Um modelo de peito fechado para induzir a constrição da aorta transversa em ratos

Summary

Aqui, apresentamos um protocolo de constrição transversal da aorta (TAC) através de uma toracotomia lateral. Esta técnica é um procedimento cirúrgico minimamente invasivo, fechado no peito, com o objetivo de simular a sobrecarga de pressão e de insuficiência cardíaca em ratos utilizando as configurações padrão de laboratório de TAC.

Abstract

Pesquisa sobre a hipertrofia cardíaca e insuficiência cardíaca baseia-se frequentemente a modelos de rato sobrecarga de pressão induzidos pela TAC. O procedimento padrão é a realização de uma toracotomia parcial para visualizar o arco aórtico transverso. No entanto, o trauma cirúrgico causado pela toracotomia em modelos de peito aberto altera a fisiologia respiratória como as costelas são dissecadas e deixou solteira após fechamento do peito. Para evitar isso, estabelecemos uma abordagem minimamente invasiva, fechado no peito através de toracotomia lateral. Aqui nos aproximamos da aorta através do espaço intercostal 2^nd sem entrar nas cavidades torácica, deixando o mouse com uma lesão menos traumática para recuperar. Realizamos esta operação usando as configurações padrão de laboratório para procedimentos de peito aberto TAC com as taxas de sobrevivência igual. Além de manter os padrões de respiração fisiológica devido a abordagem de peito fechado, os ratos parecem beneficiar, mostrando recuperação rápida, como a técnica menos invasiva aparece para facilitar um processo de cura rápido e reduzir a resposta imune após trauma.

Introduction

Modelos de mouse são frequentemente usados para imitar doenças humanas¹. Constrição da aorta transversa (TAC) é usada para induzir sobrecarga de pressão e hipertrofia de ventrículo esquerdo². O modelo de TAC de peito aberto em camundongos foi validado por Rockman et al ³ e o procedimento cirúrgico é descrito em detalhes por DeAlmeida et al ⁴. faixas da aorta transversa é mais favorável em comparação com a constrição da aorta abdominal, porque uma parcela maior da circulação pode compensar os efeitos negativos deste último procedimento²

Protocol

Este protocolo foi aprovado pelo Comitê de ética para experimentação de Animal LANUV Recklinghausen (#84-02.04.2016.A374). Geralmente, este procedimento é realizado em ratos adultos > 10 semanas de idade. No entanto, é possível realizar essa cirurgia em animais mais jovens também. Instrumentos cirúrgicos devem ser esterilizados antes do uso, e todas as etapas devem ser executadas sob condições assépticas.

1. indução da anestesia e intubação

1. Injete o peso do corpo de buprenorfina 0,1 µ g/g intraperitonealmente para alívio da dor. Repita as injeções intraperitoneal de buprenorfina 0,1 mg/kg cada 8 h para os próximos três dias após a....

Results

Uma bem sucedida TAC garante a indução de sobrecarga de pressão e hipertrofia ventricular esquerda. Uma validação ad hoc de sobrecarga de pressão pode ser alcançada usando a medição de velocidade de fluxo Doppler, como mostrado na Figura 2. Enquanto a velocidade do fluxo de sangue pré-operatório é igual em ambas as artérias carótidas, TAC faz com que uma velocidade aumentada do sangue na artéria carótida direita devido à elevada pressão no ventrículo esquerdo.......

Discussion

O início rápido da hipertensão devido TAC difere clinicamente relevante hipertrofia causada por estenose aórtica ou hipertensão. No entanto, o uso de modelos animais pequenos para induzir insuficiência cardíaca tem muitas vantagens e é, portanto, escolhido por muitos investigadores¹¹. Este modelo de peito fechado melhora os modelos já existentes da técnica cirúrgica para induzir a constrição da aorta transversa em ratos⁴.

O passo mais crítico é a.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Cateter de pressão-volume	Millar Instruments, EUA	SPR-839
Ventilador de rato	Harvard Apparatus GmbH, Alemanha	Minivent - TIPO 845
Ventilador de rato	Harvard Apparatus GmbH, Alemanha	Ligação em Y com cânula de intubação OD 1,2mm 73-2844
Vaporizador	Drä ger Medical AG&CO. KG, Alemanha	19.3 Isoflurano-Vaporizador (uma versão mais recente está disponível sob o número de catálogo  D-877-2010)
Microscópio	Leica Microsystems, Alemanha	MZ 7.5
Fonte de luz	Schott AG, Alemanha	KL 1500 LCD
6-0 Prolene	Ethicon, EUA	Sutura de polipropileno BV-1 9,3 mm 3/8c	para cirurgia
Seraflex	Serag Wiessner, Alemanha	USP 5/0 schwarz;   IC108000	sutura para constrição
Mesas de operação controladas homeotérmicas	Harvard Apparatus GmbH, Alemanha	Tipo 872/3 HT com tripé e controlador homeotérmico Tipo 874; 73-4233
Sonda retal flexível	Harvard Apparatus GmbH, Alemanha	1,6 mm OD; 55-7021
Instrumento de visualização de sinal Doppler	Indus Instruments, Estação	de trabalho de processamento de sinal Doppler (DSWP) dos EUA com módulo Doppler pulsado de 20 MHz
Pinça Intracapsular Arruga	Altomed, Reino Unido	A5400
Doppler Probe	Indus Instruments, EUA	Sonda montada em tubo de 20MHz