यहां, हम निमेटोड Caenorhabditis एलिगेंस एक बहुमुखी मेजबान मॉडल के रूप में पेश करने के लिए माइक्रोबियल संपर्क का अध्ययन ।
हम एक मॉडल मेजबान के रूप में एक माइक्रोबियल बातचीत का अध्ययन करने के लिए Caenorhabditis एलिगेंस का उपयोग विधि प्रदर्शित करता है । रोगाणुओं आंत रोग के लिए प्राथमिक स्थान बनाने आहार के माध्यम से पेश कर रहे हैं । निमेटोड आंत संरचनात्मक और कार्यात्मक स्तनधारी आंतों की नकल है और यह औपनिवेशीकरण के सूक्ष्म अध्ययन के लिए उत्तरदायी बनाने पारदर्शी है । यहां हम बताते है कि रोगजनकों रोग और मृत्यु का कारण बन सकती है । हम बदल डाह दिखाने कि माइक्रोबियल म्यूटेंट की पहचान करने में सक्षम हैं । इसके बायोटिक तनाव को संरक्षित जंमजात प्रतिक्रिया सी. एलिगेंस मेजबान जंमजात प्रतिरक्षा बातचीत के पहलुओं की जांच करने के लिए एक उत्कृष्ट प्रणाली बनाता है । हम बताते है कि दोहरे oxidase जीन में उत्परिवर्तनों के साथ मेजबान प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों का उत्पादन नहीं कर सकते है और माइक्रोबियल अपमान का विरोध करने में असमर्थ हैं । हम आगे दिखा रहा है कि यह माइक्रोबियल विकास के अवरोधकों के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता द्वारा प्रस्तुत अस्तित्व परख की बहुमुखी प्रतिभा का प्रदर्शन । यह परख भी उपंयास रोधी एजेंटों के विकास के लिए लक्ष्य के रूप में कवक डाह कारकों को खोजने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है, साथ ही साथ एक को आगे को उजागर मेजबान-सूक्ष्म बातचीत का अवसर प्रदान करते हैं । इस परख के डिजाइन ही अच्छी तरह से उच्च प्रवाह पूरे जीनोम स्क्रीन को उधार देता है, जबकि भविष्य के उपयोग के लिए क्रायो-कीड़े की रक्षा करने की क्षमता यह एक लागत प्रभावी और आकर्षक पूरे पशु मॉडल के अध्ययन के लिए बनाता है ।
C. एलिगेंस से अधिक ५० वर्षों के लिए एक शक्तिशाली मॉडल जीव के रूप में इस्तेमाल किया गया है । 1960 के दशक में, दक्षिण अफ्रीका के जीवविज्ञानी सिडनी ब्रेनर का उपयोग करने के लिए C. एलिगेंस का बीड़ा उठाया है ंयूरॉन विकास, वैज्ञानिकों की एक लंबी वंश के लिए जिस तरह फ़र्श का अध्ययन करने के लिए सेल और पशु जीव विज्ञान के विभिंन पहलुओं में सूत्रकृमि । इस वंश नोबेल पुरस्कार विजेताओं क्रेग मेलो और एंड्रयू आग उनके RNAi काम के लिए1, रॉबर्ट Horvitz और जॉन Sulston अंग विकास और apoptosis2,3,4, और मार्टिन Chalfie पर अपने काम के लिए शामिल ग्रीन फ्लोरोसेंट प्रोटीन पर अपने काम के लिए5। हालांकि इस मॉडल जीव परंपरागत रूप से आणविक और विकास जीवविज्ञान का अध्ययन किया गया है, पिछले 15 वर्षों में, शोधकर्ताओं ने Pseudomonas सहित विभिन्न मानव रोगजनकों के जीव विज्ञान की जांच करने के लिए सी. एलिगेंस का उपयोग करने के लिए शुरू कर दिया है aeruginosa, Staphylococcus स्ताफ्य्लोकोच्चुस, साल्मोनेला enterica, और Serratia marcescens6,7,8,9,10. इन अध्ययनों से पता चला कि मानव-रोगज़नक़ बातचीत में शामिल तंत्र के कई सूत्रकृमि में संरक्षित कर रहे हैं, लेकिन यह भी है कि वहां कुछ प्रतिरक्षा तंत्र है कि इस मॉडल जीव11,12के लिए अद्वितीय हैं । प्रकृति में, C. एलिगेंस मिट्टी में मौजूद घूस रोगजनकों से खतरों की एक किस्म मुठभेड़ों और यह एक मजबूत चयनात्मक विकसित करने के लिए और अपनी आंतों लुमेन में एक परिष्कृत जंमजात प्रतिरक्षा प्रणाली को बनाए रखने के दबाव प्रदान की गई है । जीन और आंत्र लुमेन के संरक्षण में शामिल तंत्र के कई अत्यधिक संरक्षित तत्वों है कि भी उच्च स्तनधारी11,13में मौजूद द्वारा किया जाता है । C. एलिगेंस इसलिए साल्मोनेला enterica14, शिगेला boydii15, या Vibrio हैजा16जैसे गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल रोगजनकों का अध्ययन करने के लिए एक महान मॉडल का प्रतिनिधित्व करता है ।
यहां हम एक मॉडल मेजबान के रूप में इस तरह के सी. albicansके रूप में संक्रामक एजेंटों का अध्ययन करने के लिए सी. एलिगेंस की उल्लेखनीय बहुमुखी प्रतिभा पर प्रकाश डाला । C. एलिगेंस एक मॉडल मेजबान के रूप में डाह के लिए उच्च प्रवाह स्क्रीनिंग के लिए अनुमति देता है कि कम खर्चीला और समय लेने वाली एक माउस मॉडल है, जो आमतौर पर कैंडिडिआसिस४२अध्ययन के लिए प्रयोग किया जाता है की तुलना में ।
इस अध्ययन में, हम बताते है कि इस मॉडल और assosiated अस्तित्व परख मज़बूती से संक्रमण प्रतिक्रिया करने के लिए महत्वपूर्ण मेजबान सहज प्रतिरक्षा प्रभाव का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है, रोगज़नक़ निर्धारकों कि ड्राइव डाह, और औषधीय यौगिकों कि कर सकते हैं रोगजनन में हस्तक्षेप करते हैं । पहले वर्णित परख के लिए भिंन है, इस विधि पशु के जीवनकाल में एक रोगज़नक़ के लिए जोखिम का अध्ययन करने का एक साधन प्रदान करता है, लार्वा मंच से वयस्कता के लिए, बजाय केवल वयस्कता मौत४३,४४। संक्षेप में, हमारे सी. एलिगेंस – सी. albicans मॉडल एक बहुमुखी और शक्तिशाली उपकरण है कि न केवल आनुवंशिक आधार है कि ड्राइव संक्रमण और उन्मुक्ति का अध्ययन करने के लिए, लेकिन यह भी चिकित्सीय हस्तक्षेप के लिए नए यौगिकों की पहचान करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है ।
1. निमेटोड ग्रोथ मीडियम (NGM) को तैयार करना मीडिया के 1 l के लिए, 20 ग्राम आगर, २.५ ग्राम कार्बनिक नाइट्रोजन स्रोत ( जैसे , bacto-peptone) और 3 ग्राम सोडियम क्लोराइड को 2 एल कुप्पी में मिलाएं । जोड़ें ९७५ मल के ब?…
सी. एलिगेंस संक्रमण और जीवन भर जोखिम पर सी. albicans है कि हम वर्णित है एक और रोगज़नक़ परीक्षण संशोधित किया जा सकता है के लिए अस्तित्व परख के लिए तरीके । एक और बैक्टीरिया या कवक के तरल संस्कृतियों किया ज?…
The authors have nothing to disclose.
इस काम पर प्रदर्शन किया और Worcester पॉलिटेक्निक संस्थान द्वारा समर्थित किया गया ।
Agar (granulated, bacterilogical grade) | Apex BioResearch Products | 20-248 | |
Aluminum Wire (95% Pt, 32 Gauge) | Genesee Scientific | 59-1M32P | |
Axiovision Zeiss Inverted Microscope | Axiovision Zeiss | ||
Bacto-Peptone | Fisher BioReagants | BP1420-500 | |
C. elegans strain Bli-3 | Caenorhabditis Genetics Center | Bli-3(e767) CB767 | |
Calcium Chloride | Fisher Scientific | BP51-250 | |
Cholesterol, Sigma Grade, minimum 99% | Sigma | C8667-25G | |
Disposable Culture Tubes (20 x 150 mm) | FIsherBrand | 14-961-33 | |
Dissection Microscope (NI-150 High Intensity Illuminator) | Nikon Instrument Inc. | ||
E. coli | Caenorhabditis Genetics Center | OP50 | |
GraphPad Prism (Survival Curve Analysis Software) | GraphPad Software | ||
LB Broth (Miller's) | Apex BioResearch Products | 11-120 | |
Magnesium Sulfate | Fisher Scientific | 10034-99-8 | |
Medium Petri Dishes (35 X 10 mm) | Falcon | 353001 | |
Potassium Phosphate monobasic | Sigma | P0662-500G | |
Sodium Chloride | Fisher Scientific | BP358-1 | |
Sodium Phosphate | Fisher Scientific | BP332-500 | |
Wildtype C. albicans SC5314 | ATCC | SC5314 | |
Wildtype C. elegans | Caenorhabditis Genetics Center | N2 |