Summary

Labyrinthectomy quirúrgica de la rata para el estudio del sistema Vestibular

Published: May 19, 2018
doi:

Summary

Este protocolo describe el labyrinthectomy quirúrgica de una rata, que es un método útil para el estudio del sistema vestibular.

Abstract

Para estudiar el sistema vestibular o el proceso de compensación vestibular, se han desarrollado varios métodos para causar daño vestibular, que incluye labyrinthectomy quirúrgica o química y la neurectomía vestibular. Labyrinthectomy quirúrgica es un método relativamente simple, confiable y rápido. Aquí, describimos la técnica quirúrgica para rata labyrinthectomy. Bajo anestesia general se realiza una incisión postauricular para exponer el canal auditivo externo y la membrana timpánica, después de que la membrana timpánica y los huesecillos se quitan sin estribo. La arteria del estribo, que está situada entre el estribo y la ventana oval, es una estructura vulnerable y debe ser preservada para obtener un campo quirúrgico claro. A la ventana del vestíbulo se realiza un orificio con una broca de taladro de 2,1 mm superior al del estribo. Entonces, 100% de etanol es inyectado a través de este orificio y aspira varias veces. Meticulosa disección bajo un microscopio y un esmerado control de sangrado son esenciales para obtener resultados fiables. Los síntomas de la pérdida vestibular, como nistagmo, inclinación de cabeza y un movimiento de balanceo, se observan inmediatamente después de la cirugía. La prueba rotarod o rotación de la silla puede utilizarse en forma objetiva y cuantitativamente evaluar la función vestibular.

Introduction

El órgano vestibular es esencial para el control del equilibrio y el ojo. Una función vestibular normal depende simétricas señales aferentes de los órganos vestibulares en los dos oídos internos. Hipofunción vestibular o pérdida induce mareo, nistagmo y desequilibrio postural. Después de daño agudo, la función vestibular se recupera espontáneamente en varios días, un proceso conocido como compensación vestibular1,2. La compensación vestibular de déficit estático es un proceso de recuperación relacionados con el desequilibrio de la actividad espontánea de reposo entre los núcleos vestibulares ipsolaterales y contralaterales. La compensación vestibular de déficit dinámico se logra principalmente a través de sustitución sensorial y de comportamiento (usando entradas visuales o somatosensoriales)3. Estos procesos son atractivos para los estudios de plasticidad neuronal4,5.

Se han desarrollado una serie de métodos para estudiar el sistema vestibular y los mecanismos que sustentan la plasticidad neuronal durante la compensación vestibular, labyrinthectomy química y quirúrgica como neurectomía vestibular5,6 ,7,8. Neurectomía vestibular es la manera de inducir pérdida vestibular completa, pero es un procedimiento más invasivo y difícil y puede inducir daño cerebral8,9. Este método requiere mayor habilidad quirúrgica y toma más tiempo que labyrinthectomy. Labyrinthectomy química incluyendo gentamicina, arsanilate y tetracaína, es más fácil y puede producir resultados confiables10,11,12. Sin embargo, también puede dañar la cóclea y pérdida vestibular puede desarrollar con el tiempo11. Además, los efectos de las sustancias químicas en el cerebro, que deben preservarse para la evaluación precisa, son claros. Labyrinthectomy quirúrgico introdujo por primera vez en estudios en animales en 184215 y primero fue divulgado en la rata en 193616. Esta técnica se ha utilizado desde entonces en muchos animales estudios5,17,18,19. Labyrinthectomy quirúrgica es un método específico, fiable y relativamente sencilla. 13 , 14 por otra parte, los síntomas de daño vestibular se observan inmediatamente después de la cirugía. Aquí, Describimos nuestra técnica quirúrgica para la rata labyrinthectomy.

Protocol

Este estudio fue realizado conforme a cuidado institucional del Animal y uso Comité de Seúl Universidad Hospital Nacional (14-0148-C1A1), que está acreditado por la Asociación para la evaluación y la acreditación de laboratorio Animal Care Internacional. Nota: Los experimentos fueron realizados en ratas macho Sprague-Dawley (SD) de 7-8 semanas de edad (200/250 g). Cada animal se aclimata a las condiciones del laboratorio durante 1 semana antes del inicio del experimento. Los animales fue…

Representative Results

El éxito de la cirugía fue validado por pruebas de comportamiento. Todos los animales exhibieron el comportamiento típico de una pérdida unilateral de la función vestibular. Barril-balanceo espontáneo fue evidente inmediatamente después de la cirugía, siendo evocada por un soplo de aire sobre la cabeza o un ligero toque al cuerpo en la fase de recuperación temprana (Video 1). 3 d después de la cirugía, los animales mueve alrededor que se inclina hacia el lado l…

Discussion

Esta técnica es un método útil para crear pérdida de la función vestibular brusca, permanente y completa. Esto podría utilizarse para estudiar patologías vestibulares, como la neuritis vestibular, tumor acústico y la enfermedad de Meniere. Muchos estudios han utilizado esta técnica para estudiar la plasticidad neuronal de los núcleos vestibulares o el proceso central relacionados con5,17,18,<sup class="xref"…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Esta investigación fue apoyada por una donación de Corea salud tecnología R & D proyectos a través de la Corea salud industria desarrollo Institute (KHIDI), financiado por el Ministerio de salud y bienestar, República de Corea (número: HI15C2651).

Materials

ASPIRATOR KB-012 KOH BONG & CO., LTD. KB-012 Medical aspirator
Blade: #15 Fine Science Tools #10015-00 Blades for #7 Scalpel Handles, #15
Carbon Steel Burrs Fine Science Tools #19007-05 shaft diameter: 2.3 mm, length: 44 mm, package of 10 burrs
Carl Zeiss Surgical GmbH Carl Zeiss #6627100863 Surgical microscope
Dumont #3c Fine Science Tools #11231-20 Standard tip 0.17 x 0.10 mm, 11 cm
Dumont #5SF Fine Science Tools #11252-00
Dumont #7B Fine Science Tools #11270-20 Serrated 0.17 x 0.10 mm, 11 cm
Extra Fine Bonn: straight Fine Science Tools #14084-08 Iris scissors, best suited for microdissection under high magnification
Fine Iris Scissors: straight Fine Science Tools #14094-11 Made from martensitic stainless steel, combined with molybdenum and vanadium
Finger Loop Ear Punch Fine Science Tools #24212-01 1 mm. Provides stability and control for researchers using the numbering system
Hartman Fine Science Tools #13002-10 Tip width: 1 cm, serrated, 10 cm
Short Scalpel Handle #7 Solid Fine Science Tools #10003-12 #7 short, 12 cm
Small Vessel Cauterizer Fine Science Tools #18000-03 Replacement tip, straight knife, keeps bleeding to a minimum and therefore provides a surgical field clear of clamps and hemostats
Strong 207S SAESHIN 207S Powerful torque at low speed, available with speed or on/off foot controller
Suction Tubes JEUNGDO B&P CO., LTD. H-1927-8 Frazier, 18 cm
VICRYL ETHICON W9570T Synthetic absorbable sterile surgical suture
Weitlaner-Locktite Fine Science Tools #17012-13 Maximum spread: 4.5 cm, 2 x 3 blunt teeth, 11 cm
Zoletil Virbac, France Tiletamine-zolazepam
Rompun Bayer Xylazine
Rimadyl Pfizer Carprofen
Septra Pfizer Trimethoprim-sulfonamide 

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Chang, M. Y., Park, M. K., Park, S. H., Suh, M., Lee, J. H., Oh, S. H. Surgical Labyrinthectomy of the Rat to Study the Vestibular System. J. Vis. Exp. (135), e57681, doi:10.3791/57681 (2018).

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