संयंत्र संक्रमण परीक्षण: स्प्रे और संयंत्र रोगज़नक़ Magnaporthe Grisea के साथ घाव मध्यस्थता टीका
Summary
यहां, हम संयंत्र रोगज़नक़ Magnaporthe grisea के साथ संयंत्र डाह परीक्षण करने के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं । यह रिपोर्ट कवक के pathotypes के बड़े पैमाने पर स्क्रीनिंग में योगदान देगी और आणविक प्रजनन के दौरान पौधों के प्रतिरोधी तंत्र को समझने के लिए एक उत्कृष्ट प्रारंभिक बिंदु के रूप में कार्य करेगी ।
Abstract
पौधों के पास रोगजनक कवक द्वारा संभावित खतरों से बचाव के लिए एक शक्तिशाली प्रणाली है । कृषि महत्वपूर्ण पौधों के लिए, तथापि, वर्तमान उपायों ऐसे रोगजनकों का मुकाबला करने के लिए भी रूढ़िवादी साबित कर दिया है और, इस प्रकार, पर्याप्त प्रभावी नहीं है, और वे संभावित पर्यावरणीय जोखिम पैदा कर सकते हैं । इसलिए, यह अत्यंत आवश्यक है की पहचान करने के लिए मेजबान प्रतिरोध कारकों स्वाभाविक रूप से प्रतिरोधी जर्मप्लाज्म की पहचान के माध्यम से संयंत्र रोगों को नियंत्रित करने में सहायता करने के लिए, अलगाव और प्रतिरोध जीन के लक्षण वर्णन, और आणविक प्रजनन प्रतिरोधी किस्मों की । इस संबंध में, नस्ल और संयंत्र प्रतिरोध जीन विकसित करने के लिए एक सटीक, तेजी से, और बड़े पैमाने पर टीका विधि स्थापित करने की आवश्यकता है । चावल विस्फोट कवक रोगज़नक़ Magnaporthe grisea गंभीर रोग के लक्षण और उपज नुकसान का कारण बनता है । हाल ही में, एम grisea संयंत्र कवक रोगज़नक़ बातचीत के तंत्र का अध्ययन करने के लिए एक मॉडल जीव के रूप में उभरा है । इसलिए, हम एक संयंत्र डाह परीक्षण विधि है कि एम. griseaके लिए विशिष्ट है के विकास की रिपोर्ट । यह विधि एक conidial निलंबन और mycelium क्यूब्स या conidial निलंबन की बूंदों के साथ टीका घाव के साथ दोनों स्प्रे टीका के लिए प्रदान करता है । अलग चावल के पत्तों के लिए घाव टीका विधि के प्रमुख कदम संयंत्र पत्तियों, जो किसी भी मेजबान पैठ प्रतिरोध की वजह से हस्तक्षेप से बचा जाता है पर घाव बनाने के लिए है । इस स्प्रे/घाव प्रोटोकॉल तेजी से, सटीक, और एम grisea के pathotypes के बड़े पैमाने पर स्क्रीनिंग के लिए अलग योगदान देता है । यह एकीकृत और व्यवस्थित संयंत्र संक्रमण विधि संयंत्र विकृति में मुद्दों का एक व्यापक परिप्रेक्ष्य पाने के लिए एक उत्कृष्ट प्रारंभिक बिंदु के रूप में काम करेंगे ।
Introduction
चावल विस्फोट, एम griseaकी वजह से, दुनिया भर में चावल किस्मों के लिए सबसे गंभीर बीमारियों में से एक है1,2। प्रक्रिया जिसके द्वारा एम grisea संक्रमित मेजबान संयंत्रों एक conidia उत्पादन और सतह लगाव, एक conidia अंकुरण और appressorium गठन, पैठ खूंटी और संक्रामक hypha भेदभाव के गठन, और एक रोग फैल शामिल 3. इन सभी चरणों के कई अंय संयंत्र रोगजनक कवक में आम हैं, और, वास्तव में, किसी भी एक मंच की नाकाबंदी मेजबान संयंत्रों के संक्रमण से बचाता है । अपने आर्थिक महत्व और आनुवंशिक पथ के कारण, एम grisea संयंत्र कवक रोगज़नक़ बातचीत के तंत्र का अध्ययन करने के लिए एक मॉडल जीव के रूप में उभराहै 1,4। इसलिए, एम. grisea में इन विकासात्मक चरणों के आणविक आधार का अध्ययन करने में मदद मिलेगी आणविक तंत्र अंतर्निहित कवक pathogenicity स्पष्ट और स्क्रीनिंग और डिजाइनिंग उपन्यास के लिए उंमीदवार लक्ष्य जीन की पहचान कवक5.
एम. grisea संक्रमण से संबंधित हाल की रिपोर्ट पूर्व के आणविक तंत्र पर ध्यान केंद्रित किया है, प्रवेश चरणों, विशेष रूप से conidiation, appressorium गठन, पैठ खूंटे, और संक्रामक विकास3, 6. इसलिए, यह एम. grisea संक्रमण परीक्षण करने के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल विकसित करने के लिए आवश्यक है । इस के साथ साथ, हम एक संक्रमण परीक्षण है कि एक conidial निलंबन और एम griseaके mycelial प्लग के साथ घावों के टीका के साथ स्प्रे मध्यस्थता संक्रमण परख का इस्तेमाल के लिए एक विस्तृत विधि प्रस्तुत करते हैं । इस रिपोर्ट में, प्रोटोकॉल उपभेदों की संस्कृति पर केंद्रित है, छिड़काव के लिए conidiation समाधान की तैयारी, और mycelial प्लग टीका पौधों की मध्यस्थता एम griseaके साथ । इन चरणों नीचे विवरण में वर्णित हैं, और एक योजनाबद्ध दृश्य विधि का संपूर्ण वर्कफ़्लो दिखा रहा है और एक विशिष्ट घावों के आंकड़े 1 और 2, क्रमशः में दिखाए जाते हैं ।
Protocol
Representative Results
Discussion
संयंत्र रोग प्रतिरोध जीन जीवाणुओं द्वारा संक्रमण को रोकने में एक आवश्यक भूमिका निभाते हैं, जिसमें फफूंद रोगजनकों सहित1,12. चावल विस्फोट रोगज़नक़ जनसंख्या संरचनाओं की प्रकृति को ?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस काम को बीजिंग कृषि विश्वविद्यालय (YQ201603) की विशेष वैज्ञानिक अनुसंधान परियोजना और बीजिंग शैक्षिक समिति (KM201610020005) की वैज्ञानिक परियोजना ने समर्थन दिया था ।
Materials
| Agar | AOBOX Biotechnology（China） | 01-023 | |
| Filter paper | GE Healthcare brand(Sweden) | 10311387 | |
| 50-mL tube | CORNING(Amercia) | 430290 | |
| Centrifuge | Eppendorf(Amercia) | 5804R | |
| Tween-20 | Coolaber（China） | CT11551-100ml | |
| Culture dish | Thermofisher(Amercia) | 150326 | |
| 0.5-5 mL pipette | Eppendorf | 4920000105 | |
| 100-1000uL pipette | Eppendorf | 4920000083 | |
| Vacuum pump | Leybold | D25B | |
| Dissection needle | FST | 26000-35 | |
| Incubator | MEMMERT | PYX313 | |
| Inoculation ring | Greiner Bio One | 731175 |
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