Summary

Bağırsak kısmi tıkanıklık bir fare modeli

Published: March 05, 2018
doi:

Summary

Bir kısmi veya tam tıkanma Şiddetli karın ağrısı, bulantı, kusma ve dışkı geçiş engelleme neden olabilir bağırsak bağırsak engelleri vardır. Bağırsak kısmi obsructions farelerde oluşturmak için bu yordamı patolojik hücre büyümesi ve ölüm bağırsak temel mekanizmaları eğitim güvenilirdir.

Abstract

Engel veya Peristaltik hareket engellemek, bağırsak engelleri, karın yapışıklıklar ve tümör büyümeleri de dahil olmak üzere en gastrointestinal (GI) hastalıklar tarafından neden olabilir. Ancak, mekanizmaları remodeling cep dahil ve neden, bağırsak engelleri kötü anlaşılır. Bağırsak engelleri çeşitli hayvan modeller geliştirilmiştir, ama fare modeli en maliyet/saat etkili. Fare modeli doğru şekilde gerçekleştirilir, yüksek mortalite oranına sahip bir bağırsak kısmi tıkanıklık (PO) cerrahi implantasyon kullanır. Buna ek olarak, uygun bir abluka kullanılmaz veya düzgün bir şekilde yerleştirilmiş hipertrofisi geliştirmek fareler PO cerrahi alma başarısız. Burada, biz çok düşük mortalite ile güvenilir ve tekrarlanabilir bağırsak engelleri üreten PO ameliyat için detaylı bir protokol tanımlamak. Bu iletişim kuralı küçük bağırsakta sindirim hareketi kısmen blokları ileum çevreleyen bir ameliyatla yerleştirilen silikon yüzük kullanır. Kısmi tıkanıklık sindirim hareketi durdurmak nedeniyle büyümüş haline bağırsak yapar. Dilatasyon bağırsak düz kas hipertrofisi aşamalı olarak ölüm nedenleri kadar 2 hafta içinde geliştirir yüzüğü ağız tarafında neden olmaktadır. Cerrahi PO fare modeli Hipertrofik bağırsak dokusu patolojik değişiklikler bağırsak hücreleri düz kas hücreleri (SMC), interstisyel hücreleri ve Cajal (ICC), PDGFRα+, dahil olmak üzere, eğitim için yararlı bir vivo içinde modeli sunar ve nöronal hücreleri bağırsak tıkanıklığı geliştirilmesi sırasında.

Introduction

Bir kısmi veya tam tıkanma sindirilmiş gıda, sıvı ve gaz bağırsak1ile hareket etmelerini engeller küçük veya büyük bağırsak bağırsak engelleri vardır. Tıkanıklık nedeniyle, kalınlaşmış olmak için bağırsak duvarlar2Lümen daralması tıkanma neden olmaktadır. Bağırsak tıkanıklığı karın yapışma doku oluşmasına neden olur karın veya pelvik ameliyatlar sonucunda veya iltihabi bağırsak hastalıkları (Crohn hastalığı), divertikülit, Fıtıklar, volvulusu, yapışıklıkları gibi GI bozuklukları ortaya çıkabilir, İnvajinasyon, kabızlık, dışkı sıkışması, Psödo obstrüksiyonu, kanser ve tümör3,4,5. Bu durumda bağırsak engelleri genellikle barsak6tunica muscularis hipertrofisi yol.

Lümen PO bağırsak şişkinlik neden olmaktadır ve düz kas tabakası kalınlığı yanıt olarak fonksiyonel peristaltizm7,8,9,10devam etmek gerek tıkanıklığı çevresinde artırır, 11,12,13. Bağırsak po hayvan modelleri fareler7, fareler10, eskiden şiling şimdi pigs11, köpekler12ve sürekli geliştirmek içinde benzer hipertrofisi kediler13 düz kas hipertrofisi incelemek için geliştirilmiştir bağırsak kas tabakaları.

Bağırsak PO bir fare modeli oluşturmak ve bağırsak engelleri vivo içindeçalışma için en uygun maliyetli yöntemidir. İnce bağırsak engelleri farelerde ileum çevreleyen cerrahi olarak yerleştirilmiş bir silikon ring kullanarak gerçekleştirilir. PO fareler hücreleri (Hiperplazi) erken bir artış ve bir artış sonra PO cerrahi8,15kas tabakası kalınlığı (hipertrofisi) gösterdi. SMC Hipertrofik koşulları14yanıt olarak düz kas katmanlar içinde büyüyen birincil plastik hücreleri ama ICC gibi diğer hücreleri ve SMC ile yakından ilişkili olan, aynı zamanda yeniden doldurulur PDGFRα+ hücreleri vardır. Biz daha önce PO fareler ince bağırsak hipertrofisi geliştirmek bildirdin hangi SMC son derece proliferatif7,15,16PDGFRα+ hücrelere dediferansiye. Diğer taraftan, ICC dejenere ve düz kas Hipertrofik katmanlar içinde bağırsak obsruction7geliştirilmesi sırasında kaybetti. Başka bir önemli yararı PO modelinin enterik sinir sistemi ve sinir motor desen yayılıyor değişiklikleri ikna etmek için onun kapasitesidir. Büyük yayılıyor fare ince bağırsak Nörojenik motor desen Nörojenik ve does değil istemek ICC ya da elektrik yavaş dalgalar17geçirme motor karmaşık (MMC), olduğunu. PO modeli MMC ve enterik sinir tarafından kısmi tıkanıklık nasıl remodeled içine açık anlayışlar sağlayabilir.

Burada, bir fare protokol silikon ring kullanarak bağırsak PO ameliyat için teklif ediyorum. PO cerrahi güvenilir bir şekilde alma fareler bağırsağın tunica muscularis hipertrofisi üretmek. Hipertrofik kas içinde SMC, ICC, PDGFRα+ve nöronal hücre önemli ölçüde remodeled.

Protocol

Aşağıdaki iletişim kuralı kurumsal hayvan bakım ve kullanmak Komitesi (IACUC) University of Nevada-Reno (UNR) hayvan kaynakları tarafından onaylandı ve araştırma hayvanlar kullanımı ile ilgili tüm kurumsal etik kuralları ile uyumludur. 1. hayvanlar. Olgun (4-6 hafta eski) C57BL/6 fareler arasında 20-30 g. ev laboratuvar fareler UNR hayvan kaynakları merkezi bir hayvan tesisi kolonisi Tartım elde edilir. 2. kısmi tıkanıklık cerrahi…

Representative Results

Kısmi obstrüksiyonu (PO) cerrahi olarak silikon ringin etrafında ileum ileocecal sfinkter yakın yerleştirerek bir ay önce fareler akımıdır. Bir kısmi tıkanıklık ileum içinde oluşturulan bu yüzüğü. (Böylece aynı zamanda bir yüzük olmadan açık yaş/cinsiyet gerçekleştirilmiştir) sahte operasyonlar fareler eşleşen ve bu farelerde herhangi bir belirti PO farelerde bulunan belli etmedi. Fare hızlı PO cerrahiden birkaç saat içinde yeniden elde etmek. İlk hafta…

Discussion

Biz sürekli olarak ve tekrarlanarak bağırsak PO cerrahi alan fareler insan bağırsak tıkanıklığı hareketini taklit eden nazik bağırsak düz kas hipertrofisi geliştirmek gösterdi. Bağırsak tıkanıklığı ameliyatları fareler7, fareler10, eskiden şiling şimdi pigs11, köpek kedi ve12 13de dahil olmak üzere farklı hayvanlar için geliştirilmiştir. Fare modeli bağırsak tıkanıklı…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Yazarlar Benjamin J Weigler, D.V.M., doktora teşekkür etmek istiyorum ve Walt Mandeville, D.V.M. (hayvan kaynakları ve kampüs katılıyor veteriner, University of Nevada, Reno) mükemmel hayvan hizmet için onların avukatı yanı sıra fareler sağlanan cerrahi işlemler.

Materials

Surgical drape Medical and veterinary supplies SMS40 40”X100 yards
Underpad, econ, pro plus Medical and veterinary supplies MSC281224 17×24”
Iris scissors Braintree scientific, Inc SC-i-130
Iris scissors Vantage V95-304
Dumont electronic & jeweler tweezers Dumont 98-180-3
Braided absorbable suture Covidien polysorb SL-5687G 5-0, polyglactin
Nylon non-absorbable mono filament AD surgical S-N618R13 6-0, nylon
Surgical blade Dynarex No.15
Needle holder Jacobson microvascular 36-1342TC 8.5 inch
Scalpel handle Flinn scientific AB1049
Microsurgical scissor WPI 503305
Petrolatum ophthalmic ointment Puralube VET 3.5 g
Fluriso (isoflurane) Vetone V1 502017 250 ml
Steri-strip reinforced skin closure 3M R1547
Surgical gloves Medline MSG2270
Ear loop face mask The safety zone RS700
Avant gauze non-woven sponges Caring PRM25444
Surgical cup Admiral  craft OYC-2 725-A42 2.5 oz
Swabstick ChloraPrep 260103 2% w/v Chlorhexidine  Gluconate (CHG) and 70% v/v Isopropyl Alcohol (IPA)
Cotton tipped applicator Puritan 806-WC
Buprenorphine Zoo pharm BZ8069317 1 mg/ml
Gentamycin sulfate Vetone G-6336-04 100 mg/ml
Fast acting gel cream remover Veet 8111002
Syringe AHS AH01T2516 1 ml with needle
Silicon ring VWR 60985-720 6 mm in length, 4 mm exterior diameter, 3.5 mm interior diameter
C57BL/6 mice The Jackson Laboratory 4-6 weeks old

Referências

  1. Millat, B., Guillon, F. Physiopathology and principles of intensive care in intestinal obstructions. Rev Prat. 43, 667-672 (1993).
  2. Tonelli, P. New developments in Crohn’s disease: solution of doctrinal mysteries and reinstatement as a surgically treatable disease. 1. The process is not a form of enteritis but lymphedema contaminated by intestinal contents. Chir Ital. 52, 109-121 (2000).
  3. Limsrivilai, J. Meta-analytic Bayesian model for differentiating intestinal tuberculosis from Crohn’s disease. Am J Gastroenterol. 112, 415-427 (2017).
  4. Dvorak, D., Adamova, Z., Bar, T., Slovacek, R. Internal hernia as a cause of small bowel obstruction. Rozhl Chir. 96, 34-36 (2017).
  5. Massani, M., Capovilla, G., Ruffolo, C., Bassi, N. Gastrointestinal stromal tumour (GIST) presenting as a strangulated inguinal hernia with small bowel obstruction. BMJ Case Rep. , (2007).
  6. Chen, J., Chen, H., Sanders, M., Perrino, B. A. Regulation of SRF/CArG-dependent gene transcription during chronic partial obstruction of murine small intestine. Neurogastroenterol Motil. 20, 829-842 (2008).
  7. Chang, I. Y., et al. Loss of interstitial cells of Cajal and development of electrical dysfunction in murine small bowel obstruction. J Physiol. 536 (Pt 2), 555-568 (2001).
  8. Liu, D. H., et al. Voltage dependent potassium channel remodeling in murine intestinal smooth muscle hypertrophy induced by partial obstruction. PLoS One. 9 (2), e86109 (2014).
  9. Guo, X., et al. Down-regulation of hydrogen sulfide biosynthesis accompanies murine interstitial cells of Cajal dysfunction in partial ileal obstruction. PLoS One. 7, e48249 (2012).
  10. Yang, J., Zhao, J., Chen, P., Nakaguchi, T., Grundy, D., Gregersen, H. Interdependency between mechanical parameters and afferent nerve discharge in hypertrophic intestine of rats. Am J Physiol-Gastr L. 310, G376-G386 (2016).
  11. Zhao, J., Liao, D., Yang, J., Gregersen, H. Biomechanical remodeling of obstructed guinea pig jejunum. J Biomech. 43, 1322-1329 (2010).
  12. Bowen, E. J., et al. Duodenal Brunner’s glade adenoma causing chronic small intestinal obstruction in a dog. J Small Anim Pract. 53, 136-139 (2012).
  13. Bettini, G., et al. Hypertrophy of intestinal smooth muscle in cats. Res Vet Sci. 75, 43-53 (2003).
  14. Macdonald, J. A. Smooth muscle phenotypic plasticity in mechanical obstruction of the small intestine. J Neurogastroenterol Motil. 20, 737-740 (2008).
  15. Ha, S. E., et al. Transcriptome analysis of PDGFRα+ Cells identifies T-types Ca2+ channel CACNA1G as a new pathological marker for PDGFRα+ cell hyperplasia. PLoS One. 12, e0182265 (2017).
  16. Park, C., et al. Serum response factor is essential for prenatal gastrointestinal smooth muscle development and maintenance of differentiated phenotype. J Neurogastroenterol Motil. 21, 589-602 (2015).
  17. Spencer, N. J., Sanders, K. M., Smith, T. K. Migrating motor complexes do not require electrical slow waves in the mouse small intestine. J Physiol. 553, 881-893 (2003).
  18. Langford, D. J., et al. Coding of facial expressions of pain in the laboratory mouse. Nat Methods. 7, 447-449 (2010).
  19. Terez, S. D., Notari, L., Sun, R., Zhao, A. Mechanisms of smooth muscle responses to inflammation. Neurogastroenterol Motil. 24, 802-811 (2012).
  20. Chen, W., et al. Smooth muscle hyperplasia/hypertrophy is the most prominent histological change in Crohn’s fibrostenosing bowel strictures: A semiquantitative analysis by using a novel histological grading scheme. J Crohns Colitis. 11, 92-104 (2017).
  21. Huizinga, J. D., Chen, J. H. Interstitial Cells of Cajal: Update on Basic and Clinical Science. Curr Gastroenterol Rep. 16, 363 (2014).
  22. Jirkof, P., Touvieille, A., Cinelli, P., Arras, M. Buprenorphine for pain relief in mice: repeated injections vs sustained-release depot formulation. Lab Animal. 49, 177-187 (2015).
  23. Spencer, N. J., Dinning, P. J., Brookes, S. J., Costa, M. Insights into the mechanisms underlying colonic motor patterns. J Physiol. 594, 4099-4116 (2016).
check_url/pt/57381?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
Ha, S. E., Wei, L., Jorgensen, B. G., Lee, M. Y., Park, P. J., Poudrier, S. M., Ro, S. A Mouse Model of Intestinal Partial Obstruction. J. Vis. Exp. (133), e57381, doi:10.3791/57381 (2018).

View Video