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Artigo de método

Avaliação da coagulação do Plasma no tecido do fígado em um modelo Animal grande na Vivo

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DOI:

10.3791/57355

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4 de agosto de 2018

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Neste artigo

Resumo

Aqui nós apresentamos um protocolo para avaliar experimentalmente a coagulação do plasma no tecido do fígado na vivo. Em um modelo de suínos, microcirculação é examinada pelo laser Doppler, profundidade de coagulação é medida histologicamente, temperatura no local de coagulação por termômetro infravermelho câmera termográfica e duto efeito de vedação é documentada por pressão de ruptura experimentos.

Resumo

Coagulação do plasma como uma forma de eletrocautério é usada em cirurgia de fígado por décadas para selar a superfície de corte grande fígada após grande hepatectomy para prevenir hemorragias em um estágio posterior. Os efeitos exatos de coagulação do plasma no tecido do fígado são examinados somente mal. No nosso modelo de suínos, os efeitos de coagulação podem ser examinados perto a aplicação clínica. Um combinado do laser Doppler fluxômetro e espectrofotômetro documentos microcirculação muda durante a coagulação, a profundidade do tecido de 8 mm canaliza, fornecendo informações quantificáveis sobre hemostasia além da impressão clínica subjetiva. A temperatura no local de coagulação é avaliada com uma termômetro infravermelho prior e post coagulação e com uma câmera termográfica durante a coagulação, a medição da temperatura do feixe de gás não é possível devido o limite superior dos dispositivos. A profundidade da coagulação é medida microscopicamente em hematoxilina/eosina manchada seções após a calibração de um micrômetro de objeto e dá uma informação exata sobre a configuração-coagulação profundidade-relação de poder. O efeito da selagem é examinado em ductos biliares, como não é possível para um Coagulador plasma selar vasos maiores. São realizados experimentos de pressão de ruptura na explantados órgãos para governar para fora a pressão arterial relacionados com efeitos.

Introdução

Coagulação de plasma de argônio (APC) é um instrumento amplamente utilizado em cirurgia abdominal por mais de três décadas,1,2. É uma técnica padrão para a realização da hemostasia secundária depois de superfície para evitar posteriores hemorragias3de corte principal hepatectomy selando o fígado. Coagulação do plasma é uma forma especializada de radiofrequência eletrocautério, que fornece a energia elétrica através de um arco de gás ionizado. Fornecendo monopolar hemostática electrotécnico, esta técnica sem contacto tem a vantagem de prevenir o eletrodo para manter o tecido

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Protocolo

Foram seguidas as regras regidas pela legislação alemã para estudos em animais, bem como princípios de laboratório Cuidado Animal (National Institutes of Health publicação Ed. 8, 2011). É dada permissão oficial do escritório governamental de cuidado animal (turismo für Natur, Umwelt und Verbraucherschutz Nordrhein-Westfalen, Recklinghausen, Alemanha).

1. os animais

  1. Use os porcos landrace alemão feminino (25-30 kg de peso) alojados em gaiolas abertas.
  2. Use 5 animais por grupo (argônio e hélio).
  3. Permitir que os animais se adapte ao ambiente pelo menos uma semana antes dos experimentos. Animais rápidos durante 24 h....

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Resultados

Microcirculação: Utilizar o dispositivo de diagnóstico para hemostasia após a coagulação do plasma pode ser demonstrada por alterações da microcirculação. Sangue capilar fluxo (exibido como unidades arbitrárias (AU)) diminui de um valor de base de 142.7 ± 76.08 AU para 57.78 ± 49.57 AU em 25 W dispositivo potência, para 48,5 ± 7.26 AU em 50 W e para 5,04 ± 1,31 AU em 100 W (Figura 4).

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Discussão

Modelos de roedores para cirurgia hepática são estabelecidos por um longo tempo16. No entanto, grandes modelos animais oferecem certas vantagens: nenhum equipamento microcirúrgico é necessária como equipamento operacional padrão para os seres humanos pode ser aplicado, técnicas cirúrgicas são comparáveis para uso clínico e métodos de avaliação clínica padrão podem ser transferido para os experimentos. Por exemplo, testes de sangue padrão clínico pode ser realizado sem a necessidade de métodos de e.......

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Divulgações

Os autores não têm nada para divulgar.

Agradecimentos

Os autores têm sem agradecimentos.

....

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Xilazina 20 mg/mLVetoquinol GmbHXilapan
Cetamina 100 mg/mLCeva GmbHCeva Injeção de
Cetamina Atropina 100 mg / 10 mLDr. Franz Kö hler Chemie GmbHAtropinsulfat Kö hler 100mg Amp.
PropofolFresenius Kabi GmbHPropofol 1% MCT Fresenius
FentanilKG Rotexmedica GmbHFentanil 0,5mg Rotexmedica
IsofluranoAbbot GmbHForene 100% (V/V) 250 mL
Solução de lactato de RingerBaxter Deutschland GmbHsódio 131mmol/l, potássio 5 mmol/l, cálcio 2 mmol/l, cloreto 111 mmol/l, lactato 29 mmol/l
Disinfactante cirúrgicoSchü lke & Mayr GmbHKodan Tinktur forte gefä rbt 1l 104804
Microscópio motorizadoNikon Instruments EuropeEclipse TE2000-E
Câmera de microscópioNikon Instruments EuropeDigitalsight DS-Qi1Mc
Software de imagemNikon Instruments EuropeNIS elements Vers. 4.40
Coagulador de plasmaSö ring GmbHCPC-1000
Gás argônioLinde AGArgon 4.8 
Gás hélioLinde AGHelium 4.8
O2CLEA Medizintechnik GmbHO2C Versão 1212com sonda LF-2 ou LF-3
Termómetro infravermelhoVoltcraftVOLTCRAFT IR 260-8S
Câmara termográficaInfraTec GmbHVarioCAM HD head 820
Software de análise termográficaInfraTec GmbHIRBIS 3
de hematoxilina de MayerMerck 1.09249
Solução de eosinaVWR International GmbHMerck 1.09844
Rollerpump Masterflex L/S easy LoadCole-Parmer Instrument Companymodelo 7518-10
PerfusorpumpB. Braun Melsungen AGPerfusor secura FT
Medidor de pressão digitalGreisinger eletrônicoGMH 3161
Perfusorserse, 50 mLB. Braun Melsungen AGREF 8728810 F
Linha Perfusor, Tipo IV Padrão, PVC Luer lockB. Braun Melsungen AGREF 8722960
de 3 vias, Dicofix C35CB. Braun Melsungen AGREF 16494 C
Silk 2-0. 3 métricaResorbaREF H5F
Vicryl 4-0 SutupakEthiconV1224H
NaCl 0,9 %B. Braun Melsungen AG
Solução torneira

Referências

  1. Link, W. J., Incropera, F. P., Glover, J. L. A plasma scalpel: comparison of tissue damage and wound healing with electrosurgical and steel scalpels. ArchSurg. 111, 392-397 (1976).
  2. Kwon, A. H., Inui, H., Kamiyama, Y. Su....

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Reimpressões e permissões

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