İdrar yolu Junction obstrüksiyonu kusurları Metilen mavisi boya enjeksiyonla değerlendirilmesi
Summary
Metilen mavisi boya enjeksiyon renal pelvis içine idrar yolu junction obstrüksiyonu kusurları değerlendirme sırasında fare embriyonik üriner sistem geliştirme kolaylaştırır. Burada, renal pelvis içine Metilen mavisi boya enjeksiyon için bir protokol açıklanmıştır.
Abstract
İdrar yolu junction obstrüksiyonu kusurları Konjenital anomalileri hydronephrosis ve hydroureter inducing vardır. Fare idrar yolu junction obstrüksiyonu kusurları Üriner sistemin içinde Metilen mavisi Boya akışı izleme tarafından tespit edilebilir. Metilen mavisi boya perinatal embriyonik böbrek renal pelvis enjekte edilir ve boya akışı hidrostatik basınç uygulandıktan sonra Üreter ve mesane Lümen içine böbrek renal pelvis üzerinden izlenir. Boya birikimi normal perinatal idrar kesesi Lümen belirgin olacak ama idrar yolu engellerden oluşursa renal pelvis ve anormal bir üreter, bitiş noktası arasında kısıtlı olacak. Bu yöntem idrar yolu Kavşağı engelleri onayı ve görselleştirme hydronephrosis ve hydroureter kolaylaştırır. Bu el yazması için idrar yolu Kavşağı engelleri onaylamak için renal pelvis içine Metilen mavisi boya enjeksiyon protokolünü açıklar.
Introduction
Üriner sistemin bir böbrek ve Üreter ve ortak bir mesane ve üretra ile oluşur. Üriner sistemin ana kan su ve elektrolit dengesi yöneterek vücut homeostazı korumak için fonksiyonudur. Böbrekler denetim elektrolit konsantrasyonları ve asit-baz dengesi kan filtre ve aşırı su ve solutes ve metabolitleri dahil olmak üzere atık salgılamak idrar üretmek. İdrar sonra böbrek renal pelvis üzerinden üreter nerede depolandığı ve sonuçta ortadan üretra1yolu ile tek yönlü bir şekilde bladderin için aracılığıyla taşınır.
Üreter düz borular nephric kanalı kaynaklanan vardır. Sonra fare embriyonik günde 10.5 (E10.5), tomurcuklanma nephric kanalı üzerinden üreter SAP hisli ve çok katmanlı bir yapıda fare arasında geçirimsiz olan urothelium adı verilen E12.5 ve E16.5 ayırır. Üreter sapı çevreleyen Mezenkimal hücreler de iç stromal hücreler, orta kalın düz kas hücreleri ve dış adventitial fibroblastlar içeren üç katmanlara farklı. Renal pelvis başlatılıyor üreteral Peristaltik dalgalar E16.5 içinde fare1başlayarak üretilen idrar2,3, taşımak için mesane üreter duvara düz kas tabakası yoluyla yayılır.
Konjenital anomalileri, böbrek ve idrar yolu (CAKUT) en sık görülen genetik hastalıklar, insan fetusa1,4, yaklaşık % 1’mevcut arasındadır ve fenotipleri hydronephrosis ve hydroureter de dahil olmak üzere çeşitli oluşur. İdrar hydronephrotic böbrek ve hydroureter oluşumu böbrek ve üreter sonucu anormal birikimi. Bir hydronephrosis ve/veya hydroureter oluşumu idrar yollarının bir obstrüksiyon nedenidir. Ureteropelvic junction obstrüksiyonu (UPJO) anormal idrar akışı proksimal Üreter ve renal pelvis, hydronephrosis ve proksimal hydroureter bükülme veya kalıcı katlanır5daralma sonuçlanan arasında bir tıkanma nedeniyle neden olur, 6. Buna ek olarak, mesane duvar veya üreme sistemi içine distal üreter Ektopik ekleme ureterovesical junction obstrüksiyonu (UVJO) denir. UVJO hydronephrosis ve hydromegaureter oluşumu7,8de tetikleyebilir. Vesicoureteric reflü (VUR) bir ek ureterovesical Kavşağı (UVJ) kusurdur. VUR doğru UVJ, böbrek mesane retrograd idrar akışı ile karakterizedir. UVJO için karşılaştırıldığında, VUR ile perinatal embriyo belirgin şişmiş hydronephrotic böbrek veya şiddetli hydroureter fenotip9gösterme.
Laboratuvar fare idrar akışı Metilen mavisi gibi bir boya enjeksiyon renal pelvis9içine tarafından incelenebilir. İnjectedmethylene mavi çözüm idrar yörünge renal pelvis Üreter ve mesanenin içine üzerinden iz olur. Hydronephrosis boya böbrek yönelik kabul edilebilir. UPJO Boya akışı şişmiş renal pelvis5ile proksimal üreter, tıkanması olarak tespit edilebilir. Genişletilmiş bir çapı belirtilen üreter herhangi bir genişleme hydroureter örneği gösterir. Son olarak, boya birikimi mesane duvar veya sitenin üreme sistemi ile şişmiş hydronephrotic böbrek UVJO gösterir ve hydromegaureter7,10santim açılmış. VUR algılamak için boya çözüm mesane enjekte edilir ve sonraki retrograd akışı böbrek9‘ izlenir.
Burada, perinatal embriyo içine renal pelvis Metilen mavisi boya enjeksiyon için bir protokol sunulmuştur. Bu iletişim kuralı renal pelvis Üreter ve mesanenin idrar akışı izleme sağlar ve UPJO veya UVJO gibi potansiyel idrar yolu Kavşağı engel olunur.
Protocol
Representative Results
Discussion
Fare böbreklerde fonksiyonel E16.5 başında ve bir boya enjeksiyon testi bu zaman noktasından teorik olarak mümkün. Ancak, böbrek boya çözüm ile enjekte edilir çok küçük ve bu fenotipleri anormal idrar taşıma nedeniyle inşa idrar ikincil bir etkisi olduğundan fenotipleri hydronephrosis ve hydroureter gibi açıkça gözlenir değil. UPJO veya UVJO, gibi engellerin üzerinden bu fenotipleri şişmiş böbrek ve üreter tarafından E18.5 açık durumdadır. E19.5 veya neonatal pups embriyolar daha büyük …
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Dr. Alan O. Perantoni (CDBL/ncı/NIH) bu el yazması sunulması destek için teşekkür ederiz. Ben de Dr Michael Hall (CDBL/ncı/NIH) ve Nirmala Sharma (CDBL/ncı/NIH) bu el yazması düzenleme için teşekkür ederim. Ben onun mükemmel fare yetiştiriciliği için Lai Thang (SAIC) için minnettarım. Bu eser kanser araştırmaları için Ulusal Kanser Enstitüsü sağlık ve Merkezi Ulusal Enstitüleri tarafından desteklenmiştir.
Materials
| Methylene blue | Sigma-Aldrich | M9140 | |
| Quality Biological Inc. NORMAL SALINE – 500ML | Fisherscientific | 50-983-204 | |
| 3 mL disposable syringe with BD Luer-Lok tip | BD | 309657 | |
| Acrodisc Syringe Filters with Supor Membrane | Pall corporation | 4614 | |
| Exel Scalp Vein (Butterfly) Sets; 27G x 3/4" 12" | EXELINT | 26709 | |
| Delicate Operating Scissors | Roboz Surgical Instrument Co. | RS-6702 | |
| Micro Dissecting Forceps | Roboz Surgical Instrument Co. | RS-5135 | |
| Dumont Tweezers; Pattern #5 | Roboz Surgical Instrument Co. | RS-5045 | |
| BD PrecisionGlide Needles 30 G x 1/2" | BD | 305106 |
Referências
- Rasouly, H. M., Lu, W. Lower urinary tract development and disease. Wiley Interdiscip Rev Syst Biol Med. 5, 307-342 (2013).
- Kispert, A. T-Box Genes in the Kidney and Urinary Tract. Curr Top Dev Biol. 122, 245-278 (2017).
- Bohnenpoll, T., Kispert, A. Ureter growth and differentiation. Semin Cell Dev Biol. 36, 21-30 (2014).
- Nicolaou, N., Renkema, K. Y., Bongers, E. M., Giles, R. H., Knoers, N. V. Genetic, environmental, and epigenetic factors involved in CAKUT. Nat Rev Nephrol. 11, 720-731 (2015).
- Tripathi, P., Wang, Y., Casey, A. M., Chen, F. Absence of canonical Smad signaling in ureteral and bladder mesenchyme causes ureteropelvic junction obstruction. J Am Soc Nephrol. 23, 618-628 (2012).
- Aoki, Y., et al. Id2 haploinsufficiency in mice leads to congenital hydronephrosis resembling that in humans. Genes Cells. 9, 1287-1296 (2004).
- Yun, K., Perantoni, A. O. Hydronephrosis in the Wnt5a-ablated kidney is caused by an abnormal ureter-bladder connection. Differentiation. 94, 1-7 (2017).
- Uetani, N., Bouchard, M. Plumbing in the embryo: developmental defects of the urinary tracts. Clin Genet. 75, 307-317 (2009).
- Murawski, I. J., Watt, C. L., Gupta, I. R. Assessing urinary tract defects in mice: methods to detect the presence of vesicoureteric reflux and urinary tract obstruction. Methods Mol Biol. 886, 351-362 (2012).
- Weiss, A. C., et al. Nephric duct insertion requires EphA4/EphA7 signaling from the pericloacal mesenchyme. Development. 141, 3420-3430 (2014).
