تخطيط الصدى في تحقيقات الإنجابية تجريبية على الفئران
Summary
ويصف هذه المخطوطة الأداة المساعدة من الموجات فوق الصوتية التي أجريت على إناث الفئران لتصميم نماذج تجريبية لتحقيق الصحة الإنجابية وأمراض النساء. ويرد شرح خطوة بخطوة عن كيفية تنفيذ التقييم أولتراسونوجرافيك.
Abstract
مع تطور التكنولوجيا الإنجابية المساعدة والقيود الأخلاقية للبحوث على البشر، استخدمت نماذج حيوانية الفئران على نطاق واسع في الطب الإنجابي. في الماضي، دراسة لتطوير الجهاز التناسلي في القوارض استناداً إلى الفحص النسيجي مرة واحدة من الأنسجة قصت. في الآونة الأخيرة، مع تطوير الاستبانة المهبل بالموجات فوق الصوتية، الموجات فوق الصوتية عالية الجودة يمكن الآن إجراء تقييم الأجهزة التناسلية للفئران، مما يتيح طريقة جديدة لدراسة الجهاز التناسلي. تم الحصول على الصور باستخدام نظام أولتراسونوجرافيك عالية الدقة. تم إجراء تخطيط الصدى أمراض النساء على 28 عمرها 8 الأسبوع غير الحوامل الجرذان والفئران سبراغ داولي الحوامل 5. ونحن تصف كيفية التعرف على الأجهزة التابعة للجهاز التناسلي والهياكل المرتبطة بها في وجهات النظر النمطية أثناء المراحل المختلفة من السفاد دورة. لون تدفق دوبلر استخدمت لقياس تدفق الدم في الشريان الرحمي وتقييم التغييرات نمط تدفق الدم الرحم أثناء المراحل المختلفة للحمل. لقد أظهرنا أن الاستكشاف بالموجات فوق الصوتية طريقة مفيدة لتقييم التغييرات في الأجهزة التناسلية الداخلية. استخدامها يثير إمكانية إجراء تجارب إضافية، بما في ذلك الإجراءات الطبية أو الجراحية، ويوفر القدرة على رصد التغيرات سونوجرافيك للأجهزة الداخلية دون التضحية بالحيوانات.
Introduction
نماذج حيوانية الفئران قد استخدمت على نطاق واسع في الطب التناسلي، بما في ذلك في الجنين وزرع المبيض1،2. بيد في الماضي، دراسة تطوير الجهاز التناسلي في القوارض واستند الفحص النسيجي مرة واحدة من الأنسجة قصت، ولم يكن من الممكن في الفئران3دراسة طولية التغيرات اليومية الجهاز التناسلي. الموجات فوق الصوتية وقد استخدمت على نطاق واسع في ساعدت التكنولوجيا الإنجابية في البشر لأكثر من 30 عاماً، ولكن فقط تم تطبيق هذه التكنولوجيا قيمة إلى الفئران مؤخرا.
كان هدفنا وضع نهج أولتراسونوجرافيك لتقييم الأجهزة التناسلية للفئران سبراغ داولي لتصميم نماذج تجريبية لتحقيق الإنجاب وأمراض النساء وإثبات هذا الإجراء نظراً لمعرفتنا، وهناك لا منشورات تصور الحالية فيما يتعلق بهذا الإجراء. يصف لنا إجراء الفحص أولتراسونوجرافيك من الجهاز التناسلي للأنثى في الفئران والنتائج أولتراسونوجرافيك هذا التشريح وتدفق الدم الشريان الرحمي باستخدام الموجات فوق الصوتية عالية الوضوح. يمكننا رصد الخصائص بطانة الرحم والمبايض وتدفق الدم الشريان الرحمي في الحيوانات غير الحوامل في مراحل مختلفة من دورة السفاد لتقييم الاختلافات الكبيرة في سمك بطانة الرحم والمبيض مورفولوجيا وتدفق الدم الرحم في مراحل مختلفة من دورة السفاد، مماثلة للمرأة. ونحن تستخدم معدات الموجات فوق الصوتية عالية الجودة مع تردد 70 ميغاهيرتز ومستوى قرار من 30 ميكرون. وكان هدفنا الأخرى لتقييم التغيرات في المقاومة لتدفق الدم الرحم في الجرذان الحوامل. يسمح هذا الأسلوب لدراسة التغيرات اليومية في الأجهزة الإنجابية دون التضحية بالحيوانات.
وهناك عدة صعوبات تقنية في استخدام الموجات فوق الصوتية على الفئران. وتشمل هذه الصعوبات: بطانة الرحم الفئران أرق كثير من الإناث بشرية4. صعوبة في تصوير المبيضين الفئران قد نسبت إلى الجلد أكثر سمكا وعضلات جدار البطن في الفئران، مما أدى إلى تخفيف شبه الكامل ل الموجات فوق الصوتية5، والشريان الرحمي أكثر بكثير من الصعب العثور في غير الحوامل الفئران. أننا قد تحل العديد من المشاكل التقنية مع الإجراء، ونظهر لتلك المشاكل التي ما زالت، كيفية التقليل إلى أدنى حد لها.
رصد نجاح التغييرات سونوجرافيك في الأجهزة التناسلية للفئران دون الحاجة إلى التضحية بالحيوانات سيتم فتح إمكانية بناء المستقبل نماذج حيوانية للطب الإنجابي وغيرها من العمليات الجراحية.
Protocol
Representative Results
Discussion
بسبب التعديلات الإجرائية واستكشاف الأخطاء وإصلاحها التي كانت مطلوبة في هذه الدراسة، على الرغم من أن هدفنا من تحديد جميع مراحل السفاد دورة في الفئران باستخدام الموجات فوق الصوتية، كنا غير قادر على العثور على أي اختلافات كبيرة. نحن افترض أن هذه الصعوبات قد يكون بسبب دورة السفاد يدوم سوى بض?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
هذا البحث أيده قسم التجريب الحيوان بجامعة مورسيا والتوليد وجامعة “قسم التوليد في مورسيا”. ونحن نشكر جميع الفنيين العاملين في سيب (en Biomédicas البحوث التجريبية Centro)، قسم التجريب الحيوان من جامعة مورسيا، الذين تعاونت في هذا المشروع.
Materials
| Vevo3100 high-resolution in vivo micro-imaging system* | Visual Sonics, inc. | www.visualsonics.com/products | |
| Vevo integrated rail system including physiological monitoring unit. | Visual Sonics, inc. | www.visualsonics.com/products | |
| MX400 Transducter | Visual Sonics, inc. | www.visualsonics.com/products | |
| Vevo Lab Software | Visual Sonics, inc. | www.visualsonics.com/products | |
| HSD: Sprague Dawley SD | Envigo, inc. | Rat strain | |
| Lubricating Gel | General Supply | ||
| CIBERTEC CA-EAC20 Anesthesia Trolley System | Cibertec S.A | Anesthesia Machine | |
| Ecogel 100 ultrasound gel | Eco-Med Pharmaceuticals Inc. | ||
| Hair removal lotion (Nair) | General Supply | ||
| Isoflurane | Esteve Veterinaria | Inhalatory anesthesia | |
| * Required software is Vevo software including B-Mode application, pulse wave Doppler application, and vascular strain analysis tools package. |
Referências
- Hunter, R. K., et al. Adipose-Derived Stromal Vascular Fraction Cell Effects on a Rodent Model of Thin Endometrium. PLoS ONE. 10 (12), e0144823 (2015).
- Wang, H., Dey, S. K. Roadmap to embryo implantation: clues from mouse models. Nat Rev Genet. 7 (3), 185-199 (2006).
- Pistner, A., Belmonte, S., Coulthard, T., Blaxall, B. C. Murine Echocardiography and Ultrasound Imaging. J Vis Exp. (42), (2010).
- Lohmiller, J. J., Swing, S. P. Reproduction and Breeding. The Laboratory Rat. , 147-164 (2006).
- Jaiswal, R. S., Singh, J., Adams, G. P. High-resolution ultrasound biomicroscopy for monitoring ovarian structures in mice. Reprod Biol Endocrinol. 7 (69), (2009).
- Kim, G. H. Murine Fetal Echocardiography. J Vis Exp. (72), (2013).
- Jing, Z., Qiong, Z., Yonggang, W., Yanping, L. Rat bone marrow mesenchymal stem cells improve regeneration of thin endometrium in rat. Fertil Steril. 101 (2), 587-594 (2014).
- Mu, J., Adamson, S. L. Developmental changes in hemodynamics of uterine artery, utero- and umbilicoplacental, and vitelline circulations in mouse throughout gestation. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 291 (3), H1421-H1428 (2006).
- Anderson, C. M., Lopez, F., Zhang, H. Y., Pavlish, K., Benoit, J. N. Reduced uteroplacental perfusion alters uterine arcuate artery function in the pregnant Sprague-Dawley rat. Biol Reprod. 72 (3), 762-766 (2005).
- Hongmei, L., et al. Ultrasound Molecular Imaging of Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2 Expression for Endometrial Receptivity Evaluation. Theranostics. 5 (2), 206-217 (2015).
