Un modello murino di ostruzione intestinale parziale
Summary
Ostruzioni intestinali sono un blocco parziale o totale dell’intestino che può causare dolore addominale, nausea, vomito e impedendo il passaggio delle feci. Questa procedura per la creazione di intestinale parziale ha pilastri in topi è affidabile a studiare i meccanismi alla base di crescita delle cellule patologiche e morte nell’intestino.
Abstract
Ostruzioni intestinali, che ostacolare o bloccano il movimento peristaltico, possono essere causati da aderenze addominali e più gastrointestinale (GI) malattie tra cui escrescenze tumorali. Tuttavia, il cellulare che ritocca meccanismi coinvolti nella, e causato da, ostruzioni intestinali sono capiti male. Sono stati sviluppati diversi modelli animali di ostruzioni intestinali, ma il modello del mouse è più costo/tempo efficace. Il modello del mouse utilizza l’impianto chirurgico di un’ostruzione intestinale parziale (PO) che ha un alto tasso di mortalità se non viene eseguita correttamente. Inoltre, topi che riceve la chirurgia PO non riescono a sviluppare ipertrofia se un adeguato blocco non viene utilizzato o non correttamente inserito. Qui, descriviamo un protocollo dettagliato per la chirurgia di PO che produce ostruzioni intestinali affidabili e riproducibili con un tasso di mortalità molto bassa. Questo protocollo utilizza un anello di silicone chirurgicamente posizionati che circonda l’ileo che blocca parzialmente movimento digestivo nell’intestino tenue. Il blocco parziale rende l’intestino diventa dilatato a causa l’arresto del movimento digestivo. La dilatazione dell’intestino induce l’ipertrofia del muscolo liscio sul lato orale dell’anello che progressivamente si sviluppa più di 2 settimane fino a quando non causa la morte. Il modello di mouse PO chirurgico offre un modello in vivo di ipertrofico tessuto intestinale utile per lo studio delle mutazioni patologiche delle cellule intestinali, compreso le cellule muscolari lisce (SMC), cellule interstiziali di Cajal (ICC), PDGFRα+e di un neurone cellule durante lo sviluppo dell’ostruzione intestinale.
Introduction
Ostruzioni intestinali sono un blocco parziale o totale nell’intestino piccolo o grande che impedisce il movimento attraverso l’ intestino1di cibo digerito, fluidi e gas. Dovuto l’ostruzione, il blocco induce le pareti intestinali per diventare ispessito, restringimento del lume2. Ostruzione intestinale può verificarsi a seguito di interventi chirurgici addominali o pelvici che causano la formazione di tessuto di aderenze addominali o da disturbi GI quali diverticolite, volvolo, Ernie, malattie infiammatorie croniche intestinali (morbo di Crohn), stenosi, invaginazione intestinale, stipsi, fecaloma, pseudo-ostruzione, cancri e tumori3,4,5. Ostruzioni intestinali in questi casi spesso portano all’ipertrofia della tunica fibre del intestino6.
PO del lume induce distensione intestinale e aumenta di spessore dello strato di muscolo liscio intorno l’ostruzione in risposta alla necessità di continuare la peristalsi funzionale7,8,9,10, 11,12,13. Modelli animali di PO intestinale sono stati sviluppati per studiare l’ipertrofia del muscolo liscio in topi7, ratti10, cavie11, cani12e gatti13 che costantemente sviluppare ipertrofia simile entro il strati di muscolatura intestinale.
Un modello murino di PO intestinale è il modo più efficace per generare e studiare ostruzioni intestinali in vivo. Ostruzioni del piccolo intestino sono effettuati nei topi utilizzando un anello di silicone inserito chirurgicamente che circondano l’ileo. I topi di PO hanno mostrato un aumento iniziale del numero di cellule (iperplasia) e un aumento in spessore di strato del muscolo (ipertrofia) dopo PO chirurgia8,15. SMC sono le cellule primarie di plastica che stanno crescendo all’interno strati di muscolo liscio in risposta alle condizioni ipertrofica14, ma altre cellule come ICC e le cellule PDGFRα+ che sono strettamente associati con SMC, inoltre vengono ripopolati. Precedentemente abbiamo riferito che i topi PO sviluppano ipertrofia nel piccolo intestino, in cui SMC sono dedifferenziate nelle cellule PDGFRα+ che sono altamente proliferative7,15,16. Al contrario, ICC sono degenerati e perso all’interno degli strati di muscolo liscio ipertrofico durante lo sviluppo di obsruction intestinale7. Un altro vantaggio importante del modello PO è la sua capacità di indurre i cambiamenti nel sistema nervoso enterico e propagare neurogene schemi motori. La propagazione principali modello neurogeno motore nelle piccole viscere del mouse è il complesso motore migrazione (MMC), che è neurogena e non necessita di ICC o elettrico onde lente17. Il modello PO può fornire chiare intuizioni come MMCs e nervi enterici sono stato rimodernati da ostruzione parziale.
Qui, vi proponiamo un protocollo murino per chirurgia intestinale PO utilizzando un anello di silicone. Topi che riceve la chirurgia PO attendibilmente producono ipertrofia in tunica fibre di piccolo intestino. All’interno del muscolo ipertrofico, SMC, ICC, PDGFRα+e cellule neuronali sono notevolmente ristrutturate.
Protocol
Representative Results
Discussion
Abbiamo dimostrato che i topi che ricevono la chirurgia intestinale PO costantemente e riproducibile sviluppano ipertrofia della muscolatura liscia intestinale, che imita l’ostruzione intestinale umano. Ambulatori di ostruzione intestinale sono stati sviluppati per i diversi animali, tra cui7di topi, ratti10, cavie11, cane12 e gatti13. Il modello del mouse dell’ostruzione intestinale ha tempo, costo, di…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Gli autori vorrei ringraziare Benjamin J Weigler, D.V.M., pH.d. e Walt Mandeville, D.V.M (risorse animali & Campus frequentando veterinario, University of Nevada, Reno) per i loro servizi animale eccellente fornito per i topi, come pure la loro consiglio su procedure chirurgiche.
Materials
| Surgical drape | Medical and veterinary supplies | SMS40 | 40”X100 yards |
| Underpad, econ, pro plus | Medical and veterinary supplies | MSC281224 | 17×24” |
| Iris scissors | Braintree scientific, Inc | SC-i-130 | |
| Iris scissors | Vantage | V95-304 | |
| Dumont electronic & jeweler tweezers | Dumont | 98-180-3 | |
| Braided absorbable suture | Covidien polysorb | SL-5687G | 5-0, polyglactin |
| Nylon non-absorbable mono filament | AD surgical | S-N618R13 | 6-0, nylon |
| Surgical blade | Dynarex | No.15 | |
| Needle holder | Jacobson microvascular | 36-1342TC | 8.5 inch |
| Scalpel handle | Flinn scientific | AB1049 | |
| Microsurgical scissor | WPI | 503305 | |
| Petrolatum ophthalmic ointment | Puralube VET | 3.5 g | |
| Fluriso (isoflurane) | Vetone | V1 502017 | 250 ml |
| Steri-strip reinforced skin closure | 3M | R1547 | |
| Surgical gloves | Medline | MSG2270 | |
| Ear loop face mask | The safety zone | RS700 | |
| Avant gauze non-woven sponges | Caring | PRM25444 | |
| Surgical cup | Admiral craft OYC-2 | 725-A42 | 2.5 oz |
| Swabstick | ChloraPrep | 260103 | 2% w/v Chlorhexidine Gluconate (CHG) and 70% v/v Isopropyl Alcohol (IPA) |
| Cotton tipped applicator | Puritan | 806-WC | |
| Buprenorphine | Zoo pharm | BZ8069317 | 1 mg/ml |
| Gentamycin sulfate | Vetone | G-6336-04 | 100 mg/ml |
| Fast acting gel cream remover | Veet | 8111002 | |
| Syringe | AHS | AH01T2516 | 1 ml with needle |
| Silicon ring | VWR | 60985-720 | 6 mm in length, 4 mm exterior diameter, 3.5 mm interior diameter |
| C57BL/6 mice | The Jackson Laboratory | 4-6 weeks old |
Referências
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