köklerinin geçirilir. Bazı bu B hücrelerinin antijen ile onların reseptör bağlamak ve belirli T hücreleri tarafından aktif hale gelir. Yayılması ve bu B hücrelerinin farklılaşma folikül manto bölgeye sigara-harekete geçirmek, naif B hücreleri iter. Aktif hücre sonra vücut devriye veya kemik iliği4‘ e göç plazma hücreleri salgılayan immünglobulin içine Olgun Hücreler içine bellek B ayırt edebilir.
Naif B lenfositler manto bölgedeki tümör dönüştürdüğünüzde MCL oluşur. Bu Lenfoma hücreleri lenfoid organlar microenvironment içinde bulunan ve belirli T lenfosit kontrol bağımsız olarak çoğalırlar. Ancak, yoğunluğu belirli bir aşamada onlar bu niş kaçış ve diğer organlarda nişler için arama kan recirculate. Adezyon molekülleri karmaşıklığı ve karışıklık kemokinler ve onların reseptörleri, göz önüne alındığında bu hücresel kaçakçılığı vivo içinde mekanizmasının kötü anlaşılmaktadır ve bu nedenle terapi engellemektedir. Roman yöntemleri etkili Lenfoma B hücreleri yeni microenvironments ulaşmasını önlemek için bu geçiş süreci engellemek için gereklidir.
MCL B hücre maligniteler tedavisi en zor biridir. MCL neoplastik bir fenotip biyolojik özellikleri benzersiz edinimi ile karakterize bir multistep çağlayan sonucu gelişmedir. Tanı zaman çoğu hasta (% 70) Dissemine hastalık ile çoğu durumda dalak, kemik iliği ve/veya gastrointestinal sistem5,6Ekstranodal tutulum sergilenmesi ile zaten var. Tedavi edilen hastalarda, konvansiyonel kemoterapi yüksek remisyon oranları kısa vadeli7,8indükler olsa bile bir kaç yıl içinde dayanıklı tümör tarafından nüks yaygındır. MCL yayılması ve onun temel Biyoloji anlamak yardımcı olabilir yeni bir hastalık modeli mevcut burada: hastaların birincil tümör hücreleri kökenli insan MCL xenograft fare modeli kurduk. Biz bu model MCL yayılması karşı tedavi stratejileri geliştirmek ve muhtemelen en iyi tanı ve Relaps hastaların tedavisi için yeni klinik Perspektifler sağlar yardımcı olacağını umuyoruz.
Protocol
Representative Results
Discussion
Klinik çalışmalar gelişmiş bir gelişme aşamasında olan, ancak ilaç keşfi için kullanılan ilaçlar için mümkündür. Hayvan insan hücre xenotransplantation alıcılarına erken sahne ilaçları test amacıyla geliştirmek için çabalarını uzun takip edilmiştir. Burada insan greft reddi önler ve MCL gibi insan hastalıkları için bir model oluşturabilir bir hayvan modeli mevcut. Bu şu anda insan tümör engraftment ve tümör büyüme mekanizmaları incelemek için bir sanat devlet xenograft modelidi…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu eser Ligue Genevoise contre le kanser, tarafından desteklenen Fondation Dr Dubois Ferriere Dinu-Lipatti, Oncosuisse KPS-OCS, OCS-02260-08-2008 ve 2914-02-2012 ve İsviçre Ulusal Bilim Vakfı Hibe 31003A_156760 ve 310030-153456.
Materials
| Ficoll-paque media | GE Healthcare | 17-1440-02 | for separation of mononuclear cells |
| RPMI Medium 1640 | Gibco-Life technologies | 61870-010 | for dilution of blood sample |
| Phosphate Buffered Saline (PBS) | Sigma-Aldrich | D8537 | washing of cells |
| Bovine Serum Albumin (BSA) | Sigma-Aldrich | A8412 | for preparation of PBS with 1% BSA used in washing cells during isolation |
| CD19-APC700 | Beckman Coulter | B49212 | human pan-B cell marker |
| CD20-APC | Beckman Coulter | A21693 | human pan-B cell marker |
| CD20-ECD | Beckman Coulter | IM3607 | human pan-B cell marker |
| CD5-PC 5.5 | Beckman Coulter | PN A70203 | human T cell marker |
| CD23-PE | Pharmingen | 555711 | Cell surface protein typically absent in MCL |
| CD45 KO | Beckman Coulter | B36294 | Pan-leucocyte marker |
| CD200-PE | Pharmingen | 552475 | Cell surface protein typically absent in MCL |
| NOD scid gamma (NSG) mice | Charles River Laboratories | 5557 | used to develop MCL xenografts in this study |
| Easy sep Human B cell enrichment kit | Stem cell technologies | 19054 | used to enrich B cells to obtain pure cells for injecting into mice |
| FACS | Beckman Coulter | Navios | used to characterize MCL sample and to study the organs for MCL engraftment |
| 1X ammonium chloride potassium buffer | red blood lysis buffer (NH4Cl 8,024 mg/l; KHCO3 1,001 mg/l; EDTA.Na2·2H2O 3.722 mg/l ) |
Referências
- Baggiolini, M., Dewald, B., Moser, B. Human chemokines: an update. Annu Rev Immunol. 15, 675-705 (1997).
- Baggiolini, M. Chemokines and leukocyte traffic. Nature. 392, 565-568 (1998).
- Janeway, C. A., Travers, P., Walport, M., Shlomchik, M. J. . Immunobiology: The Immune System in Health and Disease. , (2001).
- De Silva, N. S., Klein, U. Dynamics of B cells in germinal centres. Nat Rev Immunol. 15 (3), 137-148 (2015).
- Cohen, P. L., Kurtin, P. J., Donovan, K. A., Hanson, C. A. Bone marrow and peripheral blood involvement in mantle cell lymphoma. Br. J. Haematol. 101, 302-310 (1998).
- Meusers, P., Hense, J., Brittinger, G. Mantle cell lymphoma: diagnostic criteria, clinical aspects and therapeutic problems. Leukemia (Baltimore). 11 (Suppl 2), S60-S64 (1997).
- Herrmann, A., et al. Improvement of overall survival in advanced stage mantle cell lymphoma. J Clin Oncol. 27 (4), 511-518 (2008).
- Martin, P., et al. Intensive treatment strategies may not provide superior outcomes in mantle cell lymphoma: overall survival exceeding 7 years with standard therapies. Ann Oncol. 19 (7), 1327-1330 (2008).
- Iyengar, S., et al. Characteristics of human primary mantle cell lymphoma engraftment in NSG mice. Br J Haematol. 173 (1), 165-169 (2016).
- Klco, J. M., et al. Functional heterogeneity of genetically defined subclones in acute myeloid leukemia. Cancer cell. 25 (3), 379-392 (2014).
- Kerbel, R. S. Human tumor xenografts as predictive preclinical models for anticancer drug activity in humans: better than commonly perceived-but they can be improved. Cancer Biol Ther. 2 (4 Suppl 1), S134-S139 (2003).
- Johnson, J. I., et al. Relationships between drug activity in NCI preclinical in vitro and in vivo models and early clinical trials. Br. J. Cancer. 84, 1424-1431 (2001).
- Scholz, C. C., Berger, D. P., Winterhalter, B. R., Henss, H., Fiebig, H. H. Correlation of drug response in patients and in the clonogenic assay with solid human tumour xenografts. Eur. J. Cancer. 26, 901-905 (1990).
- Doñate, C., Vijaya Kumar, A., Imhof, B. A., Matthes, T. Frontline Science: Anti-JAM-C therapy eliminates tumor engraftment in a xenograft model of mantle cell lymphoma. J Leukoc Biol. 100 (5), 843-853 (2016).
