고해상도 초음파 모니터 종양 발병 및 성장 췌장암 유전자 조작된 모델에서을 활용 하 여
Summary
이 문서에서는 유전자 조작된 췌장암 쥐에서 고해상도 초음파의 활용. 기본 목표 탐지 및 내 인 성 췌 장 종양의 평가 대 한 자세한 지침을 제공 하는.
Abstract
LSL-KraG12D / +; LSL-Trp53R172H / +; Pdx-1-Cre (KPC) 마우스 모델 췌장암에서 소설 치료 평가를 설립 하 고 자주 사용 유전자 변형 모델을 나타냅니다. 종양 발병 8 주 몇 달 사이 섹 모델 변수입니다. 따라서, 비-침략 적 이미징 도구는 화면 종양 발병 및 치료에 대 한 모니터 해야 합니다. 이 문제를 해결 하려면 다른 접근은 지난 년 동안 등장 했습니다. 고해상도 초음파 비 침해, 빠른 세션 시간 및 방사선 노출 없이 높은 이미지 해상도 같은 주요 장점이 있습니다. 그러나, 쥐에서 초음파 사소한 하 고 충분 한 해부학 지식을 이며 실용적인 기술을 성공적으로 전 임상 췌장암 모델에서 고해상도 초음파를 수행 하는 데 필요한. 다음 문서와 함께 내 생 췌장암 모델에 특히 초점 murine 모델에서 복 부 초음파에 대 한 자세한 체험 가이드 제공 됩니다. 또한, 일반적인 실수 및 그들을 피하기 위해 방법의 요약을 제공 합니다.
Introduction
유전자 조작된 마우스 모델 연구 밀접 하 게 인간의 발암1,2,3의 복잡 한 성격을 정리 하는 능력 때문에 증가 중요성을 얻고 있다. 하나는 가장 자주 췌장암 개발 연구 모델을 사용, 진행 및 치료 응답 종양 억제기 p534의 비활성화와 결합 하는 Kra oncogene에서 활성화 돌연변이 의해 특징입니다. 이 LSL KraG12D / +; LSL-Trp53R172H / +; Pdx-1-Cre (KPC) 마우스 모델 모방 침략 암 전 침략 적인 췌 장 intraepithelial neoplasia (PanIN) 병 변에서 단계별 진행. Phenotypically, 거의 모든 마우스는 출산 후 첫 6 개월 이내 PDAC를 개발. 그러나, 섹 모델 몇 개월4주 8에서 높은 변수 종양 발병을 밝혀 이식된 모델에 비해. 췌 장 종양에 도달 특정 크기 (지름 5-9 m m), 종양의 성장을 빠르게 가속 및 마우스5전 임상 시험 등록 해야 합니다. 따라서, 종양 발병 및 종양 크기의 정확한 탐지 물류 전 임상 연구 및 치료 모니터링에 대 한 필수적인 전제 조건입니다. 일반적으로, 몇 가지 방법을 같은 자기 공명 영상 (MRI)6,7,,89 또는 고해상도 초음파 단층 종양 검사 실시를 채택 될 수 있다 고 치료10. 각 기술은 그것의 장점과 단점이 있다. 비록 MRI-컴퓨터 단층 촬영 (CT) 또는-이미징 고해상도 데이터 수집 뿐만 아니라 정확한 볼륨 계산, 일반 진정에서 장시간된 시험 시간을 허용 하 고 매우 비싼 장비 필요, 그리고 자주 허용 하지 않습니다 시간의 긴 기간 동안 스캔. 대조적으로, 작은 동물 초음파 쥐11복 부 병 리에 대 한 화면을 사용할 수 있는 설정된 방법입니다. 이미징이 방법의 장점은 짧은 시간, 높은 해상도, 스캔 그리고 도플러 초음파 또는 대비 사용 가능성 향상 된 동시에 장기의 관류를 시각화 하기 위해 초음파 (CEUS). 그러나, 해 부 지식, 3D 상상력과 철저 한 실습은 올바른 이미지 해석 필요 합니다.
다음 문서에서 섹 모델에서 고해상도 초음파를 이용 하 여에 대 한 상세한 프로토콜 제공 됩니다. 또한, 표준 초음파 이미지 묘사 되며 조사에 대 한 오리엔테이션을 촉진 하기 위하여 기관 구조와 분류.
Protocol
Representative Results
Discussion
이 프로토콜, 췌 장 종양 유전자 조작된 마우스 모델에서 고해상도 복 부 초음파 이미징 사용 하 여 측정에 대 한 자세한 설명을 제공 합니다. 최근, Sastra 외. 췌 장 종양 마우스 모델, 하지만 준비 및 모든 추가 단계에 대 한 전제 조건11를 표시 했다 처리에 대 한 아무 시각된 지침을 계량 하는 방법 자세한 설명 출판. 이 원고의 전반적인 목표는 고해상도 초음파 쥐에 대 한 …
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 연구는 독일 Krebshilfe 에 의해 지원 되었다 (AN 최대 Eder 그룹: 110972), (SMB)에 DGVS 박사 논문 장학금 및 대학 의료 센터 괴팅겐에는 Else Kröner Fresenius 재단 장학금 (RGG)을. 우리 전문가 기술 지원 또한 블 룸 베르크와 Ulrike Wegner 감사합니다. 우리는 또한 유지 하는 마우스에 대 한 대학 의료 센터 괴팅겐의 동물 시설에서 모든 동물 기술자를 감사 합니다. 모든 실험은 독일 동물 복지 규정에 따라 수행 했다.
Materials
| Visual Sonics Vevo2100 High Resolution Ultrasound System, including imaging stage and anesthesia line | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | VS-11945 | |
| Vevo 2100 MicroScan Transducer MS-550-D (22-55MHz) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | VS-11874 | |
| Vevo Anesthesia System (anesthesia induction chamber with fresh and waste gas inlet) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | SA-12055 | |
| Vevo Imaging Station (working stage with nose cone for anesthesia supply) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | SA-11982 | |
| electronic pet clippers | Panasonic Marketing Europe, Germany | 5025232484324 | Panasonic ER-PA10-s |
| Labotect Hot plate | Labor tech Göttingen, Germany | 13854 | |
| eye cream (ophthalmic ointment) | Schülke&Mayr, Germany | 9080249 | |
| veterinary isoflurane | Abbvie, Germany | 4831867 | |
| depilatory cream | RB healthcare UK, United Kingdom | 8218535 | |
| 70% ethanol (v/v) in distilled water | TH. Geyer, Germany | 22941000 | |
| ultrasound gel | Asmuth, Germany | 13477 | |
| tissue wipes | Kimberly-Clark Germany, Germany | 7558 | |
| cotton tips | Meditrade, Germany | 75481116 | |
| glass bowl for ultrasound gel | ARC France, France | H1149 | |
| water bowl | W & P Trading Co., USA | B00K2P6PLQ | |
| gauze sponges | Fuhrmann, Germany | 960504 |
Referências
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